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2025-06-20 18:08本頁面
【正文】 過調(diào)節(jié)流動相的壓力（調(diào)節(jié)流動相的密度），調(diào)整組分保留值；壓力效應(yīng)n SFC的柱壓降大（比毛細(xì)管色譜大 30倍），對分離有影響（柱前端與柱尾端分配系數(shù)相差很大，產(chǎn)生壓力效應(yīng)）；n 超臨界流體的密度受壓力在臨界壓力處最大，超過該點，影響小，超過臨界壓力 20%，柱壓降對分離的影響?。籲 壓力效應(yīng)：在 SFC中，壓力變化對容量因子產(chǎn)生顯著影響，超流體的密度隨壓力增加而增加，密度增加提高溶劑效率，淋洗時間縮短。程序升壓超臨界流體色譜的結(jié)構(gòu)與流程主要由高壓泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄裝置和溫度控制裝置組成 。 填充柱的超臨界流體色譜柱可采用液相色譜柱，毛細(xì)管超臨界流體色譜可采用氣相色譜的交聯(lián)毛細(xì)管柱，也可購買廠家專門制備的超臨界流體色譜柱。S 1時，SFC法的柱效可為 HPLC法的3倍左右，在最小板高下載氣線速度是 4倍左右；因此SFC法的分離時間也比 HPLC法短。 （ 2）與氣相色譜法比較 出于流體的擴(kuò)散系數(shù)與粘度介于氣體和液體之間，因此 SFC的譜帶展寬比 GC要?。涣硗?， SFC中流動相的作用類似 LC中流動相，流體作流動相不僅載帶溶質(zhì)移動，而且與溶質(zhì)會產(chǎn)生相互作用力，參與選擇競爭。 （ 3）應(yīng)用范圍的比較 下圖描繪了 SFC與其他色譜方法測定相對分子質(zhì)量范圍的比較。當(dāng)然，尺寸排阻色譜法（ SEC）所測分子質(zhì)量范圍是所有色譜法中最大的。167。由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實現(xiàn)分離。由此 發(fā)現(xiàn)樣品的遷移速度和方向由其電荷和淌度決定，第一次的自由溶液電泳，并制成了第一臺電泳儀，于 1948年獲諾貝爾化學(xué)獎 ；經(jīng)典電泳n 利用 電泳 現(xiàn)象對某些化學(xué)或生物物質(zhì)進(jìn)行分離分析的方法和技術(shù)叫電泳法或電泳技術(shù)。n 1981年， Jenson和 Luckas， 用 75m內(nèi)徑石英毛細(xì)管進(jìn)行電泳分析，柱效高達(dá) 40萬 /m， 促進(jìn)電泳技術(shù)發(fā)生了根本變革，迅速發(fā)展成為可與 GC、 HPLC相媲美的嶄新的分離分析技術(shù) ——高效毛細(xì)管電泳 。n 毛細(xì)管的采用使產(chǎn)生的熱量能夠較快散發(fā)，大大減小了溫度效應(yīng)，使電場電壓可以很高。電滲現(xiàn)象與電滲流n 當(dāng)固體與液體接觸時，固體表面由于某種原因帶一種電荷，則因靜電引力使其周圍液體帶有相反電荷，在液 固界面形成 雙電層 ，二者之間存在電位差。n 電滲現(xiàn)象中整體移動著的液體叫 電滲流 （electroosmotic flow ， 簡稱 EOF） 。電場作用下，毛細(xì)管柱中出現(xiàn) 電泳現(xiàn)象， 形成 電滲流 。n 正離子 ：兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向一致，在 負(fù)極最先流出 ；n 中性粒子 無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響， 在陽離子后流出 ；n 陰離子 ：兩種效應(yīng)的運(yùn)動方向相反。高效毛細(xì)管電泳特點n 、易自動化 電源、毛細(xì)管、檢測器、溶液瓶n 、分離效率高 在 36種無機(jī)及有機(jī)陰離子， 分離了 24種陽離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔 板數(shù)；n 、消耗少 進(jìn)樣量極少，水介質(zhì)中進(jìn)行；n 有機(jī)物、無機(jī)物、生物、中性分子；生物大分子等； 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等； 高效毛細(xì)管電泳理論基礎(chǔ)n 毛細(xì)管電泳 (CE)基本原理n CE中的電滲現(xiàn)象與電滲流n 影響電滲流的因素n 淌度n CE中的參數(shù)與關(guān)系式n 影響分離效率的因素毛細(xì)管電泳 (CE)基本原理n 電泳是指帶電離子在電場中的定向移動，不同離子具有不同的遷移速度。n 電場力： FE = qE n 阻 力： F = fνn 故： qE = fνn q—離子所帶的有效電荷；n E —電場強(qiáng)度；n ν—離子在電場中的遷移速度；n f —平動摩擦系數(shù) ( 對于球形離子： f =6πηγ； γ —離子的表觀液態(tài)動力學(xué)半徑； η —介質(zhì)的粘度； )所以，遷移速度： 物質(zhì)離子在電場中 差速遷移 是電泳分離的基礎(chǔ)。 CE中的電滲現(xiàn)象與電滲流 石英毛細(xì)管柱，內(nèi)充液 pH3時，表面電離成 SiO,管內(nèi)壁帶負(fù)電荷，形成雙電層。CE中電滲流的大小與方向 電滲流的大小用電滲流速度 ν 電滲流 表示，取決于電滲淌度 μ和電場強(qiáng)度 E。 ν 電滲流 = ε 0εξ E實際電泳分析，可在實驗測定相應(yīng)參數(shù)后，按下式計算 ν 電滲流 = Lef/teoLef — 毛細(xì)管有效長度； teo— 電滲流標(biāo)記物（中性物質(zhì)）的遷移時間。CE中電滲流的作用 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的 5～ 7倍； 各種電性離子在毛細(xì)管柱中的遷移速度為： ν + =ν 電滲流 + ν
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