【正文】 一種生量失調(diào)癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。結(jié)果是瓶內(nèi)的小苗過渡生長，但有用的苗很少。大量的試驗表明：玻璃幕化苗是在芽分化啟動后的生長過程中，由碳水化合物、氮代謝和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響和控制，產(chǎn)生玻璃化的主要原因有：激素濃度、溫度、濕度、培養(yǎng)基的硬度、光照時間和培養(yǎng)成分。簡述外植體的褐變及其預防措施。它的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌類化合物，醌類化合物在酪氨酸酶的作用下，與外植體組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合，進一步引起其他酶系數(shù)失活，導致組織代謝紊亂，生長受阻，最終逐漸死亡。減輕褐化現(xiàn)象的途徑有以下：●外植體和培養(yǎng)材料進行20—40天的遮光培養(yǎng)或暗培養(yǎng)；●選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)整激素用量；●控制溫度和光照，在不影響正常生長和分化的前提下，盡量降低溫度，減少光照；●冬春季節(jié)選擇年齡適宜的外植體材料進行組培，并加大接種數(shù)量；●在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑和其他抑制劑，如抗壞血酸、硫代硫酸鈉、有機酸、半光氨酸及其鹽酸鹽、亞硫酸氫鈉、氨基酸等，可以有效地抑制褐化；●加快繼代傳瓶的速度，添加活性炭等吸附劑（%—%），是生產(chǎn)上常用的有效方法。專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)測試題一．單選題1．植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（ ） ，給予適宜的營養(yǎng)和外部條件2．以下成為組織培養(yǎng)條件的是 ( )①由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差 , 對無菌操作的要求非常嚴格消毒效果 , 另一方面還要考慮植物材料的耐受能力 ④不同藥劑、不同植物材料甚至不官是 ( )A. 有利于細胞分裂 , 但細胞不分化 B. 細胞既分裂又分化C. 分化頻率提高 D. 有利于細胞分化 , 但不分裂，切取胡蘿卜的外植體時一般選擇（ ）A．具有木質(zhì)部的部分 B．具有韌皮部的部分C．具有形成層的部分 D．具有髓的部分7．菊花的組織培養(yǎng)一般選擇（ ）A．開過花的老枝 B．正在開花的枝條D．動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株9．細胞具有全能性的原因是（ ）生物體細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能生物體的每一個細胞都具有全能性C．選擇合適的花粉發(fā)育時期 D．材料的低溫處理與接種密度12．粗糙脈孢菌的單倍體細胞中具有7條染色體。此過程最終形成的子細胞數(shù)及每個子細胞中的染色體數(shù)分別為（ ）A．8個、7條 B．8個、14條 C．4個、7條 D．4個、14條13．某高等植物體細胞內(nèi)假設(shè)有6條染色體，它們是AaBbDd，那么，一個花粉管中的兩個精子中的染色體是（ ）A．ABD和abd B．AbD和abd C．AaB和Bbd D．Abd和Abd14．如果某種植物的基因型為AABb，這兩對基因分別位于兩對同源染色體上，去雄后授以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（ ）A．AAaBBb、AAabbb、AAaBbb B．AABB、AABbC．子房中受精胚珠的數(shù)目 D．胚囊中胚的數(shù)16．(2003年高考江蘇卷)要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株，需要( ) B. 微生物培養(yǎng)基以有機物為主 19．下圖是被子植物的受精過程寫出圖中數(shù)字所代表的結(jié)構(gòu)的名稱：① ② ③ ④（2）草履蟲進行 生殖；蘑菇進行（3）下列圖解表示水稻（2n=24）胚珠中胚囊的發(fā)育過程，試根據(jù)圖回答：薄壁細胞 直接發(fā)育 減數(shù)分裂珠心 孢原細胞（2n）②水稻胚珠中的胚囊應(yīng)共有染色體 條，其中卵細胞中含染色體 條；若水稻授粉受精后發(fā)育成胚和胚乳，則胚細胞中含有染色體 條，胚乳細胞中含染色體 條。④如果水稻卵細胞基因型應(yīng)為Ab，則極核的基因型為 ，其原因是（4）番茄的染色體數(shù)目是24，一個番茄細胞發(fā)生減數(shù)分裂，形成的細胞中有三個退化消失。2A．4個核，各有12個染色體 B．4個核，各有24個染色體C．8個核，各有24個染色體 D．8個核，各有12個染色體（5）玉米的體細胞含有20條染色體。2A．20 B．20C．20 D．2020．閱讀下列材料，分析后簡要回答問題：寫出以下過程或結(jié)構(gòu)的名稱：A ；B ；C ；D 。（3）A過程是否需要光照？ ；再分化是否需要光照？ 。培育胚狀體利用了 這一項生物技術(shù)。（3）由人工種子萌發(fā)出的植株是否可育？說明理由。22．參考答案：115：CCCAB CCACC AADCC（2）分裂 孢子 出芽愈傷組織。原生質(zhì)體b3．植物體細胞雜交的結(jié)果是CD．形成愈傷組織下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述中，錯誤的是A．驅(qū)蚊草的培育屬于細胞工程育種，其優(yōu)點是能克服遠源雜交不親和的障礙C．驅(qū)蚊草培育過程是植物體細胞雜交，不同于植物組織培養(yǎng)無愈傷組織和試管苗形成5．（2005，上海）將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是（D）C、離體狀態(tài)6．植物體細胞雜交的目的中錯誤的是（）（）D．生產(chǎn)白細胞介素－2顯示細胞核），將A、B兩種植物細胞去掉細胞壁后，誘導二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細胞，若經(jīng)過）A．二倍體；基因型是DdYyRrB．三倍體；基因型是DdYyRrD．四倍體；基因型是DDddYYyyRRrrCA、原生質(zhì)泛指細胞內(nèi)的基質(zhì)C、一個動物細胞就是一團原生質(zhì)D、細胞膜、細胞核和細胞壁是原生質(zhì)D11．植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是C12．細胞具有全能性的原因是C）B．未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程）（）③愈傷組織④脫分化A．①④③⑤②⑥C．①⑤④③②⑥16．下列有關(guān)細胞工程的敘述不正確的是）在細胞整體水平上定向改變遺傳物質(zhì)C．在細胞器水平上定向改變細胞核的遺傳物質(zhì)17．下列細胞全能性最高的是）B．植物的精子細胞D．被子植物的的葉肉細胞（）B、細胞膜發(fā)生融合（）（）C、細胞核不是原生質(zhì)D、一個動物細胞就是一團原生質(zhì)BB．原生質(zhì)體包括細胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)D．原生質(zhì)體只能用于植物細胞工程《緒論》復習題及參考答案★根據(jù)培養(yǎng)的材料，植物組織培養(yǎng)分：愈傷組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)、快速發(fā)展和應(yīng)用階段1902年，“全能性”學說1934年，White出版了《植物組織培養(yǎng)手冊》從而使植物組織培養(yǎng)為一門新興學科。二、名詞解釋：tissue由于培養(yǎng)材料已脫離了母體，又稱為植物離體培養(yǎng)（culturevitro）。脫分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化。再分化（redifferentiation）：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官，這一過程稱為植物細胞的再分化?！锿庵搀w(explant)：由活體（in包括各種器官、組織、細胞或原生質(zhì)體等三、問答題：植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是細胞全能性學說，即植物體的每一個細胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。（1）培養(yǎng)條件可以人為控制（3）管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制：（1）（2）（3）（1）快速繁殖運用組織培養(yǎng)的途徑，一個單株一年可以繁殖幾萬到幾百萬個植株；（3）培育和創(chuàng)制新品種利用組織培養(yǎng)可以使難度很大的遠緣雜交取得成功，從而育成一些罕見的新物種；植物細胞次生物質(zhì)的研制與生產(chǎn)碩果累累，后來居上。（5）植物種質(zhì)資源的離體保存植物組織培養(yǎng)結(jié)合超低溫保存技術(shù)，可以給植物種質(zhì)保存帶來一次大的飛躍。（6）人工種子體細胞胚由無性繁殖體系產(chǎn)生，可以固定雜種優(yōu)勢。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。無性系變異：由任何形式的細胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異?？醋o培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護組織培養(yǎng)細胞的一種方法。種質(zhì)：親代通過生殖細胞活體細胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。細胞全能性：任何有完整細胞核的植物細胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完整植株的潛在能力。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實現(xiàn)受精的技術(shù)。植板率：(每個平板上形成的細胞團數(shù) / 每個平板上接種的細胞總數(shù)) * 100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。細胞融合：在自發(fā)或人工誘導下，兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。植物組織培養(yǎng)過程中，細胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時則促進愈傷組織形成。酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為7075%和 %；消毒時間的范圍分別為 215min。在細胞懸浮培養(yǎng)時，實現(xiàn)培養(yǎng)細胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。常用于誘導愈傷組織的植物激素是2，4D。1在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護劑一般是二甲基亞砜（DMSO)。1無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測法等1用于細胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍染色法。11典型的人工種子由體細胞胚、人工胚乳和人工種皮構(gòu)成。根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā)生型。2目前用于細胞融合的方法主要有自發(fā)融合和誘導融合兩種。2懸浮培養(yǎng)中細胞生長的測定方法：細胞計數(shù)、細胞密實體積（PCV）及細胞總體積、細胞鮮重和干重、細胞有絲分裂的指數(shù)。2單倍體育種的主要有優(yōu)點是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。2在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward報道了胡蘿卜細胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers報道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年Cooking報道了誘導雞紅細胞與酵母細胞融合培養(yǎng)。組織培養(yǎng)中的突變可分為體細胞無性系變異和加選擇壓（化學物質(zhì)）誘導產(chǎn)生的變異。A 6BA B 2，4D C IBA D ZT在用物理方法誘導原生質(zhì)體融合時，下列哪種方法不在此列（ C ）。A 葡聚糖硫酸鉀 B CaCl2 C 甘露醇 D MgSO4在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護劑一般是（ A ）。通過機械法和酶解法比較原生質(zhì)體分離優(yōu)缺點。缺點：獲得的原生質(zhì)少，產(chǎn)生的原生質(zhì)的細胞類型限制，一般取材局限于具有液泡化程度較大的細胞或長形 的細胞組織。 缺點：酶制劑含有核酸酶，蛋白酶，過氧化物酶及酚類物質(zhì)，會影響原生質(zhì)體的活力。一、天然化合物的生產(chǎn)與特化：(1)植物次生代謝物的產(chǎn)生、(2)進行特化的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)、(3)細胞的工廠化生產(chǎn) 二：突變體選擇：（1）直接選擇法、（2）間接選擇法、（3）誘導多倍體簡述實現(xiàn)懸浮培養(yǎng)細胞同步化的兩種主要方法：（1）饑餓法 （2）抑制法單倍體育種優(yōu)點是什么？（1）良好的遺傳研究材料（2）加速育苗進程（3）提高選育效率（4）突變體選育，單倍體植株基因表達不受遮蔽，可以充分展示基因型所決定的表現(xiàn)型（5）遺傳轉(zhuǎn)化受體，確保外源基因的穩(wěn)定遺傳，大大提高遺傳轉(zhuǎn)化率（6）利用單倍體育種時，栽培品種進行純化對基因型混雜品種進行純化。（1）比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)，研究植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和再生植株技術(shù)，有可能采取細胞遺傳工程的方法培育出新品種。（3）原生質(zhì)體可以作為遺傳理論研究的材料。(2)溫度：酶解溫度2530，兼顧原生質(zhì)穩(wěn)定性及酶活性(3)時間：幾小時或幾十小時，太長時間影響原生質(zhì)活力，一般少于24小時(4)細胞壁降解酶的種類和組合(5)滲透壓的穩(wěn)定性種類(6)原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑(7)PH影響1簡述離體授粉的主要方式？（1）離體柱頭授粉 （2）離體子房授粉 （3）離體胚珠授粉1簡述試管苗移栽不易成活的原因？（1）根系結(jié)構(gòu)不完善，不生根，根與芽的輸導不相通（愈傷組織），再生根的吸收功能差；（2）葉部結(jié)構(gòu)不完善，缺少角質(zhì)層和蠟質(zhì)層，保水性差，缺少葉表皮毛，保濕，反光性差，氣孔開度大，關(guān)閉能力差，葉片中的柵欄組織發(fā)育不完善，結(jié)合能力低。1概述花粉培養(yǎng)在育種上的應(yīng)用？（1）單倍體育種。（3）對異花授粉作物（如玉米）的單倍體植株進行加倍，可迅速獲得自交系，免去了煩瑣的人工自交過程，節(jié)省大量的時間和人力；（4）排除顯隱性基因干擾，有利于進行突變體選擇1植物子房內(nèi)授粉的意義是什么？在離體條件下，將無菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌發(fā)，完成受精，并獲得具有生活力的種子的發(fā)育，可以克服柱頭或花柱授粉不親和性障礙。代謝旺盛，能抑制病毒復制；（3）莖尖和根尖中內(nèi)源激素濃度在很高的水平，抑制病毒復制1概述胚乳培養(yǎng)的意義？（1）三倍體幼苗和植株的獲得: 對于以種子生產(chǎn)為目的的植物是無益的；但有時無籽果實及以營養(yǎng)體生產(chǎn)為目的的植物則具有重要經(jīng)濟價值。（2）胚乳植株染色體的不穩(wěn)定性，為染色體工程的研究提供有效的途徑。1植物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)與次生產(chǎn)物生產(chǎn)前景如何？為什么？利用植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物具有十分廣闊的前景。通過植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥用成分取得了很大的進展