菌種改造技術(shù)word版-在線瀏覽
2025-02-24 18:19本頁面
【正文】 下通常與各種菌混雜在一起，所以有必要進(jìn)行分離純化，才能獲得純種。把菌種制備成單孢子或單細(xì)胞懸浮液，經(jīng)過適當(dāng)?shù)南♂尯笤僭谄桨迳线M(jìn)行劃線分離。 （ 4）生產(chǎn)性能的測定 純種分離后需要對菌株的生產(chǎn)性能做測定，一般使用兩步法，即初篩和復(fù)篩。 經(jīng)過以上四 步培養(yǎng)出的菌株即為出發(fā)菌株，出發(fā)菌株的優(yōu)劣對于菌種改造有著重要的影響，所以在增殖培養(yǎng)和純種分離是培養(yǎng)基的選擇很重要。 （工業(yè)菌種基因超級誘變技術(shù)的開發(fā)與應(yīng)用研究） 二戰(zhàn)期間，由于青霉素高產(chǎn)菌株的急需 ，人們進(jìn)行了最早的通過誘變技術(shù)篩選性能改進(jìn)菌種的工作。 然而自然條件下基因突變的概率非常低，所以我們采取人 工誘變的方式使微生物發(fā)生可遺傳的變異，然后通過選擇作用保留下對我們有益的菌株，完成誘變育種。由于紫外線應(yīng)用最為廣泛 ,效果好，操作方便，我們在此對紫外線誘變做以詳細(xì)介紹。具體操作方法：在暗室中安裝具有穩(wěn)壓裝置的 15W紫外線燈管 ，將 5mL 菌懸液 注入直徑 9cm 的培養(yǎng)皿中，放置在離燈管 30cm 左右的位置，培養(yǎng) 皿底要放平，處理前贏先開燈 2030min，預(yù)熱穩(wěn)定。一般微生物營養(yǎng)細(xì)胞在上述條件下幾十秒鐘即可死亡，因此要選用適當(dāng)劑量照射。 （ 2）化學(xué)誘變劑 化學(xué)誘變劑用量少、設(shè)備簡單，所以今年來發(fā)展較快。同一誘變劑對不同微生物或同一微生物不同條件下處理作用效果也不同，因此在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時應(yīng)認(rèn)真考慮。 堿基類似物的作用原理是堿基類似物能夠代替 DNA結(jié)構(gòu)中的四種堿基進(jìn)入到 DNA 中去，而又不妨礙 DNA 的復(fù)制，由于他們的化學(xué)結(jié)構(gòu)改變了，就有可能引起變異。引起 DNA和核苷酸組成成分變化的化合物主要是指烷化劑和亞硝酸類物質(zhì)。改變 DNA結(jié)構(gòu)的化合物能同 DNA或 RNA作用改變其化學(xué)結(jié)構(gòu)，但又不形成共價鍵，引起突變。 和方法 誘變育種的一般方法 [3]，如圖所示： 從圖中可以看出，誘變育種的一般過程與上述出發(fā)菌株的選擇步驟基本一致，只是加入了誘變處理的操作。誘變劑的選擇只能靠實(shí)際的工作經(jīng)驗(yàn)。紫外線照射和光照復(fù)活交替的處理方法能夠大大提高突變的概率；兩種誘變劑復(fù)合處理的作用效果也要明顯優(yōu)于單一誘變劑處理。典型的細(xì)菌細(xì)胞整個遺傳過程要形成 1000 多種酶。協(xié)調(diào)功能控制酶的合成量，一旦酶合成，其活性又受到激活因 子和抑制因子的調(diào)節(jié)。環(huán)境雖不能改變其基因型但卻影響著他的表現(xiàn)型。 代謝的調(diào)控類型主要有誘導(dǎo)、碳分解代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)、氮分解代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)、磷硫的調(diào)節(jié)、反饋調(diào)節(jié)。 初級代謝產(chǎn)生細(xì)胞中的小分子，這些小分子是合成生物大分子的材料或輔酶。 初級代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)的方式主要有： （ 1）降低產(chǎn)物的濃度 在一些較為簡單的代謝途徑中用這種辦法能積累中間產(chǎn)物。這樣 C就會積累。講培養(yǎng)物涂布到含有這種抗代謝物的平皿上能殺死大多數(shù)細(xì)胞從而篩到抗性突變株，其中有些可能過量代
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