【正文】 成液晶結(jié)構(gòu)，后者經(jīng)熱脈沖發(fā)生收縮作用，使細(xì)胞膜出現(xiàn)空隙，質(zhì)?；駾NA重組分子便可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)（感受態(tài)細(xì)胞）。影響轉(zhuǎn)化率的主要影響因素:1）載體本身的性質(zhì)及其空間構(gòu)象：超螺旋構(gòu)象轉(zhuǎn)化率最高；2）插入片段的大?。翰迦肫卧酱螅D(zhuǎn)化效率越低；3）受體細(xì)胞的類型及預(yù)處理；4）轉(zhuǎn)化方法：電擊法高于化學(xué)法。從總體上看，重組體分子的選擇與鑒定方法基本上可以分為如下幾個(gè)類型： （1）基于載體遺傳標(biāo)記檢測(cè)法在構(gòu)建基因工程載體系統(tǒng)時(shí)，載體DNA分子上通常攜帶了一定的選擇性遺傳標(biāo)記基因，轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞后可以使后者呈現(xiàn)出特殊的表型或遺傳學(xué)特性，據(jù)此可進(jìn)行轉(zhuǎn)化子或重組子的初步篩選。（3）基于外源基因產(chǎn)物檢測(cè)法如果目的基因產(chǎn)物能降解某些藥物使菌株呈現(xiàn)出抗性標(biāo)記，或者基因產(chǎn)物與某些藥物作用是顯顏色反應(yīng)，則可根據(jù)抗性或顏色直接篩選含目的基因的克隆子。2）抑制性差減雜交（SSH）SSH的核心技術(shù)是抑制性PCR，它是一種將檢測(cè)子cDNA單鏈標(biāo)準(zhǔn)化步驟和消減雜交步驟結(jié)合為一體的技術(shù)。3）差異顯示PCR（DD RTPCR）利用真核生物mRNA結(jié)尾處有POLY（A）結(jié)構(gòu)，在其3`端設(shè)計(jì)象5`T11GA樣引物，該引物可與mRNA總數(shù)的十二分之一結(jié)合，從而使這部分基因得到逆轉(zhuǎn)錄，同時(shí)結(jié)合5`端的隨機(jī)引物（20條10mer），可以使不同長(zhǎng)度的基因得到擴(kuò)增。5）擴(kuò)增限制性片段長(zhǎng)度多樣性（AFLP）基因組DNA經(jīng)過(guò)限制性內(nèi)切酶消化后，產(chǎn)生粘性末端。接頭和與接頭相鄰的酶切片斷的幾個(gè)堿基序列作為引物的結(jié)合位點(diǎn)。在列陣雜交的基礎(chǔ)上，還可以進(jìn)行雜交測(cè)序，從而測(cè)定每個(gè)cDNA克隆子的序列。優(yōu)點(diǎn)：l 簡(jiǎn)便、靈敏、高效、省時(shí)，能快速顯示mRNA的組成。l 各樣本mRNA的差異可同時(shí)進(jìn)行比較。缺點(diǎn)：l 假陽(yáng)性條帶多，對(duì)低豐度的基因表達(dá)不容易檢測(cè)。l 無(wú)法定量研究。利用該技術(shù)，目前已有越來(lái)越多的差別表達(dá)基因得以分離和鑒定，在分子生物學(xué)和基因工程研究領(lǐng)域發(fā)揮了極大的作用。原理：SSH的核心技術(shù)是抑制性PCR，它是一種將檢測(cè)子cDNA單鏈標(biāo)準(zhǔn)化步驟和消減雜交步驟結(jié)合為一體的技術(shù)。應(yīng)用：l 基因突變體的研究：如基因的表達(dá)與不表達(dá)；l 基因時(shí)空表達(dá)的研究：如根、莖、葉；l 不同處理?xiàng)l件下的基因表達(dá)差異：如施肥與不施肥、光照與不光照。A．酵母雙雜交技術(shù)原理：大部分真核生物的位點(diǎn)特異轉(zhuǎn)錄激活因子通常具有兩個(gè)可分隔開的結(jié)構(gòu)域，一個(gè)是DNA特異結(jié)合域（DNAbinging domain,BD），一個(gè)是轉(zhuǎn)錄激活域(transcriptional activation domain,AD)。不同來(lái)源的激活因子的BD區(qū)與AD區(qū)結(jié)合后則能特異地激活BD結(jié)合基因的表達(dá)。利用抗此外源基因編碼產(chǎn)物（多肽或蛋白）的抗體，通過(guò)親和純化，就能從大量的噬菌體中富集、分離出含有所要的基因的融合噬菌體。TDNA標(biāo)簽法克隆基因的一般技術(shù)路線。 農(nóng)桿菌侵染植物得到轉(zhuǎn)化苗，篩選出表現(xiàn)某種突變性狀的個(gè)體。 建立突變體基因組文庫(kù)及野生型基因組文庫(kù).216。216。216。第七章 克隆基因的表達(dá)通過(guò)比較，分析大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)和酵母表達(dá)系統(tǒng)各有何優(yōu)缺點(diǎn)。全基因組測(cè)序，共有4405個(gè)開放型閱讀框架； 242。繁殖迅速、培養(yǎng)簡(jiǎn)單、操作方便、遺傳穩(wěn)定； 242。大腸桿菌表達(dá)外源基因的劣勢(shì)： 242。缺乏對(duì)真核生物蛋白質(zhì)的修飾加工系統(tǒng)； 242。周質(zhì)內(nèi)含有種類繁多的內(nèi)毒素。 具有強(qiáng)的受嚴(yán)格調(diào)控的AOX1啟動(dòng)子252。 營(yíng)養(yǎng)要求低，工業(yè)化生產(chǎn)成本低252。 表達(dá)蛋白可存在于胞內(nèi)和胞外酵母表達(dá)系統(tǒng)的缺點(diǎn)：酵母表達(dá)蛋白有時(shí)會(huì)出現(xiàn)蛋白切割問(wèn)題（這個(gè)找不到，百度的）如何提高克隆基因的表達(dá)水平？1）、表達(dá)載體的優(yōu)化設(shè)計(jì)；2）、提高目標(biāo)基因mRNA和目標(biāo)基因產(chǎn)物的穩(wěn)定性；3）、密碼子偏愛性；4）、表達(dá)環(huán)境條件的優(yōu)化。 表達(dá)載體和基因工程一般克隆載體在元件構(gòu)成上有何差別？表達(dá)載體：?jiǎn)?dòng)子；終止子；核糖體結(jié)合位點(diǎn)（SD序列）；篩選標(biāo)記；復(fù)制子（質(zhì)?？截悢?shù)）；多克隆位點(diǎn)克隆載體：篩選標(biāo)記；復(fù)制子（質(zhì)?？截悢?shù)）；多克隆位點(diǎn) 根據(jù)表達(dá)蛋白用途的不同，設(shè)計(jì)選擇基因的表達(dá)策略。第八章植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的基本路線l 分離目的基因l 目的基因與恰當(dāng)?shù)妮d體DNA形成重組DNAl 重組DNA的擴(kuò)增l 目的基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞l 篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，誘導(dǎo)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植株l 轉(zhuǎn)基因植株的大規(guī)模種植外源基因?qū)胫参锏姆椒ㄖ饕心男?？Y 物理方法：電擊法、基因槍法(biolistic)、顯微注射法、微激光束法Y 化學(xué)方法：PEG介導(dǎo)法、脂質(zhì)體介導(dǎo)法Y 生物學(xué)方法：農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、花粉管通道法運(yùn)用已學(xué)的知識(shí)，如何全面分析獲得的轉(zhuǎn)基因個(gè)體（提示：包括外源基因是否整合，被插入位點(diǎn)分析，外源基因是否表達(dá)，表達(dá)量如何？等）對(duì)轉(zhuǎn)基因個(gè)體進(jìn)行檢測(cè)與鑒定的對(duì)象 ——報(bào)告基因 ——目的基因(1)基因組水平的檢測(cè)與鑒定（外源基因是否整合，被插入位點(diǎn)分析）：可以用PCR擴(kuò)增結(jié)合Southern Blotting進(jìn)行驗(yàn)證。(3)基因的翻譯水平的檢測(cè)與鑒定（表達(dá)量）：可用Western Blotting或者ELISA。(1)位置效應(yīng)：指插入部位及其周圍序列對(duì)外源基因的影響(2)DNA甲基化：包括編碼序列和啟動(dòng)子的甲基化(3)重復(fù)序列誘發(fā)基因沉默：多拷貝串聯(lián)重復(fù)序列易引起外源基因的失活；(4)共抑制（cosuppression）：具有部分同源性的外源基因和植物內(nèi)源基因相互作用引起的沉默現(xiàn)象。這個(gè)月里的時(shí)間里，經(jīng)過(guò)我個(gè)人的實(shí)踐和努力學(xué)習(xí)，在同事們的指導(dǎo)和幫助下，對(duì)村的概況和村委會(huì)有了一定的了解，對(duì)村村委會(huì)的日常工作及內(nèi)部制度有了初步的認(rèn)識(shí)，同時(shí)，在與其他工作人員交談過(guò)程中學(xué)到了許多難能可貴經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)。一、實(shí)習(xí)工作情況村是一個(gè)（此處可添加一些你實(shí)習(xí)的那個(gè)村和村委會(huì)的介紹）我到村村委會(huì)后，先了解了村的發(fā)展史以及村委會(huì)各個(gè)機(jī)構(gòu)的設(shè)置情況，村委會(huì)的規(guī)模、人員數(shù)量等，做一些力所能及的工作，幫忙清理衛(wèi)生，做一些后勤工作；再了解村的文化歷史，認(rèn)識(shí)了一些同事，村委會(huì)給我安排了一個(gè)特定的指導(dǎo)人；然后在村委會(huì)學(xué)習(xí)了解其他人員工作情況，實(shí)習(xí)期間我努力將自己在學(xué)校所學(xué)的理論知識(shí)向?qū)嵺`方面轉(zhuǎn)化，盡量做到理論與實(shí)踐相結(jié)合。我在村委會(huì)主要是負(fù)責(zé)管理日常信件的工作，這個(gè)工作看似輕松，卻是責(zé)任重大，來(lái)不得辦點(diǎn)馬虎。很感謝村委會(huì)對(duì)我這個(gè)實(shí)習(xí)生的信任，委派了如此重要的工作給我。為了做好信件的管理工作，我請(qǐng)教村委會(huì)的老同事、上網(wǎng)查閱相關(guān)資料，整理出了一套信函管理的具體方法。需要到郵局領(lǐng)取的函件，我都親自到郵局領(lǐng)取，并把信函分別發(fā)放到每個(gè)收件人的手里。我對(duì)工作的認(rèn)真負(fù)責(zé)，受到了村委會(huì)領(lǐng)導(dǎo)和同事們的一致好評(píng)，在他們的鼓勵(lì)下，我的工作干勁更足了。我學(xué)會(huì)了一些常見農(nóng)作物的生長(zhǎng)特征，也學(xué)會(huì)了怎么給農(nóng)作物施肥，灑藥。短短個(gè)月的實(shí)習(xí)生活很快就過(guò)去了，這次實(shí)習(xí)是我從學(xué)校踏入社會(huì)的第一步。在這次實(shí)習(xí)生活中，村委會(huì)的叔叔、阿姨們對(duì)我十分的照顧，在工作中，在生活上都給予了我很多的幫助，也對(duì)我寄予了很高的期望。二、發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題和建議在此次在村村委會(huì)頂崗實(shí)習(xí)的工作中，確實(shí)讓我學(xué)到了不少書本以外的知識(shí)，同時(shí)我也發(fā)現(xiàn)了不少問(wèn)題。第二，村委會(huì)工作人員思想比較守舊，缺乏對(duì)新事物、新觀念的學(xué)習(xí)和認(rèn)識(shí)。第四，村委會(huì)人員由于不是國(guó)家編制，工作人員的工作熱情和工作態(tài)度不是很積極。我相信，只要我認(rèn)真學(xué)習(xí)，好好把握，做好每一件事，實(shí)習(xí)肯定會(huì)有成績(jī)。通過(guò)實(shí)踐我深有感觸，實(shí)習(xí)期雖然很短，卻使我懂得了很多。第二篇:會(huì)計(jì)頂崗實(shí)習(xí)工作總結(jié)從我踏進(jìn)實(shí)習(xí)單位的那一刻起，我就知道我將經(jīng)歷一段特殊的不平凡的并且充滿收獲的人生旅程，那旅程必定在我的生命中寫下濃墨重彩的一筆，必定會(huì)在我的生命中留下絢爛多彩的回憶，必定會(huì)給我?guī)?lái)生命中無(wú)與倫比的財(cái)富。在這個(gè)時(shí)候，我來(lái)到圣鹿源生物科技股份有限公司在這里進(jìn)行我的畢業(yè)實(shí)習(xí)。在學(xué)校與社會(huì)這個(gè)承前啟后的實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)，我們對(duì)自己、對(duì)工作有了更具體的認(rèn)識(shí)和客觀的評(píng)價(jià)。向單位員工一樣上下班，完成單位工作；又以學(xué)生身份虛心學(xué)習(xí)，努力汲取實(shí)踐知識(shí)。主要有四個(gè)方面。二是提高了實(shí)際工作能力，為就業(yè)和將來(lái)的工作取得了一些寶貴的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。第三篇:工廠車間頂崗實(shí)習(xí)總結(jié)我懷著激動(dòng)的心情踏上了期待已久的頂崗實(shí)習(xí)之路，當(dāng)我坐上離開學(xué)校的的班車那一刻起，我就知道我將經(jīng)歷一段特殊的不平凡的并且收獲的人生旅程，那旅程必定在我的生命中寫下濃墨重彩的一筆，必定會(huì)在我的生命中留下絢爛多彩的回憶，并定會(huì)給我?guī)?lái)生命中無(wú)與倫比的財(cái)富。那時(shí)候想的是多么多么的好啊，直到此刻我才覺得我當(dāng)時(shí)是那么的幼稚，不可能你剛出來(lái)什么都沒有就讓你做好的崗位。當(dāng)我們來(lái)到實(shí)習(xí)點(diǎn)面對(duì)一間間產(chǎn)房和一條條流水線時(shí)，很多人后悔為什么當(dāng)初選擇了到海信科龍頂崗實(shí)習(xí)，但是我想說(shuō)，這是我所預(yù)料到的，這也是我想要的，我知道人只有在艱苦的環(huán)境中才能磨練出堅(jiān)強(qiáng)的意志，我也知道吃得苦中苦，方為人上認(rèn)得道理，我自然還不是人上人，但是我相信在這個(gè)世界上每一個(gè)人都渴成功，都渴自己有限的生命能創(chuàng)造出的價(jià)值，都渴為更多的人做出自己能做的一切，都渴在看來(lái)你的生命無(wú)可，我自然也比例外。到啦海信科龍之后，盡管他們很就幫我們把食宿解決啦，但那里生活習(xí)慣和在湖南的時(shí)候相差太大，吃的很不習(xí)慣。我的實(shí)習(xí)崗位被分配在總裝車間箱發(fā)組，面對(duì)一臺(tái)臺(tái)發(fā)好泡的冰箱從自己流過(guò)，而我的工作就是和這些冰箱打交道。要分清楚，不能弄錯(cuò)，不然會(huì)導(dǎo)致以后的環(huán)節(jié)出錯(cuò)，冰箱制冷時(shí)有可能電容會(huì)發(fā)爆炸。帶我的師傅是一個(gè)個(gè)中專生，開始時(shí)我覺得做這個(gè)很簡(jiǎn)單，不用學(xué)，一看就會(huì)，做是會(huì)做，不過(guò)不是最省力的方法，就那么做啦一天，做得很累，后來(lái)，我看師傅做看他做的很輕松很快，我就在想為什么我不行呢，難到是我不如他，我知道我不是只是我不夠虛心，不想學(xué)，看不起這個(gè)崗位，是我的態(tài)度，既然找到的根本原因，那就好解決啦。并且不懂的地方虛心討叫那些老員工。就這樣一直到今年，我把我那條的崗位都學(xué)會(huì)啦，并且我自己也當(dāng)師傅啦，而且是帶三個(gè)徒弟，分別教他們不同的崗位該怎么做，開始當(dāng)別人師傅時(shí)我覺得很好玩，終于不用自己做啦，可以徒弟來(lái)做啦，就這樣想，所以當(dāng)徒弟一來(lái)時(shí)，我就給他做啦，當(dāng)時(shí)我是舒服啦，不過(guò)后來(lái)就不是那么的啦，我沒有認(rèn)真的教他們......本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。不知道頂崗的生活會(huì)是怎樣，學(xué)校怎么樣，學(xué)生好不好管，會(huì)是收獲滿滿還是不如不曾經(jīng)歷過(guò)，一切都充滿疑惑。可轉(zhuǎn)眼間，實(shí)習(xí)已接近尾聲，中學(xué)是一個(gè)小社會(huì)，是大社會(huì)的一個(gè)縮影，頂崗實(shí)習(xí)是大學(xué)步入社會(huì)的一個(gè)縮影，是大學(xué)進(jìn)入社會(huì)的一個(gè)過(guò)渡。從腳步邁入二中這所學(xué)校大門開始，我就知道自己已經(jīng)不僅僅是一個(gè)大學(xué)生了，我現(xiàn)在是一個(gè)老師，我要以老師的身份來(lái)完成這半年的實(shí)習(xí)生涯。學(xué)校完全把我們這些頂崗實(shí)習(xí)生看成正式老師,無(wú)論哪一方面都更正式老師一樣,沒有區(qū)別。另外，學(xué)校還專門為我們配有指導(dǎo)老師。使我們?cè)诮虒W(xué)這條路上少走彎路。每一次準(zhǔn)備的過(guò)程都是在不斷的進(jìn)步。初為人師，總是有些緊張。同學(xué)們，現(xiàn)在開始上課。然而，這句話說(shuō)完，下句該說(shuō)什么呢？突然間我的腦袋一片空白，只能感覺到有十幾雙眼睛正齊刷刷地盯著我，讓我感到十分地不自在。這時(shí)學(xué)生也對(duì)著我微笑，看著他們那一張張稚氣的面孔，我所有的緊張都在這一瞬間消失了，透過(guò)那一雙雙澄清的眼睛，我也似乎讀到了那一顆顆純凈的心。從此以后，我便穿梭于講臺(tái)與辦公室之間。初為人師，總是有些緊張。同學(xué)們，現(xiàn)在開始上課。然而，這句話說(shuō)完，下句該說(shuō)什么呢？突然間我的腦袋一片空白，只能感覺到有十幾雙眼睛正齊刷刷地盯著我，讓我感到十分地不自在。第五篇:初中教師頂崗實(shí)習(xí)教學(xué)總結(jié)選擇頂崗實(shí)習(xí)是我從上大一就決定了的事情，如今實(shí)習(xí)已經(jīng)結(jié)束，回想這四個(gè)多月的經(jīng)歷發(fā)現(xiàn)自己收獲了很多。但是選擇它我無(wú)悔。一、自信登講臺(tái)，緊張不再來(lái)清楚地記得初登講臺(tái)是面對(duì)80多雙眼睛自己內(nèi)心的忐忑不安，當(dāng)時(shí)感覺自己做自我介紹是聲音都在打顫，后來(lái)不斷給自己加油打氣，慢慢的可以自信的站在講臺(tái)上，自然流暢地給他們上每一節(jié)課。在這一過(guò)程中我由一名學(xué)生轉(zhuǎn)變?yōu)橐幻處?，開始肩負(fù)更多的責(zé)任。初登講臺(tái)的我們對(duì)教材不熟悉，不能夠很好的掌握每課的重點(diǎn)難點(diǎn)，為了更好的掌握教材我不斷的向指導(dǎo)老師請(qǐng)教，剛開始每將一節(jié)課之前我都會(huì)問(wèn)指導(dǎo)老師自己備課是否合適，聽他的意見。聽了這些話我明白自己有進(jìn)步了一點(diǎn)。第六篇:大學(xué)生頂崗實(shí)習(xí)總結(jié)一、實(shí)習(xí)目的頂崗實(shí)習(xí)是我們大學(xué)期間的最重要的一門課程，不知不覺我們已經(jīng)走過(guò)大半大學(xué)時(shí)光，在這個(gè)時(shí)候，我們非常希望通過(guò)實(shí)踐來(lái)檢驗(yàn)自己掌握的知識(shí)的正確性。二、實(shí)習(xí)單位及崗位介紹電機(jī)有限公司，地處市區(qū)經(jīng)濟(jì)圈的中心地帶，交通便捷，地理位置優(yōu)越，是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的高新科技企業(yè)。主要生產(chǎn)電子零部件、計(jì)算機(jī)外圍設(shè)備、電子機(jī)械設(shè)備，音頻調(diào)諧器、視頻調(diào)諧器、調(diào)制解調(diào)器、電源器件、發(fā)送接收模塊、光盤驅(qū)動(dòng)器等。三、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過(guò)程為了達(dá)到畢業(yè)實(shí)習(xí)的預(yù)期目的，在學(xué)校與社會(huì)這個(gè)承前啟后的實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)，我們對(duì)自己、對(duì)工作有了更具體的認(rèn)識(shí)和客觀的評(píng)價(jià)。：在實(shí)習(xí)單位，師傅指導(dǎo)我的日常實(shí)習(xí)，以雙重身份完成學(xué)習(xí)與工作兩重任務(wù)......本文來(lái)自公務(wù)員之家，查看正文請(qǐng)使用公務(wù)員之家站內(nèi)搜索查看正文。歲月和流水卻像飯卡里的錢彈指間就揮霍盡了。回首平庸的過(guò)往動(dòng)覺慚愧不堪。真的不想如此般度過(guò)剩下的二分之一的時(shí)光，想要些特別的經(jīng)歷，想讓生命更厚重些，想讓青春更絢麗些，最終我選擇了頂崗實(shí)習(xí)。短短的一個(gè)月卻讓我經(jīng)歷了不尋常的人生，體驗(yàn)到了所謂的酸甜苦辣。一個(gè)月的感觸很多很多，濃縮一下是一下幾種心情:緊張無(wú)錯(cuò)九月一號(hào)下午來(lái)到鎮(zhèn)中學(xué)，第二天即九月二號(hào)就給我們安排了各自的教學(xué)任務(wù)。初為人師的我站在三尺講臺(tái)上，表面的平靜掩飾不了內(nèi)心的緊張和忐忑不安，面對(duì)隨手拎起來(lái)海撥比我高且年齡小不了幾歲的學(xué)生心里更是沒底。站在六十多人的最前面沒有成為主角的興奮的感，唯有感到孤獨(dú)！因?yàn)檫@邊九月底有個(gè)省里的聯(lián)查，所以新學(xué)期各個(gè)教研組都要有聽課、評(píng)課的活動(dòng)。一上來(lái)就把標(biāo)題《