土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與記數(shù)maomao(已修改)
2024-12-20 08:28 本頁面
【正文】 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第 2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？ 問題討論 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第 2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？ 應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證 “ 無菌 ” 。 例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。 問題討論 微生物的恒溫培養(yǎng) 微生物的恒溫培養(yǎng) 微生物的恒溫培養(yǎng) 菌種的保存 ： 接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長成后置于 4℃ 冰箱保存。 ： 甘油冷凍管藏法 四、課題成果評價 （一）培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 1～ 2 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。 （二）接種操作是否符合無菌要求 如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，再次練習(xí)。 （三）是否進(jìn)行了及時細(xì)致的觀察與記錄 培養(yǎng) 12 h與 24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點，并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。 尿素 [CO(NH2)2]—— 重要的農(nóng)業(yè)氮肥。 只能被土壤中細(xì)菌分解為 NH3才能被植物吸收利用 CO(NH2)2 + H2O CO2 +2NH3 細(xì)菌脲酶 一、課題背景 兩個主要目的： (1)從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌； (2)統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少這樣的細(xì)菌。 二、研究思路 提出的問題 — 如何尋找耐高溫的酶？ 解決問題的思路 — 尋找耐高溫環(huán)境； 原理 — 高溫淘汰其他菌，選出耐高溫細(xì)菌， 耐高溫菌種提取耐高溫酶。 水生耐熱細(xì)菌 Taq ( Thermus aquaticus ) 耐高溫的 Taq DNA聚合酶 美國微生物學(xué)科布魯克（ ) 1966年發(fā)現(xiàn)耐熱細(xì)菌 研究思路 （一）篩選菌株 要分離一種微生物，必須根據(jù)該微生物的特點， 包括營養(yǎng)、生理、生長條件等； 方法： ⑴抑制大多數(shù)微生物的生長 ⑵促進(jìn) 目的菌株 的 生長 結(jié)果： 培養(yǎng)一定時間后，該菌數(shù)量上升，再通過平板稀釋等方法對它進(jìn)行純化培養(yǎng)分離。 實驗室中微生物的篩選原理： 人為提供有利于 目的菌株 生長的條件 (包括營養(yǎng)、溫度、 pH等 )，同時抑制或阻止其他微生物生長。 尿素分子的立體結(jié)構(gòu) CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3 脲 酶 分解尿素的細(xì)菌 : （
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