【正文】 基因重組的生物技術(shù)藥物。在這些藥物中，大部分是美國FDA首先批準(zhǔn)再在歐盟獲得批準(zhǔn)的，因此基本上與美國FDA批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥物雷同。)、Adalimumab(Humira174。)等，二者基本是同步的，表明歐盟的生物制藥正在快速成長。有些藥物是用不同表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的相同蛋白，如歐盟批準(zhǔn)了用CHO表達(dá)的糖基化GCSF和用E 。表2 截止至2003年底歐盟批準(zhǔn)的基因重組生物技術(shù)藥物藥物適應(yīng)證公司首次批準(zhǔn)時(shí)間表達(dá)系統(tǒng)基因重組治療性蛋白：Insulin，胰島素糖尿病Lilly IndustriesNovo NordiskHoechst12/1987E coli.YeastInterleukin2，白介素2 (IL2)腎瘤、黑色素瘤Chiron12/1989E coli.Somatotropin，人生長激素矮小癥Lilly PharmaciaSerono PharmaNovo Nordisk02/1991E coli.C127細(xì)胞Glucagon，胰高血糖素低血糖癥Novo Nordisk03/1992YeastErythropoietin b，促紅細(xì)胞生成素b (EPOb)腎性貧血Boehringer Mannheim05/1992CHOInterferon g1b，干擾素 g1b慢性肉芽腫病Boehringer Ingelheim06/1992E coli.Interferon a2b，干擾素 a2b白血病、腫瘤、皰疹Essex Pharma03/1993E coli.Erythropoietin a，促紅細(xì)胞生成素a (EPOa)腎性貧血JanssenCilag04/1993CHOGMCSF(Molgramostim)白細(xì)胞減少Essex Pharma04/1993YeastInterferon a2a，干擾素 a2a白血病、腫瘤、皰疹HoffmannLa Rochekohl pharma04/1993E coli.Factor VIII，凝血因子VIII血友病ABayerBaxter DeutschlArmour Pharma07/1993BHKCHOGCSF(glycosylated)，糖基化GCSF*白細(xì)胞減少Rh244。s病Genzyme .06/1994CHOGCSF，粒細(xì)胞集落刺激因子白細(xì)胞減少HoffmannLa Rochekohl pharma08/1994E coli.human DNAse，DNA酶囊性纖維化HoffmannLa Roche09/1994CHOFollitropin alpha，促濾泡素不孕癥Serono10/1995CHOInterferon b1b，干擾素b1b多發(fā)性硬皮癥Schering AG11/1195E coli.Factor VII，凝血因子VII血友病A和BNovo Nordisk02/1996BHKInsulin, Lispro，胰島素突變體（速效）糖尿病Lilly05/1996E coli.Follitropinb，促濾泡素b不孕癥Organon10/1996CHOReteplase，tPA突變體(rPA)急性心肌梗死Boehringer Mannheim11/1996E coli.Factor IX，凝血因子IX血友病BGenetics Institute08/1997BHKInterferon beta1a，干擾素b1a多發(fā)性硬皮病Biogen France .AresSerono 03/1997CHOHirudine，水蛭素抗凝Behringwerke03/1997YeastDesirudine，水蛭素突變體*抗凝Ciba Europharm03/1997YeastCalcitonin，降血鈣素*骨質(zhì)疏松；Paget’s??；高鈣血癥Unigene UK01/1999Interferon alfacon1，超級(jí)a干擾素丙肝Yamanouchi02/1999E coli.rhPDGF，血小板衍生生長因子糖尿病潰瘍JanssenCilag03/1999YeastTNFa1a，腫瘤壞死因子a1a*腫瘤手術(shù)后的輔助治療Boehringer Ingelheim04/1999E coli.Moroctocog a，凝血因子VIII(無B鏈)血友病Genetics Institute04/1999CHOThyrotropin alfa (TSH)，促甲狀腺素甲狀腺掃描檢查Genzyme07/1999CHOInsulin aspart，胰島素突變體（速效）糖尿病Novo Nordisk09/1999YeastPeginterferon a2b，PEG化干擾素a2b丙肝ScheringPlough05/2000E coli.Insulin glargin，胰島素突變體（長效）糖尿病HMR Deutschland /Aventis .06/2000E coli.Etanercept，TNFaRFc融合蛋白類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎WyethLederle02/2000CHORasburicase，尿酸水解酶腫瘤誘發(fā)的高尿酸癥Sanofi .02/2001YeastTenecteplase，tPA突變體(TNKtPA) 急性心肌梗死Boehringer Ingelheim02/2001CHOChoriogonadotropin a，絨膜促性腺激素(hCG)不孕癥Ares Serono02/2001CHOLutropin a，促濾泡素突變體*不孕癥Ares Serono02/2001CHODarbepoetin a，EPO突變體腎性貧血Amgen Europe06/2001CHOAgalsidasea，半乳糖苷酶a* (agalactosidase)Fabry’s病TKT Europe08/2001CHOAgalsidaseb，半乳糖苷酶b (bgalactosidase)Fabry’s病Genzyme08/2001CHOAnakinra(IL1Ra)，IL1受體拮抗劑類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Amgen GmbH03/2002E coli.Dynepo，EPOd*腎性貧血Aventis .02/2002CHOPegfilgrastim，PEG化GCSF白細(xì)胞減少Amgen Europe08/2002E coli.Drotrecogin a，活化蛋白C嚴(yán)重膿毒癥Eli Lilly08/2002CHODibotermin a，骨形成蛋白(BMP)脛骨骨折Genetics Institute 09/2002CHOAldurazyme，粘多糖aL艾杜糖醛酸水解酶(Laronidase)粘多糖貯積病Genzyme06/2003CHO重組治療性抗體：Abciximab(ReoPro174。)*結(jié)腸癌體內(nèi)檢測Organon Teknika 11/1996動(dòng)物細(xì)胞Rituximab(Mabthera174。s淋巴瘤Roche 1998CHOBasiliximab(Simulect174。))呼吸道合胞病毒感染Abbott05/1999NS0Infliximab(Remicade174。)轉(zhuǎn)移性乳腺癌Roche09/2000CHOAlemtuzumab(Campath174。)重度類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Abbott03/2003動(dòng)物細(xì)胞Cetuximab(Erbitux174。three rebinant B. pertussis toxins*預(yù)防破傷風(fēng)、白喉、百日咳Chiron S. p. A.01/1999乙肝大S抗原 (preS1, preS2, S)*預(yù)防乙肝感染Medeva Pharma 03/00CHOglycosylated rebinant diphteria toxin CRM197*，糖基化重組白喉毒素預(yù)防肺炎球菌感染W(wǎng)yethLederle 02/2001Lyme disease vaccine，萊姆病疫苗預(yù)防萊姆病WyethLederle 02/2001E coli.* 帶*者為獲得EMEA批準(zhǔn)而還未獲得FDA批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥物3 中國批準(zhǔn)的生物技術(shù)藥物 中國的生物制藥經(jīng)過近20年的發(fā)展，取得了一些成績，但是與歐美相比，差距不是縮小了，而是落得更大。從表3和表4看我國生物制藥的現(xiàn)狀和未來，有以下特點(diǎn)（其中不少特點(diǎn)是非常令人憂慮的）： 大腸桿菌表達(dá)的產(chǎn)品占絕對(duì)統(tǒng)治地位歐美國家哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品種類占60%70%[8]，市場份額占65%70%以上[1]，并且這個(gè)比例還有迅速擴(kuò)大的趨勢，2003年6月2004年6月全球銷售額最高的10個(gè)生物技術(shù)藥物中，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品占8個(gè)，并且年銷售額超過20億美元的前6位的生物技術(shù)藥物全部是哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品[1]。 同一產(chǎn)品生產(chǎn)廠家多、生產(chǎn)規(guī)模小，低水平重復(fù)建設(shè)浪費(fèi)了大量寶貴資源。這種局面不僅浪費(fèi)了大量的人力財(cái)力，導(dǎo)致許多涉足“鉆石產(chǎn)業(yè)”的生物制藥企業(yè)不僅沒有得到鉆石，只能勉強(qiáng)維持甚至入不敷出，而且使得我國有限的資源不能分配到真正有發(fā)展前途、代表生物制藥主流的以哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)品的研究、開發(fā)與生產(chǎn)上。如果微克級(jí)劑量藥物的開發(fā)還困難重重，那么劑量在克級(jí)/人的抗體類藥物則在中國幾乎不可能生產(chǎn)。事實(shí)上，CHO表達(dá)的乙肝疫苗產(chǎn)業(yè)化并非難事，如果能達(dá)到年產(chǎn)100g中試生產(chǎn)規(guī)模，便可以實(shí)現(xiàn)年產(chǎn)2千萬支疫苗（5mg/支，酵母表達(dá)的乙肝疫苗市場售價(jià)為9元/支），產(chǎn)值接近2億/年。在600010000美元/g重組蛋白藥物（視細(xì)胞的表達(dá)水平而定）。但是，我國的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)并非一無是處。在已完成的300多例II/III期臨床試驗(yàn)中，TIMI II/III級(jí)開通率達(dá)到75%80%，其中TIMI III級(jí)開通率超過55%，而副作用很小，是一種很理想的溶栓藥物。但是，早在1998年，我們研制的細(xì)胞大規(guī)模高密度培養(yǎng)技術(shù)便成功地利用工作體積為20L的反應(yīng)器，在連續(xù)90天高密度培養(yǎng)中，獲得含130g以上的proUK上清2000L，純化獲得合格產(chǎn)品80g以上[13，14]，即采用這種培養(yǎng)技術(shù)，20L反應(yīng)器的年生產(chǎn)能力可以達(dá)到200g proUK。如果這種培養(yǎng)技術(shù)用于乙肝疫苗(CHO)生產(chǎn)，其產(chǎn)業(yè)化指日可待。而以細(xì)胞因子為代表的激動(dòng)劑，可開發(fā)的空間已極為有限，相反中和某些細(xì)胞因子的拮抗劑卻成為歐美國家新藥研發(fā)的熱點(diǎn)。又如，在美國沒有批準(zhǔn)EGF進(jìn)行臨床試驗(yàn)[19]，但是拮抗EGF的兩種受體EGFR I和EGFR II的抗體Erbitux和Herceptin都已獲準(zhǔn)上市[1617]，它們?cè)谥委熮D(zhuǎn)移性結(jié)腸癌或直腸癌和轉(zhuǎn)移性乳腺癌中有突出表現(xiàn)。 仿制能力顯著不足，更遑論創(chuàng)新能力。事實(shí)上，許多生物技術(shù)藥物的基因和蛋白質(zhì)序列是沒有專利的，而其生產(chǎn)工藝的專利對(duì)產(chǎn)品的開發(fā)限制非常有限，正如國外相同蛋白質(zhì)序列的生長激素的生產(chǎn)商不下十家，但相互之間并沒侵權(quán)。如果分析我國獨(dú)有的生物技術(shù)藥物，就能感到浮躁情緒濃重，甚至在許多學(xué)術(shù)論文中的宣傳嚴(yán)重背離了科學(xué)精神。而某種產(chǎn)品的突變體如IL2突變體，并不象胰島素、EPO、tPA突變體那樣對(duì)產(chǎn)品性能產(chǎn)生質(zhì)的影響[6]，而只是消除半胱氨酸對(duì)產(chǎn)品折疊和復(fù)性的影響。在美國，這兩種產(chǎn)品都是天然提取產(chǎn)品，如全球十大制藥公司之一的AVENTIS生產(chǎn)的鏈激酶產(chǎn)品STREPTASE，由于市場原因，還沒有基因重組的SK或SAK產(chǎn)品進(jìn)入臨床試驗(yàn)（見美國制藥協(xié)會(huì)發(fā)布的2002年度所有在研的生物技術(shù)藥物的年度報(bào)告）[19]，因?yàn)榧幢阍谥袊鳶K的市場也非常小，進(jìn)口tPA仍是心梗病人的首選，更何況是經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的歐美國家。中國生物技術(shù)藥物中只有痢疾疫苗、霍亂疫苗等產(chǎn)品還可圈可點(diǎn)，這兩種產(chǎn)品歐美還處于臨床試驗(yàn)之中。 國外基因重組治療性抗體發(fā)展最迅速，而我國仍停留在鼠源單抗層面基因重組治療性抗體（包括受體Fc融合蛋白等抗體樣分子）是生物制藥領(lǐng)域發(fā)展最迅猛、銷售額最高、產(chǎn)品種類最多的一類產(chǎn)品[2123]，是拉動(dòng)生物制藥產(chǎn)業(yè)快速增長的主要力量。由于鼠源抗體具有很強(qiáng)抗原性，其Fc段無法激發(fā)機(jī)體的補(bǔ)體激活的細(xì)胞毒效應(yīng)（CDC）和抗體依賴性細(xì)胞毒效應(yīng)（ADCC），在臨床治療中效果很差，曾一度使治療性抗體的開發(fā)陷入低潮[24]。目前有有7種抗體類產(chǎn)品位列銷售額前50位的生物技術(shù)藥物行列中，其中有四種進(jìn)入了前10位[6]，Remicade、Enbrel、Rituxan年銷售額都超過20億美元。盡管抗體藥物的發(fā)展如火如荼，但我國抗體藥物的研發(fā)卻舉步維艱，至今還沒有一個(gè)人源化（基因工程）抗體