土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與記數(shù)maomao-在線瀏覽
2025-01-25 08:28本頁(yè)面
【正文】 別是什么物質(zhì)？ 此配方能否篩選出產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌？為什么？ 碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素 能。 在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。 測(cè)定微生物數(shù)量的方法： 背景知識(shí) 顯微鏡直接計(jì)數(shù)： 利用 血球計(jì)數(shù)板 (血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 ） ， 在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。 2．間接計(jì)數(shù)法： 最常用 稀釋平板計(jì)數(shù)法 。因此，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵。 每克樣品中的菌株數(shù) = (C247。 這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多 個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。 注意： 兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。 平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為 230。 實(shí)例 1 你認(rèn)為哪位同學(xué)的結(jié)果更接近真實(shí)值？這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)嗎？如果需要，如何改進(jìn)？ ? 你認(rèn)為哪位同學(xué)的結(jié)果更接近真實(shí)值？這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)嗎？如果需要，如何改進(jìn)？ 第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。 ? 因此 ， 這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn) ， 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí) ， 一定要涂布至少 3個(gè)平板 ， 作為重復(fù)組 ， 才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性 。 說(shuō)明設(shè)置重復(fù)組的重要性。 ②為使結(jié)果接近真實(shí)值可將 同一稀釋度加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板中 ，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計(jì)算出菌落平均數(shù)。 在做本課題的實(shí)驗(yàn)時(shí)， A同學(xué)從對(duì)應(yīng) 106倍稀釋的培養(yǎng)基中篩選出大約 150個(gè)菌落。 其他同學(xué)認(rèn)為 A同學(xué)的結(jié)果有問(wèn)題。 實(shí)例 2 但是， A同學(xué)確信自己的實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)確無(wú)誤，與其他同學(xué)的結(jié)果之所以不相同，是因?yàn)樽约核x用的土壤樣品不同。但是， A同學(xué)在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候并沒(méi)有設(shè)置對(duì)照，因而此時(shí)也拿不出令同學(xué)們信服的證據(jù)。 究竟是哪個(gè)原因，可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。 究竟是哪個(gè)原因，可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。 如果結(jié)果不同，則證明 A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問(wèn)題。 通過(guò)這個(gè)事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說(shuō)服力， 對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。 對(duì)照實(shí)驗(yàn) 是指除了 被測(cè)試 的條件外，其他條件都 相同 的實(shí)驗(yàn)。 （三）設(shè)置對(duì)照 判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染 ： 將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。 主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn) 結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。先鏟去表層土 3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。 先鏟去表層土 3 cm左右 ， 再取樣 ， 將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中 。 制備 5個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和15個(gè)選擇培養(yǎng)基。 注：每個(gè)稀釋度下需要 3個(gè)選擇培養(yǎng)基， 1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。 實(shí)驗(yàn)步驟 為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？ 因?yàn)橥寥乐懈黝愇?
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