常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)-在線瀏覽
2024-08-03 16:20本頁(yè)面
【正文】 采用此法 。 煮沸滅菌法： 適用注射器和解剖器皿 ， 時(shí)間 10－ 15min， 超高溫殺菌 135150176。 優(yōu)點(diǎn) ： 保持食品價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)成分。 適用范圍 ：許多材料如血清、抗生素及糖溶液采用此法。 優(yōu)缺點(diǎn) ：不破壞培養(yǎng)基成分，只適用少量濾液。 注意事項(xiàng) ： 壓力適當(dāng)； 無(wú)菌條件下進(jìn)行； 防止?jié)B透現(xiàn)象。此段波長(zhǎng)易被細(xì)胞中核酸吸收；可產(chǎn)生臭氧和過(guò)氧化氫。 缺點(diǎn)：穿透力不大。 應(yīng)用：無(wú)菌室，醫(yī)院。 射線滅菌： r射線，穿透力強(qiáng)，適用于堆積物品的滅菌。 殺菌劑如重金屬離子； 抑菌劑如磺胺類(lèi)及多數(shù)抗生素。 常用化學(xué)殺菌劑有：乙醇、醋酸、石碳酸 福爾馬林、升汞、高錳酸鉀、新潔爾滅等 實(shí)驗(yàn)二 、 微生物的分離 、 純化及培養(yǎng)技術(shù) 分離與純化：從混雜的微生物群體中獲得只含某一種或某一株微生物的過(guò)程 。 常用的分離 、 純化方法 ： 單細(xì)胞挑取法 稀釋涂布平板法 稀釋混合平板法 平板劃線法 稀釋涂布平板法 ： 原理： 步驟： 倒平板： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 ， 高氏 I號(hào)培養(yǎng)基 ， 查氏培養(yǎng)基冷卻至 5560℃ 時(shí) ， 混勻后倒平板 ， 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒 4皿 ， 高氏 I號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基各倒 3皿 。 取 加入盛有 中 ， 以此類(lèi)推 ， 制成不同稀釋度 。 培養(yǎng)：高氏 I號(hào)和查氏倒置培養(yǎng)于 28℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)35days， 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基在 37℃ 培養(yǎng) 12days。 平板劃線法： 倒平板 ， 標(biāo)記培養(yǎng)基名稱(chēng) ， 編號(hào)和實(shí)驗(yàn)日期 。 實(shí)驗(yàn)三、菌種保藏 幾種常用的保藏方法： 傳代培養(yǎng)法 保藏的菌種通過(guò)斜面、穿刺或皰肉培養(yǎng)基（用于厭氧細(xì)菌）培養(yǎng)好后，置 4C?冰箱中存放，定期進(jìn)行傳代培養(yǎng)、再存放。 載體法 使生長(zhǎng)合適的微生物吸附在一定的載體上進(jìn)行干燥。 懸液法 將細(xì)菌、酵母菌細(xì)胞懸浮在一定的溶液中保存。 冷凍法 使菌種始終存放在低溫環(huán)境下的保藏方法。 此法關(guān)鍵是要克服細(xì)胞的冷凍損傷。 真空干燥法 這類(lèi)方法包括冷凍真空干燥法和 L－干燥法。 L干燥法則不需要低溫預(yù)凍樣品，只是使樣品維持在 10－20C?范圍內(nèi)進(jìn)行真空干燥。 保藏時(shí)間依微生物的種類(lèi)而定。 此法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、使用方便，缺點(diǎn)是保藏時(shí)間短、易被污染。
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