色譜的定性與定量ppt課件-在線瀏覽
2025-06-20 04:34本頁(yè)面
【正文】 ? 檢測(cè)限及定量限：確定靈敏度及線性范圍 ? 用標(biāo)樣建立標(biāo)準(zhǔn)曲線 ? 檢查方法的準(zhǔn)確度及精確度 ? 用標(biāo)樣定期檢查方法 （一）定量分析基礎(chǔ) 定量分析的目的： 要確定樣品中某一組分的準(zhǔn)確含量，是一種相對(duì)的定量方法 定量分析的方法： 在某些限定條件下，檢測(cè)器響應(yīng)值（色譜峰的峰面積或峰高） 所測(cè)組分的數(shù)量或濃度成正比 ， 即： 式中： –組分 i的質(zhì)量 —組分 i的濃度 —組分的校正因子（與檢測(cè)器的性質(zhì)和被測(cè)組分的性質(zhì)有關(guān)） —組分 i的峰面積， —組分 i的峰高 ? ? ? ?iiiii hAfCw ?ificiciwiAih 1）對(duì)稱峰的峰高和峰面積的測(cè)定 第一法：峰高 半高 峰寬 式中： h—從峰頂?shù)椒宓拙€的垂直距離 W h/2—峰高 1/2處的峰寬 2hWhA ??第二法：三角形法 式中： BM—三角形的高 Wi—三角形 KML的半高寬，近似等于色譜峰高 iWBMA ??? ? bbhA ???2)不對(duì)稱峰峰高和峰面積的測(cè)量 第一法：峰高 峰寬的平均值 式中： h—峰頂?shù)椒宓拙€的垂直距離 189。 故 fi無(wú)法直接應(yīng)用 ， 定量分析時(shí) ， 一般采用相對(duì)校正因子 。 式中： Vi , Vs—表示被測(cè)物質(zhì)、基準(zhǔn)物質(zhì)的體積 ssiiVAVAVf ?(3)相對(duì)響應(yīng)值 sˊ 相對(duì)響應(yīng)值是物質(zhì) i與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) S的響應(yīng)值（靈敏度）之比。 （ 4）校正因子的實(shí)驗(yàn)測(cè)量方法 ★ 樣品的準(zhǔn)備： 測(cè)定校正因子時(shí)，要精密稱定適量色譜純的被測(cè)組分和基準(zhǔn)物質(zhì)，配制成已知準(zhǔn)確濃度的樣品。 解： 222 10331 5 05 ?? ???? mmgmmgf i ?? ./即每平方毫米色譜峰面積代表 102μg乙醇 例： 準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量的色譜純對(duì)二甲苯 、 甲苯 、苯及仲丁醇 ， 混合后稀釋 ， 采用氫焰檢測(cè)器 ， 定量進(jìn)樣并測(cè)量各物質(zhì)所對(duì)應(yīng)的峰面積 ， 數(shù)據(jù)如下： 物質(zhì) 苯 仲丁醇 甲苯 對(duì)二甲苯 m/μg A/cm2 以仲丁醇為標(biāo)準(zhǔn) ， 計(jì)算各物質(zhì)的相對(duì)質(zhì)量校正因子 。 ★ 前提：樣品中的所有組分都能流出色譜柱，而且在檢測(cè)器上所有的組分都能產(chǎn)生信號(hào)。 ▼由于檢測(cè)技術(shù)的影響 ,HPLC中很少使用歸一化 內(nèi)標(biāo)法 內(nèi)標(biāo)法 ： 選擇適宜的物質(zhì)作為待測(cè)組分的參比物，定量加到樣品中去，根據(jù)待測(cè)組分和參比物在檢測(cè)器上的響應(yīng)值之比和參比物加入量進(jìn)行定量分析的方法。 待測(cè)組分 (i)的量 mi為： SSSiii AfmAfm ????SiiSSiiSiAAfAfAfmm??????SSiii mAAfm ????設(shè)樣品的總量為 m，則待測(cè)組分 i的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %1 0 0%1 0 0 ????????mAmAfmmwSSiiii內(nèi)標(biāo)法的特點(diǎn)： ★ 無(wú)歸一化法的限制，即只要被測(cè)組分能出峰，不和其他峰重疊，不管其他組分是否出峰或是否重疊，都可以用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析 ★ 定量準(zhǔn)確，受操作條件影響較小
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