生物化學核酸生物化學-全文預覽
【正文】 GC含量： Tm與 GC含量成正比。 3） 引起變性的因素 ： 溫度、 pH、尿素、甲醛等。 1 OD相當于： 50μg/ml DNA 40μg/ml RNA 核酸的性質(zhì) 確定所提取的核酸是否純品。 二種反應可作 定性 試驗，定量試驗靈敏度低、準確性差，但快、簡便。 – 內(nèi)切酶：限制性核酸內(nèi)切酶和非限制性核酸內(nèi)切酶。端 → 3180。 這種水解性能上的差別，與 RNA核糖基上 2′ OH的參與作用有很大的關系。 :分離 DNA蛋白 (DNP)和 RNA(RNP)蛋白 (RNP)的方法 DNA蛋白 :在 RNA蛋白 :在 水解性： 可被酸、堿或酶水解， DNA比 RNA對稀堿穩(wěn)定。 ? 核酸在離心力的作用下，可以從溶液中沉降下來，其沉降速度與核酸的大小和密度有關。 RNA ? 原核細胞： 70S核糖體； ? 真核細胞： 80S核糖體； 核糖體 RNA自我剪切 1983年在四 膜蟲中發(fā)現(xiàn) RNA有催化功能 RNA的功能 1）在 DNA復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯中起重要調(diào)控 作用； 2）有催化作用； 3）可作為遺傳物質(zhì)（如逆轉(zhuǎn)錄病毒）。 2） tRNA功能： mRNA和 hnRNA 1） 合成 ： 以 DNA為模板 (核內(nèi) ) 合成 hnRNA（含內(nèi)含子和外顯子） 加工 成熟的 mRNA 入細胞質(zhì) 蛋白質(zhì)合成 RNA 合成 mRNA 切除內(nèi)含子 2) mRNA結構特點： 3‘末端有 polyA結構 ：與 mRNA從核入質(zhì)有關。 ? rRNA和蛋白質(zhì)共同組成的復合體就是核糖體，核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所。 結構 ：單鏈線形分子，局部區(qū)域有雙螺旋。 DNA是遺傳信息的載體 半保留復制 保證了親代 性狀傳到子 代，保證了 親代與子代 的相似性。 DNA的三股螺旋結構 核小體中的 扭曲方式 ? 在真核細胞染色質(zhì)中， DNA雙螺旋分子盤繞 在組蛋白上形成 核小體。 天然 DNA有 雙鏈 DNA（ dsDNA）， 有的病毒為 單鏈 DNA（ ssDNA） 在 dsDNA中： 線形分子 （大多數(shù)） 環(huán)狀分子 （ dcDNA）：質(zhì)粒、 DNA 超螺旋結構 特點 ： ? 可將長鏈壓縮 在一較小體內(nèi)； ? 密度大； ? 凝膠電泳中移 動速度快。 DNA 2）結構： A、 核糖 磷酸以3’, 5’磷酸二酯鍵連接成骨架； 堿基在內(nèi)； A=T， G≡C B、 大溝、小溝。如： 5’ATGCCTGA 3’ 3’ TACGGACT 5’ 核苷酸 三、 DNA （一） DNA 的一級結構： 由數(shù)量龐大的 4種脫氧核苷酸通過 3’, 5’磷酸二酯鍵 連接成的直線形或環(huán)形多聚體。 核苷酸 核苷酸衍生物 環(huán)化磷酸化 cAMP cGMP 核苷酸衍生物 ? 5’ IMP 5’ 肌苷酸 (5’ 次黃嘌呤核苷酸 ) ? 5’ GMP （五）核苷酸的連接方式 3’, 5’磷酸二酯鍵將核苷酸連接成核酸大分子。 O HOH2C OH OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H H H H 9 腺嘌呤 腺 苷 O HOH2C OH OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 O HOH2C OH OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N O O H H H 尿嘧啶 H 1 尿苷 N C O O NH H H 5 1 OH 假尿苷（ ψ） 核苷的表示 ： 核苷： A、 G、 C 、 U 脫氧核苷： dA,dG,dC,dT 修飾核苷： 如 5甲基脫氧胞嘧啶： m5dC。 N N N N H H H H N N N N H H H H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 嘌呤 NH2 腺嘌呤 adenine （ A） N N N N H H H H O H2N 鳥嘌呤 guanine （ G） 稀有堿基 ： 一些修飾堿基，因含量甚少而稱之。 ?1944年 結論： DNA是生命的遺傳物質(zhì) 侵染 DNA注射 進細胞 蛋白質(zhì)外殼 DNA 噬菌體 大腸桿菌 噬菌體侵染實驗 分布： DNA： 主要在 細胞核 中，是染色體的主 要成分。 種類 ： DNA （脫氧核糖核酸） RNA（核糖核酸） “四核苷酸假說 ” ：核酸由四種核苷酸組成的單體構成的，缺乏結構方
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