土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)配套課件新人教版選修-在線瀏覽
2025-03-02 17:06本頁面
【正文】 失水而不能生存；在高溫環(huán)境中可分離得到耐高溫的微生物，其他微生物在高溫環(huán)境中因酶失活而無法生存。 (2)進行活菌計數(shù)時 ， 統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低 ， 這是因為兩個或多個細胞連在一起時 ， 平板上觀察到的只是一個菌落 。 【 鞏固 1】 苯 酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。請回答下列問題。 (2)④ 為對照 ， 微生物在 ④ 中不生長 ， 在 ⑤ 中生長 ， ④ 與 ⑤ 培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 ____________________；使用 ____________法可以在 ⑥ 上獲得單菌落 。 (3)實驗過程中如何防止其他微生物的污染 ？ ___________________________________________________。 為防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生長 ， 所以要將培養(yǎng)皿倒置 。 答案 (1)苯 酚 A 稀釋涂布平板 (2)④ 的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源 ， ⑤ 的培養(yǎng)基加入苯酚作為碳源 稀釋涂布平板法或平板劃線 以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基 (3)培養(yǎng)基滅菌 ， 接種環(huán)境滅菌 ， 接種過程無菌操作 1． 實驗設計 (1)土 壤取樣 ① 土壤微生物大約 70%～ 90%是 。 土壤中分解尿素的細菌的分離計數(shù)實 驗操作與評價 細菌 接近中性 潮濕 3～ 8 cm (2)樣品處理 樣品的 直接影響平板上生長的 ， 選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng) ， 保證菌落數(shù)在 之間 ， 便于計數(shù) 。 (4)細菌的計數(shù) 當菌落數(shù)目穩(wěn)定時 ， 取同一條件下的至少 個平板進行計數(shù) ， 求出 ， 并根據(jù)所對應的 計算出樣品中細菌的數(shù)目 。 ② 應在 旁稱取土壤 。 ③ 在稀釋土壤溶液的過程中 ， 每一步都要在 旁操作 。 滅菌 火焰 火焰 火焰 做好標記 3． 課題延伸 細 菌合成的 將尿素分解成 ， 使培養(yǎng)基的 增強 。 脲酶 氨 堿性 尿素 酚紅 紅 分解尿素 [思維激活 2] 分離尿素細菌的培養(yǎng)基為何能起到選擇作用 ？ 提示 微生物的生長需要氮源 ， 大多數(shù)微生物不能直接利用尿素作氮源 ， 但尿素細菌卻可以尿素作氮源 ， 因此 ， 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中 ， 唯有能利用尿素的微生物方可生長繁殖 ， 其他微生物則不能生長繁殖而被淘汰 ， 因而該培養(yǎng)基可起到篩選尿素細菌的作用 。 這種物質(zhì)在把尿素分解成無機物的過程中起催化作用 。 ③ 分離分解尿素的細菌的培養(yǎng)基中的氮源只有尿素 ， 理論上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生長 。 ② 方法：用計數(shù)板計數(shù) 。 (2)間接計數(shù)法 (活菌計數(shù)法 ) ① 原理：當樣品的稀釋度足夠高時 ， 培養(yǎng)基表面生長的一個菌落 ，來源于樣品稀釋液中的一個活菌 ， 通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù) ， 就能推測出樣品中大約含有多少活菌 。 分析結(jié)果時 ， 需考慮重復組的結(jié)果是否一致 ， 結(jié)果明顯不一致 ， 意味著操作有誤 ， 需要重新實驗 。 ③ 計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝ C/V M， 其中 C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù) ， V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積 /mL， M代表稀釋倍數(shù) 。因產(chǎn)生NH 3 使培養(yǎng)基堿性增強， pH 升高，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色反應。 ① 加尿素 ② 不加尿素 ③ 加瓊脂 ④ 不加瓊脂 ⑤ 加葡萄糖 ⑥ 不加葡萄糖 ⑦
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