生物化學(xué)核酸生物化學(xué)-在線瀏覽
2025-03-07 02:15本頁面
【正文】 de， nt) 種類： 1）按酯化位點： 可在核糖的 2’ , 3’, 5’； 2）按核糖類型： 核苷酸、 脫氧核苷酸 核苷中戊糖的羥基被磷酸酯化，即為核苷酸。 cAMP、 cGMP 功能： 第二信使，激素、一些藥物、神經(jīng)遞質(zhì)通過其發(fā)揮生理作用。 一、核苷酸 核酸的一級結(jié)構(gòu)： 多核苷酸鏈中各核苷酸殘基的排列順序。 若兩鏈反向平行，則需注明每條鏈的走向。 （二） DNA的雙螺旋二級結(jié)構(gòu) 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型建立的依據(jù)： 1） chargaff對 DNA堿基組成的定量分析 ,提出 堿基配對原則：A=T， G≡C 2） 根據(jù)對 DNA纖維和晶體的 x衍射分析。 A=T， G≡C DNA 雙螺旋中的堿基對 （ base pair,bp) :(WatsonCrick模型） 1）形成： 兩條鏈反向平行； DNA一條鏈為另一條鏈互補鏈 右手螺旋。 DNA 3）尺寸： DNA A、直徑： 2nm ； B、堿基距離： ； C、一周 10個核苷酸； D、螺距： 。 (三） DNA的三級結(jié)構(gòu) DNA雙螺旋進一步扭曲即成 三級結(jié)構(gòu)。 DNA ? 回文結(jié)構(gòu)中的單鏈可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu) 特殊 DNA的結(jié)構(gòu) 上頁 下頁 章首 節(jié)首 ? 雙鏈回文結(jié)構(gòu)可形成十字架結(jié)構(gòu) 特殊 DNA的結(jié)構(gòu) 上頁 下頁 章首 節(jié)首 DNA的其他結(jié)構(gòu) ? DNA三股螺旋概念是在 1957年提出來的，當(dāng)時有人發(fā)現(xiàn)，人工合成的一條右手螺旋多聚物 (A)n與另兩條右手螺旋多聚物 (T)n形成三股螺旋結(jié)構(gòu)，這是分子間的三股螺旋。 雙螺旋結(jié)構(gòu)通過 WatsonCrick氫鍵穩(wěn)定而三股螺旋是通過 Hoogsteen氫鍵穩(wěn)定。 ? 許多核小體由 DNA 連成念珠狀結(jié)構(gòu)，再盤 繞壓縮成高層次的結(jié)構(gòu) — —— 染色體 。 核小體進一步旋轉(zhuǎn)折疊形成棒狀染色體，將近 1 m長的 DNA分子容納于直徑只有數(shù)微米的細(xì)胞核中。 DNA （四） DNA的功能 DNA是變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 變異是生物進化的基礎(chǔ)。 DNA 四、 RNA （ 一） RNA的結(jié)構(gòu) 組成 ： 4種核苷酸，有稀有堿基； 連接 ：同 DNA 形成 ：一般以 DNA為模板合成，有例外。 （二） RNA的類型 三種： 信使 RNA（ messenger RNA,mRNA) 核糖體 RNA (ribosomel RNA,rRNA) 轉(zhuǎn)運 RNA (transfer RNA,tRNA) RNA 三種 RNA的功能 ? mRNA是遺傳信息的攜帶者。 ? tRNA起識別密碼子和攜帶相應(yīng)氨基酸的作用。 tRNA 約占全部 RNA的 15%；由 7090個核 苷酸組成許多種類； 沉降系數(shù) 4S。 tRNA 三級結(jié)構(gòu) 為倒 L型 A、在 pr合成中轉(zhuǎn)運 aa； B、在 pr合成的起始、DNA反轉(zhuǎn)錄合成及其它代謝調(diào)節(jié)中起作用。 5‘末端有帽子結(jié)構(gòu) ： G被甲基化，此可能與pro合成的起始有關(guān)。 2)核糖體功能： pr合成的部位 . 3）結(jié)構(gòu) ： 分大、小亞基 一、二級結(jié)構(gòu)多已確定，但功能不清。 RNA 五、核酸的性質(zhì) （ 一 ） 一般的理化性質(zhì) ? 為兩性電解質(zhì)，通常表現(xiàn)為酸性。 ? DNA溶液的粘度極高，而 RNA溶液要小得多。 核酸的溶解性質(zhì) ? DNA和 RNA都微溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有機溶劑。利用這一性質(zhì)可分離 DNA和 RNA。 ? 核酸分子中的磷酸二酯鍵可在酸、堿性和 酶條件下水解切斷 ,結(jié)果是多核苷酸鏈被打斷 ,核酸被降解 . 酸解 酸可以使 DNA和 RNA降解，酸對核酸的作用因酸的濃度、溫度和作用時間的不同而不同。例如，在 mol/L NaOH溶液中， RNA幾乎可以完全水解，生成 2′ 或 3′ 磷酸核苷； DNA在同樣條件下則不受影響。在 RNA水解時， 2′ OH首先進攻磷酸基，在斷開磷酯鍵的同時形成環(huán)狀磷酸二酯，再在堿的作用形成水解產(chǎn)物。 酶水解 根據(jù)底物分類 – DNase、 RNase； – 單鏈核酸酶、雙鏈核酸酶、雜合雙鏈核酸酶 根據(jù)催化部位分類：外切核酸酶和內(nèi)切核酸酶 – 外切酶： 5180。端或 3180。端核酸外切酶。 – 限制性核酸內(nèi)切酶 (restriction endonucleases)：能夠識別 DNA分子的特定核苷酸序列，并在識別位點或其周圍斷開 DNA雙鏈的一類核酸酶 DNA限制性內(nèi)切酶 細(xì)菌的限制 修飾系統(tǒng)：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）特異性強，可在 DNA特異位點切開； 細(xì)菌堿基修飾 ： 概念： 在 DNA特定短堿基序列上產(chǎn)生某專一性修飾，使得內(nèi)切酶無法識別而不能斷裂。 ?參與 DNA修復(fù)及 RNA合成后的剪接等重要基因復(fù)制和基因表達過程 ?負(fù)責(zé)清除多余的 、 結(jié)構(gòu)和功能異常的核酸 ，同時也可以清除侵入細(xì)胞的外源性核酸 ?在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 ?體外重組 DNA技術(shù)中的重要工具酶 生物體內(nèi)的 核酸酶 負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)外催化核酸的降解 顏色反應(yīng)： 1） 核糖 與濃鹽酸和苔黑酚 (甲基間苯二酚 )共熱呈 綠色，在 670nm處可測 RNA； 2） 2脫氧核糖 與酸和二苯胺共熱呈藍(lán)紫色，
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