胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用_畢業(yè)論文正文-在線瀏覽
2024-10-28 23:30本頁面
【正文】 養(yǎng)時， ESCs 不但可以增殖，而且可以被用來進行各種操作，而這一點是以 ESCs 的以下兩方面特性為前提的：①在對 ESCs 進行各種操作的過程中，其仍能保持其擴增和發(fā)育的全能性和多能性。由于來源于著床前胚胎的 ESCs 的某些細(xì)胞表面免疫相關(guān)蛋白 (如 MHC)還未來得及表達(dá)，用于移植時不易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，因此使其成為移植治療和 細(xì)胞治療的潛在資源 [6]。 ESCs 具有很強的分化能力，可以無限增殖并分化成為全身 200 多種細(xì)胞類型，進一步形成機體的所有組織和器官。 3． 3 ESCs 建系概況 ESCs 建系的原理是將早期胚胎或是用外科手術(shù)法得到 的內(nèi)細(xì)胞團或者 PGCs，與分化抑制物 共同培養(yǎng)，使之增殖而又保持未分化狀態(tài)， 這樣代代相傳，從而使數(shù)量有限的胚胎或者 PGCs能夠成千上萬倍的克隆。雖然來源于 PGCs 的 ESCs 與來源于 ICM 的細(xì)胞同屬胚胎干細(xì)胞系，但相比之下，前者具有著更加巨大的科學(xué)意義和實踐價值：①由于獲得囊胚內(nèi)細(xì)胞團來源的 ESCs 需要破壞具 有生命的胚 胎，所以這項研究在許多國家是被禁止或嚴(yán)格限制的 [7]，而 PGC 來源于早期流產(chǎn)的胚胎，于是來源于 PGCs 的 EGCs 系的建立 給研究人員帶來了新的希望；② PGcs 是胚胎形成后機體的干細(xì)胞，與胚泡期的內(nèi)細(xì)胞團相比，經(jīng)歷了著床的篩選，而生理狀態(tài)下有相當(dāng)量的胚泡因生長發(fā)育不良而不能正常著床并自行排出，因此PGCs 的健康程度應(yīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 ICM[8]； ③ 雖然 PGCs 用于 ESCs 的培養(yǎng)還存在諸多問題，但無論在數(shù)量上還是取材方法上， PGCs 的獲取均比桑椹胚和囊胚的獲取容易 ,因而更具有實際的應(yīng)用價值。常規(guī)使用的培養(yǎng)液有白血病細(xì)胞抑制因子 (LIF)、胎牛血清、 L 一谷氨酸、非必須氨基酸 (NEAA)以及高濃度的 DME 等。因此采用 DMEM 為基礎(chǔ)培養(yǎng)液是能夠滿足胚胎干細(xì)胞和飼養(yǎng)層細(xì)胞的生長要求的 [9]。 目前廣泛應(yīng)用的飼養(yǎng)層有三種，STO(一種已建系的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 )、 Pmef(小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞 )。故更有利于 ESCs 生長 [10]。因此，從理論上說，可提取動物睪丸 SCs，然后將 PGCs與 SCs 共培養(yǎng)，不僅可促進 PGCs 貼壁。 湖北大學(xué)自考 獨 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 9 第 五 章 ESCs 的應(yīng)用前景 ESCs 的應(yīng)用最主要的應(yīng)用是基礎(chǔ)科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)和農(nóng)業(yè)科學(xué)等方面，特別是在發(fā)育生物學(xué)、克隆動物、 藥學(xué)研究 以及組織器官的修復(fù)移植等方面有著無比廣泛的應(yīng)用前景 [12]。 5． 2 器官移植 ESCs 作為一種“ 種子細(xì)胞” 為臨床的組織、器官移植提供 了大量的材料， hESC 經(jīng)過免疫排斥基因剔除后．再定向誘導(dǎo)終末器官以避免不同個體間的移植排斥，這樣就可能解決一直困擾著免疫學(xué)界及醫(yī)學(xué)界的同種異型個體間的移植排斥難題。目前，運用藥物或細(xì)胞因子誘導(dǎo) ES 細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞 [13]、心肌細(xì)胞 、肝細(xì)胞 [14]、軟骨細(xì)胞等已多有報導(dǎo)。 藥學(xué)研究方面 湖北大學(xué)自考 獨 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 10 胚胎干細(xì)胞系可分化為多種細(xì)胞類型，又是能在培養(yǎng)基中不斷自我更新的細(xì)胞來源。胚胎干細(xì)胞有望在短期內(nèi) 就能體現(xiàn)的優(yōu)勢在于藥物篩選中。雖不會完全取代在整個動物和人體上的實驗，但會使藥品研制的過程更為有效。 在候選藥物對各種細(xì)胞的藥理作用和毒性試驗中，胚胎干細(xì)胞提供了對新藥的藥理、藥效、毒理及藥代等研究的細(xì)胞水平的研究手段，大大減少了藥物檢測所需動物的數(shù)量，降低了成本 。人胚胎干細(xì)胞還可以用于其它用途。國際上許多制藥公司、學(xué)者都瞄準(zhǔn)了這一重要的研究領(lǐng)域。 湖北大學(xué)自考 獨 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 11 第 六 章 胚胎干細(xì)胞在眼科的研究現(xiàn) 狀 胚胎干細(xì)胞與角膜 嚴(yán)重的眼表疾病如 StevensJohnson 綜合癥、化學(xué)性燒傷等，可以引起角膜緣上皮細(xì)胞缺失，導(dǎo)致球結(jié)膜上皮化、角膜新生血管形成和結(jié)膜瘢痕，最終導(dǎo)致視力喪失。王智崇等 [16]用表層角膜緣基質(zhì)接觸誘導(dǎo)ESCs，在體外分化成為單一形態(tài)的較大細(xì)胞 ，裸鼠皮下移植后形成細(xì)胞復(fù)層，電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)細(xì)胞核呈扁平狀，細(xì)胞表面有微絨毛結(jié)構(gòu)，符合角膜緣干細(xì)胞的部分形態(tài)學(xué)特征，而體外培養(yǎng)條件下，角膜基質(zhì)剝離面的 ESCs 細(xì)胞仍保持其小細(xì)胞狀態(tài)不變，未經(jīng)表層角膜緣基質(zhì)誘導(dǎo)的ESCs 細(xì)胞裸鼠皮下注射后分化為畸胎瘤樣結(jié)構(gòu)，表明表層角膜緣基質(zhì)的這種微妙的調(diào)節(jié)微環(huán)境具有誘導(dǎo) ESCs 細(xì)胞定向分化為角膜緣干細(xì)胞的潛能。最近， Homma 等將小鼠 ESCs 用 Ⅳ 型膠原接觸誘導(dǎo)后形成上皮祖細(xì)胞，其角膜上皮細(xì)胞特異性標(biāo)記物 K12 表達(dá)陽性，鱗狀上皮細(xì)胞標(biāo)記物 K14 表達(dá)陰性。有趣的是部分移植細(xì)胞呈現(xiàn)基底細(xì)胞或翼細(xì)胞外觀，說明移植細(xì)胞同時出現(xiàn)了非角膜上皮細(xì)胞的特性。 胚胎干細(xì)胞與晶狀 體 目前，人工晶狀體植入在白內(nèi)障治療中得到世界范圍的廣泛應(yīng)用，其手術(shù)方法的安全性是明確的，但是術(shù)后的調(diào)節(jié)問題一直沒有得到很好
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