dna的粗提取和鑒定-在線瀏覽
2025-06-13 08:46本頁(yè)面
【正文】 L燒杯中，玻棒 攪拌 ，離心或靜置沉淀。 （ 4）若選用動(dòng)物肝臟做實(shí)驗(yàn)材料，在提取之前，最好增加 程序，使組織細(xì)胞更易分離。 在實(shí)驗(yàn)中很難提取到 DNA 哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核，反靠白細(xì)胞 和淋巴細(xì)胞中的少量 DNA，在實(shí)驗(yàn)中很難提取到 肝細(xì)胞中含有細(xì)胞核，并且肝組織容易被破壞，有利于 DNA的提取 若使肝組織易分離，將肝細(xì)胞剪碎、研磨是一種簡(jiǎn)便易行的方法。 提取較純凈的 DNA： DNA的鑒定： 取 兩試管 各加 2mol/L的 NaCl溶液 ， 將 DNA充分溶解于其 中一試管 ， 然后向兩試管 加入 二苯胺試劑 ， 混勻沸水中加熱 5min后 冷卻 ， 可發(fā)現(xiàn) DNA與試劑反應(yīng)使溶液呈 現(xiàn)藍(lán)色 。 2)實(shí)驗(yàn)方法步驟： 在上述溶液中緩緩 加入蒸餾水， 并沿一個(gè)方向 輕輕攪拌 ，出現(xiàn)絲狀物； 當(dāng)絲狀物不在增加時(shí)，停止加水 （此時(shí) NaCl溶液的濃度相當(dāng)于 ）。 濾液中含有 DNA。 利用細(xì)胞吸水破裂，細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)釋放出來(lái)，后用 紗布 過(guò)濾取其濾液。 8 鑒定 不變藍(lán) —— 對(duì)照組 溶液逐漸 變藍(lán) 絲狀物 (DNA) 實(shí)驗(yàn)組 圖示 結(jié)果 加入物質(zhì) 比較 均加入： ① 4 mL二苯胺試劑 ② 2mol/LNaCl溶液 5 mL 鑒定時(shí)藍(lán)色的深淺與溶液中 DNA的含量多少有關(guān)。 鑒定所用的試劑是 二苯胺 或 甲基綠 。用 甲基綠不用水浴 加熱。 ② 整個(gè)實(shí)驗(yàn)中 加入 “ 兩次蒸餾水， 三次 NaCl溶液 ，一次酒精 ” 兩次加蒸餾水的目的不同，一是漲破細(xì)胞，二是稀釋溶液。 ③ 加蒸餾水或加入酒精用玻棒攪拌時(shí) ,動(dòng)作要 輕緩且朝一個(gè)方向 。 使用時(shí)注意玻璃棒不要碰到燒杯底。 ⑤二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用 ,否則會(huì)影響鑒定的效果 .二苯胺是一種有毒性的試劑 ,使用時(shí)注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位 . ⑥ 盛放雞血細(xì)胞的容器 最好是塑料容器 （雞血細(xì)胞破碎后釋放的DNA，容易被玻璃容器吸附，造成提取過(guò)程中 DNA的損失） 11 DNA的直徑約為 20 1010 m，實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的絲狀物的粗細(xì)是否表示 1個(gè) DNA分子直徑的大小？ 答： DNA分子直徑只有 2 nm。 12 下圖為 “ DNA粗提取和鑒定 ” 實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作。 C 13 甲、乙兩圖為 “ DNA的粗提取與鑒定 ” 實(shí)驗(yàn)中涉及的兩個(gè)操作裝置圖。 ? 洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜 的原因是：洗滌液中含有十二烷基硫酸鈉和堿， 它們可使細(xì)胞膜破裂，蛋白質(zhì)變性，使蛋白質(zhì)與 DNA分離開來(lái)。 ? 動(dòng)物細(xì)胞膜是不用試劑（ 洗滌劑）破壞的， 因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞膜外面沒有細(xì)胞壁的保護(hù) ，放在清水中自然的就會(huì)吸水而脹破，釋放出其中的 DNA等物質(zhì)。 16 方法步驟 將 30g香蕉或菜花切碎，放入研缽中。 將混合液用兩層紗布過(guò)濾，向?yàn)V液中加入 預(yù)冷 的 10ml乙醇 溶液，靜置，可產(chǎn)生絮狀的 DNA。 有利于 DNA的溶解 向研缽中加入 10ml蒸餾水或涼開水，攪拌。 能溶解細(xì)胞膜，有利于 DNA的釋放； DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì) 17 2022年高考生物試題 : 在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因，該對(duì)提高農(nóng)作物的抗寒能力有較好的應(yīng)用價(jià)值，該基因可以從這些魚的 DNA中擴(kuò)增得到。（ 列舉兩點(diǎn)） ① 選擇 NaCl溶液的合適濃度，利用 DNA和其它雜質(zhì)在不同 NaCl溶液中溶解 度不同的特性，達(dá)到分離目的； ②加人一定量酒精，使部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)溶解于酒精， 與 DNA分離； ③加人蛋白酶，除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)的干擾； ④控制 DNA提取的溫度，使大多數(shù)蛋
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1