疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)ppt課件-在線瀏覽
2025-06-18 18:21本頁面
【正文】 凝膠擴(kuò)散沉淀 免疫電泳 血清免疫電泳 火箭電泳 對(duì)流免疫電泳 三、補(bǔ)體參與的反應(yīng) 四、免疫標(biāo)記的抗原抗體技術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附（ ELISA） 一、凝集反應(yīng) 凝集反應(yīng)是指 顆?？乖?與相應(yīng)抗體結(jié)合反應(yīng)出現(xiàn)的可見性現(xiàn)象。凝集反應(yīng)中抗原稱為凝集原，抗體稱為凝集素。顆?？乖缤暾募?xì)菌、紅細(xì)胞等與相應(yīng)抗體相混合，在一定條件下出現(xiàn)凝集。 絮狀沉淀反應(yīng) 一系列試管中加入等量的抗體和遞增量的抗原，在中性條件下 37度保溫 12h，便可見到絮狀的蛋白質(zhì)沉淀。 環(huán)狀沉淀反應(yīng) 在試管中加入抗體后，小心加入相應(yīng)抗原，使抗原抗體步混合， 37度保溫 1020min，在二者界面上出現(xiàn)環(huán)狀沉淀。 雙向擴(kuò)散：又稱瓊脂擴(kuò)散，是利用瓊脂凝膠作介質(zhì)的一種沉淀反應(yīng)?？捎^測(cè)到沉淀弧。當(dāng)抗原、抗體存在多種體系時(shí)，會(huì)出現(xiàn)多條沉淀弧。 二、沉淀反應(yīng) 抗原抗體為單一體系時(shí)，抗原濃度不同，沉淀弧的特征不同： 抗原抗體為多體系時(shí)，出現(xiàn)的沉淀弧有多條，彼此互不干擾。與雙向擴(kuò)散不同的是在瓊脂中含有一定量的抗體，孔內(nèi)加入未知量的相應(yīng)抗原。根據(jù)沉淀圈的大小確定抗原的含量 ? 二、沉淀反應(yīng) 二、沉淀反應(yīng) 另外還有其他眾多的免疫檢測(cè)技術(shù)和手段，其機(jī)理都利用了抗原抗體的沉淀反應(yīng)。 免疫電泳 二、抗原或抗體檢測(cè)的現(xiàn)代方法： P312 1. 免疫熒光技術(shù) 2. 酶聯(lián)免疫分析法 3. 放射免疫分析法 第一節(jié)免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)原理 二、抗原或抗體檢測(cè)的方法： 1. 免疫熒光技術(shù) 將結(jié)合有熒光素的熒光抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的技術(shù) 常用的熒光素有異硫氰酸熒光素（ fluorescein isothiocyanate, FITC)和羅丹明（ rhodamine B200,RB200)等。 第一節(jié) 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)原理 二、抗原或抗體檢測(cè)的方法： 1. 免疫熒光技術(shù) ? 直接熒光法 ? 間接熒光法 第一節(jié) 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)原理 二、抗原或抗體檢測(cè)的現(xiàn)代方法： P313 2. 酶聯(lián)免疫分析法 3. 放射免疫分析法 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中 的應(yīng)用 一、基本原理： 將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，試劑與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)后，測(cè)定復(fù)合物中的熒光素，這種免疫技術(shù)，稱為 免疫熒光素技術(shù) 。 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 五、熒光顯微鏡檢查 ? 染色當(dāng)天即作鏡檢 ? 通風(fēng)良好的暗室內(nèi)進(jìn)行 ? 選擇好光源或?yàn)V光片 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 五、熒光顯微鏡檢查 ? 染色當(dāng)天即作鏡檢 ? 通風(fēng)良好的暗室內(nèi)進(jìn)行 ? 選擇好光源或?yàn)V光片 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 四、熒光抗體染色方法 直接法 間接法 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 四、熒光抗體染色方法 直接法 間接法 使用了兩種抗體： 一抗、二抗 二抗如何獲得？ 第二節(jié) 免疫熒光技術(shù)在食品檢測(cè)中 的應(yīng)用 六、在食品檢驗(yàn)中的應(yīng)用 P317 免疫熒光檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，可檢測(cè)細(xì)菌、病毒、寄生蟲等，在食品衛(wèi)生領(lǐng)域也應(yīng)用的越來越多。 酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定 enzyme linked immunosorbent assay， ELISA 第三節(jié) 免疫酶技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 ELISA 基本原理 ①使抗原或抗體 結(jié)合到某種固相載體表面 ，并保持其免疫活性。 第三節(jié) 免疫酶技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用 ELISA 基本原理 在測(cè)定時(shí)，把受檢酶標(biāo)抗體或抗原和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故 可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析 。在這種測(cè)定方法中有 3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體， ②酶標(biāo)記的抗原或抗體， ③酶作用的底物。
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