dna的粗提取和鑒定(已修改)
2025-05-08 08:46 本頁面
【正文】 1 課題 DNA的 粗 提取與鑒定 染色體成分 蛋白質(zhì) RNA(少量 ) DNA 提取 DNA的基本思路： 利用 DNA與 RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取 DNA，去除其他成分。 2 DNA的粗提取與鑒定 1．原理、方法和目的 基本原理 方法 目的 DNA在不同濃度的 NaCl溶液中的溶解度不同，在 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低 溶于 NaCl溶液中并稀釋 ① NaCl溶液為 2 mol/L時， DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析生成沉淀，通過過濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于 NaCl溶液的雜質(zhì) ②當(dāng) NaCl溶液稀釋至 mol/L時， DNA析出，過濾可除去溶于 NaCl溶液的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì) DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì) （ 酶的專一性） DNA不溶于酒精溶液 加入冷卻酒精 (95%) DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì) DNA可被二苯胺染成藍(lán)色 加入二苯胺，并沸水浴 鑒定 DNA 高溫 DNA耐高溫 DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同：蛋白質(zhì)、 DNA熱穩(wěn)定性不同。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受 60～80℃ 的高溫，而 DNA在 80℃ 以上才會變性。 DNA對洗滌劑耐受性 洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對 DNA沒有影響。 加入 洗滌劑 3 1）不同濃度 NaCl中 DNA溶解度不同。 2） DNA與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同， DNA不溶于酒精，細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。 3） DNA和蛋白質(zhì)對酶耐受性不同：酶的專一性 —— 蛋白酶水解蛋白質(zhì)。但是對 DNA沒有影響。 4） DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同：蛋白質(zhì)、 DNA熱穩(wěn)定性不同。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受 60～ 80℃ 的高溫，而 DNA在 80℃ 以上才會變性。 5） DNA和蛋白質(zhì)對洗滌劑耐受性不同：洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對 DNA沒有影響。 提取 DNA的原理包括 DNA的 兩個方面 溶解性和耐受性 實驗原理 4 ①動物 雞血細(xì)胞液的優(yōu)點 提醒： 人和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中不含細(xì)胞核，也沒有DNA，不適于作為 DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。 雞血紅細(xì)胞、白細(xì)胞中都有細(xì)胞核，含大量的 DNA,既經(jīng)濟又易取 ② 植物：新鮮菜花、蒜黃、菠菜等。 5 方法與過程 1).制雞血細(xì)胞液 活 雞鮮血 180mL 500mL燒杯中，玻棒 攪拌 ，離心或靜置沉淀。 離心或靜置后去掉上清液 血漿 血細(xì)胞 6 關(guān)于 DNA粗提取的實驗材料的選擇，也經(jīng)過了多次實驗結(jié)果的比較，最終選擇雞血做實驗材料的原因是什么？請回答下列問題： （ 1）雞血中紅細(xì)胞 ，家雞屬于鳥類，新陳代謝旺盛，因而血液中 細(xì)胞數(shù)目較多，可以提供豐富的 （ 2）實驗前由老師制備雞血細(xì)胞液供同學(xué)們做實驗材料，而不用雞全血，主要原因是 （ 3）生活在牧區(qū)的人們，采集羊、牛和馬血比較方便，若他們按實驗要求完成實驗步驟后，結(jié)果是 ， 這是因為 ， 但若改用動物肝臟做實驗材料，實驗可以順利進(jìn)行，這是因為
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