食品檢驗(yàn)工中級(jí)培訓(xùn)資料-在線瀏覽
2024-11-01 21:23本頁(yè)面
【正文】 著目鏡邊觀家邊下降鏡簡(jiǎn)的錯(cuò)誤操作。 ? 3．用二甲苯擦鏡頭時(shí)用量要少，不宜久抹，以防溶解膠粘透鏡的樹(shù)脂。切忌單手拎提。反光鏡轉(zhuǎn)成垂直狀。 ? (2) 清潔顯微鏡 ? (3) 清潔后應(yīng)將物鏡轉(zhuǎn)成“八”宇式，緩慢下降鏡筒，使物鏡擱在鏡臺(tái)上。 ? (5) 加香柏油 ? (6) 調(diào)焦 ? (7) 觀察仔細(xì)觀察細(xì)菌形態(tài)并將結(jié)果填入表中。 ? (3) 轉(zhuǎn)換油鏡，將油鏡轉(zhuǎn)到工作位置。 ? 3．高倍鏡觀察 鏡頭轉(zhuǎn)換，調(diào)節(jié)視野亮度，觀察并記錄結(jié)果 ? 4．用油鏡觀察細(xì)菌 ? (1) 放置標(biāo)本：將染色的細(xì)菌涂片置于鏡臺(tái)上。 ? 2. 用低倍鏡觀察玻片標(biāo)本 （ 1） 放置標(biāo)本：標(biāo)本玻片用標(biāo)本夾夾住，移動(dòng) 玻片夾推進(jìn)器 使觀察對(duì)象處在物鏡的正下方。 四、操作步驟 ? 1．觀察前的準(zhǔn)備 （ 1）顯微鏡的安置： 搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應(yīng)用右手握住鏡臂，左手托住底座，使鏡身保持直立，并緊靠身體，切忌單手拎提。普通光學(xué)顯微鏡的使用 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 1．熟悉普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和各部分的功能； ? 2．學(xué)習(xí)掌握油鏡的原理和方法。 二、實(shí)驗(yàn)原理 (略 ) 三、材料和器皿 ? 顯微鏡，香柏油，二甲苯； ? 金黃色葡萄球菌染色玻片標(biāo)本，枯草芽孢桿菌染色玻片標(biāo)本。物鏡的轉(zhuǎn)換使用鏡頭轉(zhuǎn)換器?。?！ （ 2）視野明暗調(diào)節(jié)：通過(guò)電壓調(diào)節(jié)光源強(qiáng)弱；調(diào)節(jié)聚光器虹彩光圈或聚光器高度的調(diào)節(jié)。 下降 10X物鏡，使其接近標(biāo)本，用粗調(diào)節(jié)器慢慢升起物鏡， 使標(biāo)本在視野中初步聚焦，再使用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)圖像清晰，通過(guò)玻片夾推進(jìn)器慢慢移動(dòng)玻片，認(rèn)真觀察標(biāo)本各部分，找到合適的目的物，仔細(xì)觀察并記錄結(jié)果。 ? (2) 找合適的視野：先用低倍鏡尋找合適的視野，并將觀察的部位移到視野中央。 ? (4) 調(diào)節(jié)聚光器與油鏡數(shù)值孔徑相一致：只要將聚光器上升到最高位置，可變光闌開(kāi)到最大，此時(shí)兩者的數(shù)值孔徑即達(dá)到一致。 ? 5．顯微鏡用畢后的處理 ? (1) 上升鏡簡(jiǎn)取下玻片。將聚光器降到最低位置。 ? (4) 去除涂片上的香柏油 五、注意事項(xiàng) ? 1．搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應(yīng)用右手握住鏡臂，左手托住底座，使鏡身保持直立，并緊靠身體。 ? 2．各個(gè)鏡面切忌用手涂抹，以免手上的油、汗污損鏡面，造成日后發(fā)霉。切勿用乙醇擦鏡頭和支架。 六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1．將觀察到的微生物形態(tài)畫(huà)于下表中 樣品 低倍 （放大 倍） 高倍 （放大 倍） 油鏡 （放大 倍） 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 革蘭氏染色法 ? 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? ? 1．學(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù)； ? 2．學(xué)習(xí)掌握革蘭氏的原理和方法。涂布面積約 1 cm2。 ? 3. 固定：手執(zhí)玻片一端，有菌膜的一面朝上，通過(guò)微火 3次 (用手指觸涂片反面以不燙手為宜 )。 （固定溫度不宜過(guò)高，以玻片不燙手為宜 ） 四、操作步驟 ? 4. 初染：將玻片置于玻片擱架上，加草酸銨結(jié)晶紫染色液 （加量以蓋滿菌膜為度） ，染色 12 min，水洗 （水洗時(shí)，不要直接沖洗涂面，水流不宜過(guò)急過(guò)大） 。 ? 6. 脫色：用濾紙吸去殘水，將玻片傾斜，用滴管滴加 95％乙醇脫色，直至流出的乙醇無(wú)紫色時(shí) 立即水洗，以終止脫色。 ? 7. 復(fù)染：滴加沙黃液，染色 2 min，水洗。 四、操作步驟 ? 8. 鏡檢：用油鏡觀察并繪細(xì)菌形態(tài)圖于記錄表中 （涂片必須完全干燥后方能菌檢） 。有菌的玻片用洗衣粉水煮沸后，清洗干凈。 ? （ 2）另取 1mL的滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序作 10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用 1支 1mL滅菌吸管。 從種類上講，大腸菌群包括許多生化及血清學(xué)特性均很不相同的細(xì)菌，其中有埃希氏菌屬，枸椽酸菌屬、腸桿菌屬和克雷伯氏菌屬等等．以埃希氏菌屬為主，大腸菌群 MPN是指在 100ml(或 100g)食品檢樣中聽(tīng)含的大腸菌群的最近似或最可能數(shù)。 ? 1．初（步）發(fā)酵試驗(yàn) 發(fā)酵管內(nèi)裝有乳糖蛋白胨液體培養(yǎng)基，并倒置一德漢氏小套管。為便于觀察細(xì)菌的產(chǎn)酸情況，培養(yǎng)基內(nèi)加有溴甲酚紫作為 pH指示劑，細(xì)菌產(chǎn)酸后，培養(yǎng)基即由原來(lái)的紫色變?yōu)辄S色。 水樣接種于發(fā)酵管內(nèi)， 37℃ 下培養(yǎng)， 24小時(shí)內(nèi)小套管中有氣體形成，并且培養(yǎng)基混濁，顏色改變，說(shuō)明水中存在大腸菌群，為陽(yáng)性結(jié)果，但也有個(gè)別其他類型的細(xì)菌在此條件下也可能產(chǎn)氣；此外產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的也不能完全說(shuō)明是陰性結(jié)果。 48小時(shí)后仍不產(chǎn)氣的為陰性結(jié)果。亞硫酸鈉還可抑制其他雜菌的生長(zhǎng)。初發(fā)酵管 24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣和 48小時(shí)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的均需在以上平板上劃線分離菌落。原理與初發(fā)酵試驗(yàn)相同，經(jīng) 24小時(shí)培養(yǎng)產(chǎn)酸又產(chǎn)氣的，最后確定為大腸菌群陽(yáng)性結(jié)果。 四、操作步驟 ? （一）細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定 300ml， 121℃ 高壓滅菌20min。 1： 100、 1： 原樣 的樣品各 1ml，每個(gè)稀釋度均做 兩個(gè)平行樣 。 平皿分 4部分點(diǎn)數(shù)（見(jiàn)圖） 求同一 稀釋度的平均菌落數(shù) 如： A1數(shù) + A2數(shù) 2 菌落計(jì)數(shù)： X4 1）平板菌落數(shù)的選擇 2）稀釋度的選擇 3）菌落數(shù)的報(bào)告 菌落數(shù)＜ 100 按實(shí)有數(shù)報(bào)告 菌落數(shù)＞ 100 采用兩位有效數(shù)，后面數(shù)值 四舍五入（也可用 10
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