酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)ppt課件-在線瀏覽
2025-02-22 20:11本頁(yè)面
【正文】 10AA kte ??? ? ? ? ? ? ? ?? ?11 001 / l n A / A 2 .3 / l o g A / At k k??1ACk???一級(jí)反應(yīng)的特點(diǎn)： （ 1）反應(yīng)速度與反應(yīng)物濃度 [A]呈正比。 （ 3） k1的單位為： s1或 min1） V [A] ? 二、均相可逆反應(yīng)系統(tǒng) ： ? ? ? ? ? ?11d A / d A Bt k k ???11ABkk?? ?? ?eq1eq1 eqBAkKk ???? 三、均相雙分子不可逆反應(yīng)系統(tǒng) ： 1A + B C + Dk???? ? ? ? ? ?1d A / d A Btk??? ? ? ?? ? ? ? ? ?39。 （ 2） [A]與 t為半對(duì)數(shù)函數(shù)關(guān)系。μmol/L或 min） ? 五、對(duì)于反應(yīng)系統(tǒng)： 11A + B Ckk?? ? ? ? ? ? ? ?11 A / d A B Ct k k ???按合成方向： 此處 Keq為結(jié)合常數(shù)，其因此為濃度 1；解離常數(shù)有濃度因次。 ? ? 1C=kt?[C] ∞與 t為線性函數(shù)，根據(jù)以上兩式，應(yīng)有： ? ? ? ? ? ?? ?2 2= C / C = 1 1 /kte k t??? ? ?σ 為形成的終產(chǎn)物 C與原始反應(yīng)物 A變化量之比，稱為接近度， σ 越接近 1，形成的終產(chǎn)物越能反映原始反應(yīng)物的變化量。反應(yīng)開始后，首先是中間產(chǎn)物 B的形成， [B]迅速升高，達(dá)到最大值，而后下降； [B]達(dá)到最大值時(shí)間 tB為： ? ? ? ?B 1 2 1 2= l n / /t k k k k?????終產(chǎn)物 C的形成在反應(yīng)初期有一延遲， tB時(shí)后加速； k2愈大，延遲期愈短， k2無(wú)限增大，延遲期消失， [C]趨近于[C] ∞； [A]的減少與 [C] ∞的增加呈對(duì)稱圖形。 ? Km的物理意義： ? ⑴特定的反應(yīng)，特定的反應(yīng)條件下， Km是個(gè)特征常數(shù)，可部分描述酶反應(yīng)性質(zhì)、反應(yīng)條件對(duì)酶反應(yīng)速度的影響。 ? ⑵ 1/Km表示酶與底物的親和力， Km越大，親和力越小，反之越大。表明 Km相當(dāng)于反應(yīng)達(dá)到最大速度一半時(shí)的底物濃度，或者說(shuō)，相當(dāng)于要使反應(yīng)系統(tǒng)有一半的酶分子參加反應(yīng)所必須具有的底物濃度。 ? ⑸通過(guò) Km可了解酶的底物在體內(nèi)可能具有的濃度水平。 反之 ,如果 [S] Km,那么 v≈V， [S]將失去其生理意義。 ? （三）酶活力單位和比活力 ? 一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)單位：在特定的條件下（ 25℃ ， pH、底物濃度等其他條件均為最適條件）， 1分鐘能轉(zhuǎn)化 1微摩爾底物所需的酶量。 ? （四）酶的轉(zhuǎn)換數(shù) ? ：在最適條件下，每摩爾酶每分鐘所轉(zhuǎn)變的底物摩爾數(shù)（即每摩爾酶的酶單位數(shù)）。 ? min1表示。例如， 1/v對(duì) 1/[S]作圖時(shí)，一般應(yīng)該得到線性圖形，但有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生偏差，原因可能為： ? （ A）可能是由于高底物濃度引起的抑制； ? （ B）可能是由于高底物濃度引起的活化： ? （ C）和（ D），可能是由于分析操作上的誤差； ? 在實(shí)際工作中，反應(yīng)系統(tǒng)使用適當(dāng)?shù)牡孜餄舛确浅Ｖ匾? ? 進(jìn)行底物本身的測(cè)定時(shí)，應(yīng)使反應(yīng)速度直接比利于底物濃度，即使系統(tǒng)處于一級(jí)反應(yīng)狀態(tài)。 ? ⑴很難準(zhǔn)確地畫出矩形雙曲線； ? ⑵很難畫出漸近線； ? ⑶誤差不易察覺； ??m[S][S]VvK? 2. ? 該式對(duì)應(yīng)的圖形為 1/v~1/[S]作圖，稱為 LineweaverBurk作圖 或 雙倒數(shù) 作圖。 ? ⑵誤差放大。 ??[]m1 1 1V S VKv? 3. ? 相應(yīng)的作圖為 [S]/v~[S]，稱為 Hanes作圖。 ??[] []mS1 SVVKv? 4. ? 對(duì)應(yīng)圖形為 v~v/[S]，稱為 EadieHofstee作圖。故現(xiàn)在很受人們重視。 ??＝ pmVpS lg vKv? 6. ? 可用（ ） log（ [S]0/[S]） ~（ [S]0[S]） / t作圖。 ? ?? ?? ? ? ?00mmS S S2 . 3 1l o gSVt K t K?? ? ?? 應(yīng)用作圖法測(cè)定動(dòng)力學(xué)常數(shù)時(shí)應(yīng)注意的 兩個(gè)問(wèn)題 ： ? Km的 [S]，否則不能得到準(zhǔn)確結(jié)果，因?yàn)椋? ? ①用 LineweaverBurk作圖時(shí)，如果 [S] Km,曲線基本水平，斜率近于 0；如果 [S] Km,則曲線在 X和 Y軸都靠近原點(diǎn)。 ? ③用 EadieHofstee作圖時(shí)， [S] Km ，曲線接近水平； [S] Km，曲線極陡。因此為了避免混亂，在作圖時(shí)建議使用 μmol/L、 mmol/L或 mol/L表示濃度。而事實(shí)上，一般測(cè)得的 Km和 V本身也可能就是由多個(gè)中間步驟提供的復(fù)合函數(shù)。tt ? 穩(wěn)態(tài)前動(dòng)力學(xué)方程也可改寫成： ? 如將圖 d[P]/dt=C的直線部分推到 X軸可測(cè)得 ， 稱為“誘導(dǎo)”時(shí)間。在各項(xiàng)常數(shù)的計(jì)算中，通常用于穩(wěn)態(tài)測(cè)定法的時(shí)間極限為 10s左右；對(duì)于穩(wěn)態(tài)前速度和常數(shù)的測(cè)定需要快速留管法，它的時(shí)間極限是 t1/2~107s；或馳豫時(shí)間法，它的間歇極限 t1/2103s。 /( 2 )VV????ss39。 / ( 39。 ? ⑵ 高底物濃度引起活化 KSaK’s時(shí)， 1/v~1/[S]圖形有線性關(guān)系，測(cè)得的 K’m=Km(1+KSa/K’s)，K’s是表觀 Km， Km的增大是因?yàn)樾纬闪藷o(wú)效的 ES部分。 當(dāng) S2一定時(shí)，以上兩式可表達(dá)成米氏方程的形式： V’和 K‘m與 V和 Km1不同，它們隨 S2的濃度而變化；但當(dāng) [S2]Km2時(shí)， V’和K’m與 V和 Km1接近。 對(duì)于連續(xù)機(jī)制來(lái)說(shuō)，隨著 [S2]的增大，各直線的截距與斜率都降低；而乒乓機(jī)制的各直線卻是一組平行線，其斜率與 [S2]無(wú)關(guān)。這種假定在體外很容易得到滿足，但體內(nèi)就不同，許多酶和它們的底物在細(xì)胞中濃度往往接近于 Km的水平。 ? ChaCha方程： ? （八）酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 ? 當(dāng) [S] Km 時(shí)， v達(dá)到V， v~[E]呈線性關(guān)系，即酶速度與反應(yīng)速度成正比關(guān)系。 ? （九）溫度對(duì)酶促反應(yīng)初速度的影響 ? ：反應(yīng)速度達(dá)到最大值時(shí)的溫度。 ? 溫度對(duì)酶的影響： ? ①提高溫度可以增加反應(yīng)速度 ? ②提高溫度會(huì)使酶蛋白逐步變性而失活 ? ③最適溫度是酶的特征常數(shù)。 測(cè)定酶的穩(wěn)定溫度的方法： 先讓等量的酶溶液分布在不同溫度下分別保溫一定時(shí)間，然后迅速冷卻，測(cè)酶活。 ? 酶的最適 pH是酶的特征常數(shù)，但不是固定不變的常數(shù)。 ? （十一）激活劑和抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)初速度的影響 ? 激活劑（ Activator）：凡是能提高酶活性的物質(zhì) ? ? 陽(yáng)離子： H+和各種金屬離子，如： K+ 、 Na+ 、 Ca2+、Mg2+ 、 Zn2+ …… ? 陰離子： Cl、 Br、 I、 CN、 NO等。 ? 無(wú)機(jī)離子對(duì)酶活性的影響規(guī)律： ? ①與濃度有關(guān)，呈雙曲線關(guān)系； ? ②在一起的兩種離子對(duì)酶活性有拮抗作用。 ? ③有時(shí)金屬離子之間可以相互替代； ? ④一種無(wú)機(jī)離子，對(duì)一種酶是激活，對(duì)另一種酶可能是抑制； ? ? 還原劑能使巰基酶分子內(nèi)的二硫鍵還原成 SH基，從而提高酶活性。 ? 金屬熬合劑能去除酶分子中的重金屬離子，從而解除重金屬離子對(duì)酶活性的抑制。 ? ? 、 ? 某些蛋白酶能使無(wú)活性的酶原變成有活性的酶。 ? 激活劑對(duì)酶的激活作用的 類型 ： ? ①必須型：使無(wú)活性的酶變
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