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[自然科學(xué)]血細(xì)胞分析儀原理-在線瀏覽

2025-04-09 05:20本頁面
  

【正文】 細(xì)胞特征時(shí),比電阻抗法分群更加準(zhǔn)確。 流式細(xì)胞儀的技術(shù)特點(diǎn) 流式細(xì)胞儀在設(shè)計(jì)上采用了許多獨(dú)特的技術(shù),比如液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)、信號(hào)測(cè)量和細(xì)胞分選方面都有自己的技術(shù)特點(diǎn)。 雷諾系數(shù) Re Re= d ρν/η d: 管子的直徑 ρ: 液體的密度 ν: 液體的流速 η: 液體的粘滯系數(shù) Re2300, 液流處于穩(wěn)流狀態(tài) Re2300, 液流處于湍流狀態(tài) 通常把標(biāo)本流的流速控制在 10m/s以內(nèi),就能保持標(biāo)本流處于穩(wěn)流狀態(tài)。 同時(shí)利用液流聚焦原理,使標(biāo)本流直徑變小,通常只有 10~ 20μm,避免細(xì)胞多個(gè)重疊進(jìn)入檢測(cè)區(qū)。 鞘流 維持顆粒于液流中央,順序、單個(gè)、恒速向前流動(dòng),即流體動(dòng)力學(xué)聚焦。 光檢測(cè)器 接受來自各種角度的散射光或吸收光信號(hào),并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)特征的電信號(hào) 三、射頻電導(dǎo)法 ? 射頻( radio frequency, RF) 指射頻電流,是每秒變化大于 10 000次的高頻交流電磁波。 ? 用高頻電磁探針滲入細(xì)胞膜脂質(zhì)可測(cè)定細(xì)胞的導(dǎo)電性,提供細(xì)胞內(nèi)部化學(xué)成分、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)、顆粒成分等特征信息。 ?分光光度法是所有類型的血細(xì)胞分析儀檢測(cè)Hb 的原理 :被稀釋的血液加入溶血?jiǎng)┖?,紅細(xì)胞溶解,釋放血紅蛋白,后者與溶血?jiǎng)┙Y(jié)合形成 Hb衍生物,在特定波長( 530~550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成比例。 3 血液分析儀檢測(cè)參數(shù)原理 不同類型血液分析儀檢測(cè)參數(shù)的原理不盡相同。 一、白細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理 ?儀器將體積為 35~ 450fL的血細(xì)胞,分為256個(gè)通道( channel)。根據(jù)細(xì)胞大小,分別置于不同的通道中,顯示血細(xì)胞體積分布直方圖(Histogram)。 ?第二群( 90~ 160fl) 單個(gè)核細(xì)胞區(qū),(中間細(xì)胞):?jiǎn)魏思?xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始、幼稚細(xì)胞、異常細(xì)胞等。 三分群血液分析儀 正常白細(xì)胞分類模式圖(直方圖) 35 90 160 300 400 450(fl) % (二)光散射法白細(xì)胞分類 1. 體積、電導(dǎo)和光散射法( volume, conductivity, light scatter, VCS) V C S 電阻抗技術(shù) 細(xì)胞大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu) 細(xì)胞內(nèi)的顆粒性、核分葉性和細(xì)胞表面結(jié)構(gòu) 體積 電導(dǎo) 光散射 電阻抗與射頻法 ( 能透入細(xì)胞內(nèi) , 測(cè)量核的大小及顆粒的多少 ) 。染料對(duì)有活性的白細(xì)胞只有極小滲透性或無滲透性,故不出現(xiàn)細(xì)胞核染色。 ( 2)白細(xì)胞分群 MAPSS 0176。 ,側(cè)向散射光:細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)及核染色質(zhì)的復(fù)雜性 90176。 D,垂直角度去偏振散射 光,鑒別 E與 N MAPSS法可鑒別白細(xì)胞亞群、異常細(xì)胞類型,白細(xì)胞分類不受有核紅細(xì)胞、血小板凝聚、未溶解紅細(xì)胞和細(xì)胞碎片等干擾物質(zhì)影響。 激光與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用 ( 1)過氧化物酶( Peroxidase, Perox)染色通道 過氧化物酶活性強(qiáng)度: ENM, L和 B則無。 ( 3)未染色大細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè) 5. 雙鞘流動(dòng)力連續(xù)系統(tǒng) (DHSS) 用鎢光源流式細(xì)胞光吸收、化學(xué)染色和電阻抗法 ① WBC計(jì)數(shù)通道 :電阻抗法 ②嗜堿性粒細(xì)胞通道 :專用染液 ③ WBC分類通道 :雙鞘流系統(tǒng)中,用流式細(xì)胞光吸收、電阻抗和細(xì)胞化學(xué)染色液聯(lián)合檢測(cè)除 B以外的 WBC。 二、成熟紅細(xì)胞系列參數(shù)檢測(cè)原理 紅細(xì)胞數(shù)和紅細(xì)胞比積: 原理通 WBC計(jì)數(shù) 紅細(xì)胞體積分布直方
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