菌種的傳代與保藏ppt課件-在線瀏覽
2025-06-20 05:19本頁面
【正文】 04] ? 金黃色葡萄球菌 [CMCC (B)26003] ? 生孢梭菌 [CMCC(B)64941] ? 白色念珠菌 [CMCC(F)98001] 三、常用菌種保藏方法 (一 ) 菌種保藏的原理 ? 根據(jù)微生物的菌種生理、生化特性，在人工創(chuàng)造的條件下盡量降低微生物細(xì)胞的代謝強(qiáng)度，使細(xì)胞基本處于休眠狀態(tài)，生長繁殖受到抑制但又不至于死亡，以減低菌種的變異率。 ? 低溫、干燥、真空是用于菌種保藏的重要手段。 在實(shí)際工作中 ， 往往多種條件同時(shí)使用 , 以提高保藏效果 。 保藏期滿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行移種 。放在 4℃ 左右的冰箱中保藏。若用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，一般可保藏半年 ~ 一年。 ? （ 2） 適用范圍：細(xì)菌 、 酵母菌 、 霉菌保藏 。 缺點(diǎn)是 —— 保藏期太短；傳代次數(shù)多，易發(fā)生變異及污染。 ? 保藏時(shí) ， 破傷風(fēng)桿菌可用庖肉培養(yǎng)基；生孢梭菌用流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 。 ? 每次移植后 ， 應(yīng)與原菌種的編號 、 名稱逐一核對 ，確證培養(yǎng)基特征和純度無誤后再繼續(xù)保藏 。 ? 銅綠假單胞菌在冰箱中易發(fā)生菌體自溶而死亡 ，不宜用本法保存 。 （ 1）方法： ? 將菌種接種于斜面或穿刺于 ~ %瓊脂半固體高層培養(yǎng)基中 ， 培養(yǎng)好備用 。 ? 將上述液體石蠟加入培養(yǎng)好的菌種試管內(nèi) ， 液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基最上端 1 ㎝ 為宜 ， 將試管直立 ，放入 4℃ 冰箱中保藏 。 液體石蠟對各類菌種保藏效果 菌 種 菌株數(shù) 保存時(shí)間（年） 存活率（ %） 細(xì)菌 霉菌 酵母菌 放線菌 87 586 400 380 5 5 2 4 （ 3） 特點(diǎn)： 本方法簡便易行 ， 是實(shí)驗(yàn)室常用的一種保藏方法 ， 該法主要使菌種與空氣隔絕 。 ② 保藏過程中 ， 需經(jīng)常觀察斜面是否干燥 ， 如干燥 ， 需重新移種 。 ④ 將沾有少量液體石蠟的接種針浸于95%酒精中片刻 ， 再燒灼滅菌 ， 以免直接在酒精燈下燒灼時(shí) ， 液體石蠟四濺 ， 引起污染 。 一般以高出斜面 1 ㎝ 為宜 。 半固體瓊脂培養(yǎng)基 （ %） 40%甘油保存法 ： 四、試驗(yàn)用菌種的培養(yǎng)傳代方法 ? 程序： 凍干菌復(fù)蘇 ———— 接種 （ 斜面 ） （ 菌種傳代 ） （ 營養(yǎng)肉湯 ） 制備菌懸液 對照菌液
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