菌種改造技術word版(參考版)
2025-01-10 18:19本頁面
【正文】 參考文獻 ： [1]諸葛健 .工業(yè)微生物育種學： [M].沈微 .北京： 化學工業(yè)出版社， . [2]賀小賢 .生物工藝原理 :[M].北京：北京市燕山印刷廠， . [3] 劉如林 .微生物工程概論 :[M].天津：南開大學出版社， . [4] 江南大學 .一種高發(fā)酵速率的重組酒精酵母及其構建和所用的表達載體：中國 ,[P]. 。為了提高微生物發(fā)酵的產率和轉化率，優(yōu)勢菌種的培養(yǎng)是我們研究的一大趨勢。應用這種重組酵母可提高酒精發(fā)酵速率，發(fā)酵周期縮短38%，而且并減少底物流失和能耗，提高原料出酒率，相對出酒率提高 20%。 江南大學王正祥 等人利用 DNA重組技術或得了一種高發(fā)酵產率的酒精酵母[4]。 基因工程最典型的操作一般包括三個步驟：外源 DNA的獲得與酶切、外源DNA與經同樣酶切的載體的連接、連接產物轉化受體細胞級陽性轉化子的篩選。 原生質體融合的步驟： （ 1）標記菌株的篩選和穩(wěn)定性驗證； （ 2）原生質體制備； （ 3）等量原生質體加聚乙二 醇促進融合； （ 4）涂布與再生培養(yǎng)基，再生出菌落； （ 5）選擇性培養(yǎng)基上劃線生長，分離驗證，跳去融合子進一步試驗、保藏； （ 6）生產性能篩選。 原生質體育種技術主要有原生質體融合、原生質體轉化，原生質體技術育種是在經典基因重組基礎上發(fā)展的一種新的更為有效的方法。轉化中突出的問題是供體 DNA 易為受體DNA酶所破壞，難以進入，但轉導是借助噬菌體將 DNA帶入感染記住，使之改變特性。 轉導是噬菌體做媒介，將一個細胞的遺傳物質傳遞給另一個細胞的過程。 轉化育種是把對遺傳起決定作用的 DNA從甲菌中拿出來又放到乙菌中去，甲菌的部分遺傳性狀轉移到乙菌中。如果要進行雜交可用顯微操作器將子囊孢子配對，進行微滴 培養(yǎng)，使之發(fā)芽結合形成合子。 （ 2）子囊孢子的獲得 用幾毫升蒸餾水洗下斜面或平皿上的子囊，加入 1mL液體石蠟和 5g硅藻土，在勻漿皿中研磨 10分鐘，然后在離心機中 4500r/min離心 10分鐘，子囊孢子集中在最上一層石蠟中。 （ 1）子囊孢子的形成 產包子酵母在長期的實驗室條件下培養(yǎng)會引起省包子能力衰退，要形成子囊孢子就需要用生孢子培養(yǎng)基。涉及部分染色體基因的重組；雙親細胞不接觸，但涉及個別或少數(shù)基因的重組，如轉化和轉導。 育種 基因重組廣義而言是指基因型不同的個體交配產生不同于親本基因型的個體，這表明進行了遺傳信息的重組。去 涂布在 MM上，也可以與已融化并冷卻到 50℃ 的 MM混勻，倒入平皿中。 （ 4）確定生長譜 經過檢出后，需要測定是什么缺陷型。在基本培養(yǎng)基上涂布孢子，野生型可以快速生長，而缺陷型不能生長，用過濾法可將未生長的缺陷型孢子分離出來。用離心法可將未被破壞的細胞分離出來。 （ 2）
公司管理相關推薦
鄂ICP備17016276號-1