[自然科學(xué)]血細(xì)胞分析儀原理-文庫吧
2025-02-05 05:20 本頁面
【正文】 征相應(yīng)的各種角度的散射光。對經(jīng)信號檢測器接收的散射光信息進(jìn)行綜合分析，即可準(zhǔn)確區(qū)分正常類型的細(xì)胞。 半導(dǎo)體激光的流式細(xì)胞術(shù) 側(cè)向熒光（ RNA/DNA含量） 激光 （波長 633nm） 側(cè)向散射 （細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，如核的大?。? 前向散射光 （細(xì)胞大?。? 低角度散射光 （前向散射光）：反映細(xì)胞的數(shù)量和表面體積大小。 高角度散射光 （側(cè)向散射光）：反映細(xì)胞的內(nèi)部顆粒、細(xì)胞核等復(fù)雜性。 ?激光散射法在區(qū)別體積相同而類型不同的細(xì)胞特征時，比電阻抗法分群更加準(zhǔn)確。故激光散射法已成為現(xiàn)代五分類血液分析儀的主要檢測原理之一。 流式細(xì)胞儀的技術(shù)特點 流式細(xì)胞儀在設(shè)計上采用了許多獨特的技術(shù)，比如液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng)、信號測量和細(xì)胞分選方面都有自己的技術(shù)特點。著重講述液流系統(tǒng) —— 鞘流原理。 雷諾系數(shù) Re Re＝ d ρν/η d: 管子的直徑 ρ： 液體的密度 ν： 液體的流速 η： 液體的粘滯系數(shù) Re2300， 液流處于穩(wěn)流狀態(tài) Re2300， 液流處于湍流狀態(tài) 通常把標(biāo)本流的流速控制在 10m/s以內(nèi)，就能保持標(biāo)本流處于穩(wěn)流狀態(tài)。 外面包被有高速流動的鞘液，實現(xiàn)標(biāo)本與鞘液穩(wěn)定的同軸流動狀態(tài)。 同時利用液流聚焦原理，使標(biāo)本流直徑變小，通常只有 10～ 20μm，避免細(xì)胞多個重疊進(jìn)入檢測區(qū)。 激光散射法系統(tǒng)基本組成 光源 氣體（氦－氖）激光或固體（半導(dǎo)體）激光（單色光）；鎢光源（多色光）。 鞘流 維持顆粒于液流中央，順序、單個、恒速向前流動，即流體動力學(xué)聚焦。 細(xì)胞懸液 被檢測細(xì)胞（顆粒）的懸液，由氣壓導(dǎo)入流動池。 光檢測器 接受來自各種角度的散射光或吸收光信號，并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)特征的電信號 三、射頻電導(dǎo)法 ? 射頻（ radio frequency, RF) 指射頻電流，是每秒變化大于 10 000次的高頻交流電磁波。高頻電流能通過細(xì)胞壁。 ? 用高頻電磁探針滲入細(xì)胞膜脂質(zhì)可測定細(xì)胞的導(dǎo)電性，提供細(xì)胞內(nèi)部化學(xué)成分、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)、顆粒成分等特征信息。 四、分光光度法 LambertBeer定律： A=lg(I0 / I) A:吸光度，或稱光密度； I0： 單色入射光強(qiáng)度； I ：透過光強(qiáng)度 分光光度法儀器的組成 ：單色光源、檢測池和比色容器、光檢測器。 ?分光光度法是所有類型的血細(xì)胞分析儀檢測Hb 的原理 ：被稀釋的血液加入溶血劑后，紅細(xì)胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血劑結(jié)合形成 Hb衍生物，在特定波長（ 530～550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例。 血紅蛋白 血紅蛋白 衍生物 吸光度 Hb濃度 溶血劑 λ＝ 540nm 血紅蛋白測定的溶血劑 溶血劑 含氰化物的溶血劑 不含氰化物的溶血劑 167。 3 血液分析儀檢測參數(shù)原理 不同類型血液分析儀檢測參數(shù)的原理不盡相同。高檔儀器應(yīng)用 2種或 2種以上檢測原理，組合電學(xué)、光學(xué)、細(xì)胞化學(xué)等技術(shù)，在獨特檢測通道測定紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞系列的數(shù)量、亞類及相關(guān)參數(shù)。 一、白細(xì)胞系列參數(shù)檢測原理 ?儀器將體積為 35～ 450fL的血細(xì)胞，分為256個通道（ channel）。每個通道：。根據(jù)細(xì)胞大小，分別置于不同的通道中，顯示血細(xì)胞體積分布直方圖(Histogram)。 （一）電阻抗法 ?經(jīng)溶血素處理脫水后，血細(xì)胞體積大小發(fā)生了變化?。。? ?第一群（ 35～ 90fl） 小細(xì)胞區(qū)：淋巴細(xì)胞（體積最?。? ?第二群（ 90～ 160fl） 單個核細(xì)胞區(qū)，（中間細(xì)胞）：單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始、幼稚細(xì)胞、異常細(xì)胞等。 ?第三群（ 160fl以上） 大細(xì)胞區(qū)：嗜中性粒細(xì)胞（體積最大）。 三分群血液分析
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