血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳-在線瀏覽
2025-02-23 09:06本頁(yè)面
【正文】 1. 準(zhǔn)備 ：將巴比妥緩沖液加入電泳槽的電極室內(nèi)，是正負(fù)極室的吖液面等高，電泳支架寬度正好適合醋纖薄膜的長(zhǎng)度，用四層紗布或?yàn)V紙做鹽橋，一端浸入緩沖液中，一端搭在支架上。當(dāng)膜條無(wú)可見(jiàn)的白斑或點(diǎn)狀的不透明區(qū)時(shí)，取出，將薄膜無(wú)光澤面向上，平放于干凈濾紙，薄膜上再放一張干凈濾紙輕輕吸去多余的緩沖液。（注：點(diǎn)樣量不宜過(guò)多?。? 這是關(guān)鍵步驟，印章法加樣時(shí)，動(dòng)作應(yīng)輕、穩(wěn)，用力不能太重，以免將薄膜弄破或印出凹陷而影響電泳區(qū)帶分離效果。 4. 平衡 ：將膜條無(wú)光澤面向下置于電泳槽支架上，點(diǎn)樣端靠近負(fù)極，薄膜兩端要緊貼紗布或?yàn)V紙，中間平直懸空，加蓋密封，平衡 5分鐘。開(kāi)啟電源，調(diào)節(jié)電流密度為 ,如有 10條寬2cm的膜條，其總寬度為 20cm,應(yīng)使用電流強(qiáng)度為20cm*。通電 50分鐘左右，使電泳區(qū)帶展開(kāi) 3~。 6. 染色 ：取下薄膜直接浸于氨基黑 10B染色液中，染色 5~10min（以蛋白帶染透為止），然后在漂洗液中漂去剩余染料，直至背景無(wú)色為止。 （光密度計(jì)掃描法） ① 透明：吸取薄膜上的漂洗液（以防止透明液被稀釋影響透明結(jié)果），將薄膜浸入透明液中 2~3分鐘（延長(zhǎng)一些時(shí)間亦無(wú)礙）。將此玻璃片樹(shù)立片刻，除去一定量透明液后，置已恒溫 90~100176。
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1