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生物化學(xué)核酸生物化學(xué)-免費(fèi)閱讀

  

【正文】 ? DNA的結(jié)構(gòu): DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu),RNA的結(jié)構(gòu): RNA的類型和結(jié)構(gòu)特點(diǎn), tRNA 、mRNA、 rRNA的結(jié)構(gòu)和功能。 DNADNA: DNARNA: 分子生物學(xué)技術(shù) 核酸的雜交 2)探針( probe) 用放射性同位素或熒光標(biāo)記的 DNA或 RNA片段 . 確診病人細(xì)胞中提取的 DNA; 病毒 DNA ; 腫瘤組織提取的 DNA。 又稱 熱解鏈溫度。 ? 應(yīng)用: 不同核苷酸有不同吸收特性,可用 紫外分光光度計(jì)進(jìn)行定性、定量測(cè)定。端核酸外切酶。例如,在 mol/L NaOH溶液中, RNA幾乎可以完全水解,生成 2′ 或 3′ 磷酸核苷; DNA在同樣條件下則不受影響。 ? DNA溶液的粘度極高,而 RNA溶液要小得多。 tRNA 三級(jí)結(jié)構(gòu) 為倒 L型 A、在 pr合成中轉(zhuǎn)運(yùn) aa; B、在 pr合成的起始、DNA反轉(zhuǎn)錄合成及其它代謝調(diào)節(jié)中起作用。 DNA 四、 RNA ( 一) RNA的結(jié)構(gòu) 組成 : 4種核苷酸,有稀有堿基; 連接 :同 DNA 形成 :一般以 DNA為模板合成,有例外。 雙螺旋結(jié)構(gòu)通過(guò) WatsonCrick氫鍵穩(wěn)定而三股螺旋是通過(guò) Hoogsteen氫鍵穩(wěn)定。 A=T, G≡C DNA 雙螺旋中的堿基對(duì) ( base pair,bp) :(WatsonCrick模型) 1)形成: 兩條鏈反向平行; DNA一條鏈為另一條鏈互補(bǔ)鏈 右手螺旋。 cAMP、 cGMP 功能: 第二信使,激素、一些藥物、神經(jīng)遞質(zhì)通過(guò)其發(fā)揮生理作用。 N N H H H H 嘧啶 1 2 3 4 5 6 N N H H H H NH2 O H 胞嘧啶 Cytosine ( C) N N H H H H O O H H 尿嘧啶 uracil ( U) N N H H H H O O H H CH3 胸腺嘧啶 thymine ( T) 嘌呤堿 (purine): 由嘌呤衍生而來(lái)。 學(xué)習(xí)要求 ? 1869年 分離得到稱為 “ 核素 ” 的核酸 ? 1944年 DNA是主要的遺傳物質(zhì) ? 1953年 J. DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型 ? 1958年 Crick提出遺傳信息傳遞的中心法則 ? 1970年 ,建立 DNA重組技術(shù) ? 1980年 后 ,分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)等學(xué)科突飛猛進(jìn)發(fā)展,提出并完成 HGP. 核酸化學(xué)的發(fā)展過(guò)程 一、 概述 概念 核酸 (nucleic acid)是由 堿基(嘌呤和嘧啶)、戊糖和磷酸 組成的高分子物質(zhì),是生物體的基本組成。 ?1944年 結(jié)論: DNA是生命的遺傳物質(zhì) 侵染 DNA注射 進(jìn)細(xì)胞 蛋白質(zhì)外殼 DNA 噬菌體 大腸桿菌 噬菌體侵染實(shí)驗(yàn) 分布: DNA: 主要在 細(xì)胞核 中,是染色體的主 要成分。 O HOH2C OH OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H H H H 9 腺嘌呤 腺 苷 O HOH2C OH OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 O HOH2C OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N O O H H H 尿嘧啶 H 1 尿苷 N C O O NH H H 5 1 OH 假尿苷( ψ) 核苷的表示 : 核苷: A、 G、 C 、 U 脫氧核苷: dA,dG,dC,dT 修飾核苷: 如 5甲基脫氧胞嘧啶: m5dC。如: 5’ATGCCTGA 3’ 3’ TACGGACT 5’ 核苷酸 三、 DNA (一) DNA 的一級(jí)結(jié)構(gòu): 由數(shù)量龐大的 4種脫氧核苷酸通過(guò) 3’, 5’磷酸二酯鍵 連接成的直線形或環(huán)形多聚體。 天然 DNA有 雙鏈 DNA( dsDNA), 有的病毒為 單鏈 DNA( ssDNA) 在 dsDNA中: 線形分子 (大多數(shù)) 環(huán)狀分子 ( dcDNA):質(zhì)粒、 DNA 超螺旋結(jié)構(gòu) 特點(diǎn) : ? 可將長(zhǎng)鏈壓縮 在一較小體內(nèi); ? 密度大; ? 凝膠電泳中移 動(dòng)速度快。 DNA是遺傳信息的載體 半保留復(fù)制 保證了親代 性狀傳到子 代,保證了 親代與子代 的相似性。 ? rRNA和蛋白質(zhì)共同組成的復(fù)合體就是核糖體,核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。 RNA ? 原核細(xì)胞: 70S核糖體; ? 真核細(xì)胞: 80S核糖體; 核糖體 RNA自我剪切 1983年在四 膜蟲中發(fā)現(xiàn) RNA有催化功能 RNA的功能 1)在 DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯中起重要調(diào)控 作用; 2)有催化作用; 3)可作為遺傳物質(zhì)(如逆轉(zhuǎn)錄病毒)。 :分離 DNA蛋白 (DNP)和 RNA(RNP)蛋白 (RNP)的方法 DNA蛋白 :在
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