其它色譜方法ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-30 18:08 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 物質(zhì)離子在電場中 差速遷移 是電泳分離的基礎(chǔ)。淌度 μ ：單位電場強度下的平均電泳速度。 CE中的電滲現(xiàn)象與電滲流 石英毛細管柱，內(nèi)充液 pH3時，表面電離成 SiO,管內(nèi)壁帶負電荷，形成雙電層。 在高電場的作用下，帶正電荷的溶液表面及擴散層向陰極移動，由于這些陽離子實際上是溶劑化的，故將引起柱中的溶液整體向負極移動，速度 ν 電滲流 。CE中電滲流的大小與方向 電滲流的大小用電滲流速度 ν 電滲流 表示，取決于電滲淌度 μ和電場強度 E。 即 ν 電滲流 = μ E電滲淌度取決于電泳介質(zhì)及雙電層的 Zeta電勢，即 μ = ε 0εξε 0— 真空介電常數(shù)； ε — 介電常數(shù)； ξ — 毛細管壁的 Zeta電勢。 ν 電滲流 = ε 0εξ E實際電泳分析，可在實驗測定相應(yīng)參數(shù)后，按下式計算 ν 電滲流 = Lef/teoLef — 毛細管有效長度； teo— 電滲流標(biāo)記物（中性物質(zhì)）的遷移時間。CE中電滲流的流形 電荷均勻分布，整體移動， 電滲流的流動為平流 ， 塞式流動 （譜帶展寬很?。?； 液相色譜中的溶液流動為層流， 拋物線流型 ，管壁處流速為零，管中心處的速度為平均速度的 2倍（引起譜帶展寬較大）。CE中電滲流的作用 電滲流的速度約等于一般離子電泳速度的 5～ 7倍； 各種電性離子在毛細管柱中的遷移速度為： ν + =ν 電滲流 + ν +ef 陽離子運動方向與電滲流 一致 ； ν =ν 電滲流 ν ef 陰離子運動方向與電滲流 相反 ； ν 0 =ν 電滲流 中性粒子運動方向與電滲流一致；（ 1）可一次完成陽離子、陰離子、中性粒子的分離；（ 2）改變電滲流的大小和方向可改變分離效率和選擇性，如同改變 LC中的流速；（ 3）電滲流的微小變化影響結(jié)果的重現(xiàn)性； 在 CE中，控制電滲流非常重要 。影響電滲流的因素 電滲流速度和電場強度成正比，當(dāng)毛細管長度一定時，電滲流速度正比于工作電壓。 不同材料毛細管的表面電荷特性不同，產(chǎn)生的電滲流大小不同；3. 電解質(zhì)溶液性質(zhì)的影響（ 1）溶液 pH的影響 對于石英毛細管，溶液 pH增高時，表面電離多，電荷密度增加，管壁 zeta電勢增大，電滲流增大， pH=7， 達到最大； pH3， 完全被氫離子中和，表面電中性，電滲流為零。分析時，采用緩沖溶液來保持 pH穩(wěn)定。（ 2）陰離子的影響 在其他條件相同，濃度相同而陰離子不同時，毛細管中的電流有較大差別，產(chǎn)生的焦耳熱不同。 緩沖溶液離子強度，影響雙電層的厚度、溶液黏度和工作電流，明顯影響電滲流大小。緩沖溶液離子強度增加，電滲流下降。4. 溫度的影響 毛細管內(nèi)溫度的升高，使溶液的黏度下降，電滲流增大。溫度變化來自于 “ 焦耳熱 ” ； 焦耳熱： 毛細管溶液中有電流通過時，產(chǎn)生的熱量； HPCE中的焦耳熱與背景電解質(zhì)的摩爾電導(dǎo)、濃度及電場強度成正比。 溫度每變化 1，將引起背景電解質(zhì)溶液黏度變化 2%～ 3%；5. 添加劑的影響（ 1）加入濃度較大的中性鹽，如 K2SO4， 溶液離子強度增大，使溶液的黏度增大，電滲流減小。（ 2）加入表面活性劑，可改變電滲流的大小和方向； 加入不同陽離子表面活性劑來控制電滲流。 加入陰離子表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉（ SDS）， 可以使壁表面負電荷增加， zeta電勢增大，電滲流增大；（ 3）加入有機溶劑如甲醇、乙腈，使電滲流增大。淌度 淌度 ： 帶電離子在單位電場下的遷移速度； 淌度不同是電泳分離的基礎(chǔ)。 (absolute mobility)μab 無限稀釋溶液中帶電離子在單位電場強度下的平均遷移速度，簡稱淌度?？稍谑謨灾胁殚啞?(effective mobility)μef 實際溶液中的淌度 (實驗中測定的 )。 μef=∑ aiμi ai — 溶質(zhì) i 的解離度； μi — 溶質(zhì) i 在解離狀態(tài)下的絕對淌度 μ ap 離子在實際分離過程中的遷移速度（表觀遷移速度）： ν ap=μap ? ECE中的參數(shù)與關(guān)系式（保留時間） HPCE兼具有電化學(xué)的特性和色譜分析的特性。有關(guān)色譜理論也適用。V— 外加電壓； L— 毛細管總長度；（塔板數(shù)） 在 HPCE中，僅存在縱向擴散， σ 2=2Dt 擴散系數(shù)小的溶質(zhì)比擴散系數(shù)大的分離效率高，分離生物大分子的依據(jù)。 影響分離度的主要因素；工作電壓 V； 毛細管有效長度與總長度比；有效淌度差。分離度可按譜圖直接由下
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