【正文】 鋁、銅及內(nèi)襯光滑的聚合材料的其他金屬。一般色譜柱長 5～ 30cm，內(nèi)徑為 4～ 5mm，凝膠色譜柱內(nèi)徑 3～ 12mm，制備往內(nèi)徑較大，可達(dá) 25mm 以上。 柱子裝填得好壞對柱效影響很大。 來自 中國最大的資料庫下載 4．檢測系統(tǒng) 在液相色譜中，有兩種基本類型的檢測器。另一類是 總體檢測器 ，它對試樣和洗脫液總的物理或化學(xué)性質(zhì)有響應(yīng)，屬于這類檢測器的有 示差折光，電導(dǎo)檢測 器等。靈敏度可達(dá) 107g主要缺點(diǎn)是對溫度變化敏感，并且不能用于梯度淋洗。其中梯度淋洗裝置是高壓液相色譜儀中尤為重要的附屬裝置 . 來自 中國最大的資料庫下載 來自 中國最大的資料庫下載 來自 中國最大的資料庫下載 203高效液相色譜的固定相和流動相 （－）固定相 高效液相色譜固定相以承受高壓能力來分類，可分為 剛性固體 和 硬膠 兩大類。如果在二氧化硅表面鍵合各種官能團(tuán)，就是鍵合固定相，可擴(kuò)大應(yīng)用范圍，它是目前最廣泛使用的一種固定相。可承受壓力上限為 108Pa。 來自 中國最大的資料庫下載 它的基體是實(shí)心玻璃珠，在玻璃球外面覆蓋一層多孔活性材料，如硅膠、氧化鋁、離子交換劑、分子篩、聚酸胺等。 這類固定相的多孔層厚度小、孔淺，相對死體積小，出峰迅速、柱效亦高；顆粒較大，滲透性好，裝柱容易，梯度淋洗時能迅速達(dá)平衡，較適合做常規(guī)分析。 來自 中國最大的資料庫下載 2．全多孔型固定相 它由直徑為 10nm的 硅膠微粒凝聚而成 。也可由氧化鋁微粒凝聚成全多孔型固定相，如國外的 Lichrosorb ALOXT。特別適合復(fù)雜混合物分離及痕量分析 . 來自 中國最大的資料庫下載 來自 中國最大的資料庫下載 （二）流動相 由于高效液相色譜中流動相是液體 ， 它對組分有親和力 ，并參與固定相對組分的競爭 。 對流動相溶劑的要求是： （ 1） 溶劑對于待測樣品 ， 必須具有合適的極性和良好的選擇性 。對于紫外吸收檢測器，應(yīng)注意選用檢測器波長比溶劑的紫外 截止波長 要長。表 202列出了一些常用溶劑的紫外截止波長。 來自 中國最大的資料庫下載 來自 中國最大的資料庫下載 （ 3） 高純度 。 不純的溶劑會引起基線不穩(wěn) ，或產(chǎn)生 “ 偽峰 ” 。 （ 4） 化學(xué)穩(wěn)定性好 。 (5)低粘度 。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。 1． 分離原理 液液分配色譜的分離原理基本與液液萃取相同， 都是根據(jù)物質(zhì)在兩種互不相溶的液體中溶解度的不同，具有不同的分配系數(shù)。 來自 中國最大的資料庫下載 2固定相 由于液液色譜中流動相參與選擇競爭 ， 因此 ，對固定相選擇較簡單 。 例如 ， 最常用的強(qiáng)極性固定液 β， β′一氧二丙睛 ， 中等極性的 聚乙二醇 ， 非極性的 角鯊?fù)?等 。產(chǎn)生了 化學(xué)鍵合固定相 。它代替了固定液的機(jī)械涂漬，因此它的產(chǎn)生對液相色譜法迅速發(fā)展起著重大作用， 可以認(rèn)為它的出現(xiàn)是液相色譜法的一個重大突破 。據(jù)統(tǒng)計(jì)，約有 3/4以上的分離問題是在化學(xué)鍵合固定相上進(jìn)行的。 來自 中國最大的資料庫下載 3． 流動相 在液液色譜中為了避免固定液的流失。根據(jù)所使用的流動相和固定相的極性程度，將其分為 正相分配色譜 和 反相分配色譜 。其 流出順序是極性小的先流出，極性大的后流出 。它適用于非極性化合物的分離，其 流出順序與正相色譜恰好相反。 由于鍵合固定相非常穩(wěn)定 ， 在使用中不易流失 ， 適用于梯度淋洗 ， 特別適用于分離容量因子 k值范圍寬的樣品 。 1． 鍵合固定相類型 用來制備鍵合固定相的載體 ， 幾乎都用 硅膠 。 一般可分三類 （ 1） 疏水基團(tuán) 如不同鏈長的烷烴 （ C8和 C18。 （ 3） 離子交換基團(tuán) 如作為陰離子交換基團(tuán)的胺基 ， 季鍍鹽； 作為陽離子交換 基團(tuán)的磺酸等 . 來自 中國最大的資料庫下載 2． 鍵合固定相的制備 （ l） 硅酸酯 （ ≡ Si一 OR） 鍵合固定相 ,它是最先用于液相色譜的健合固定相 。 （ 2） ≡ Si－ C或 Si一 N共價(jià)鍵合固定相 制備反應(yīng)如下 來自 中國最大的資料庫下載 共價(jià)鍵健合固定相不易水解 ， 并且熱穩(wěn)定較硅酸酯好 。能在 70℃ 以下， PH=2～ 8范圍內(nèi)正常工作，應(yīng)用較廣泛 . 來自 中國最大的資料庫下載 3．反相健合相色譜法 此法的固定相是采用極性較小的鍵合固定相 ， 如硅膠一C18H3 硅膠一苯基等；流動相是采用極性較強(qiáng)的溶劑 ， 如甲醇十 、 乙睛一水 、 水和無機(jī)鹽的緩沖溶液等 。 反相鍵合相色譜法具有柱效高 ， 能獲得無拖尾色譜峰的優(yōu)點(diǎn) 。 這種理論把非極性的烷基鍵合相看作一層鍵合在硅膠表面上的十八烷基的 “ 分子毛 ” ， 這種 “ 分子毛 ” 有較強(qiáng)的流水特性 。 顯然 ， 兩種作用力之差 ，決定了分子在色譜中的保留行為 。 此時 ，組分的分配比 k值隨其極性的增加而增大 ，但隨流動相極性的增加而降低 。 來自 中國最大的資料庫下載 當(dāng)以薄殼型或全多孔微粒型硅膠為基質(zhì) ， 化學(xué)鍵合各種離子交換基團(tuán) ， 如一 SO3H 一 CH2NH － C00H、 一CH2N（ CH3） 等時 ， 就形成了離子性鍵合相色譜的固定相；流動相一般采用緩沖溶液 。 以上討論了各種類型化學(xué)鍵合相色譜法，歸納鍵合相色譜的最大優(yōu)點(diǎn)是：通過改變流動相的組成和種類，可有效地分離各種類型化合物（非極性、極性和離子型）。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在高效液相色譜法中，約有 8O％的分離問題是用鍵合相色譜法解決。如何根據(jù)樣品極性種類來選擇化學(xué)鍵合的固定相，請參看表 203。 液固色譜實(shí)質(zhì)是根據(jù)物質(zhì)在固定相上的吸附作用不同來進(jìn)行分離的。 同時 ， 當(dāng)試樣分子 （ X） 被流動相帶入柱內(nèi) ， 只要它們在固定相有一定程度的保留就要取代數(shù)目相當(dāng)?shù)囊驯晃降牧鲃酉嗳軇┓钟?） 于是 ， 在固定相表面發(fā)生競爭吸附 : X + nSad = Xad + nS 來自 中國最大的資料庫下載 達(dá)平衡時 ,有 nadnadad SXSXK]][[]][[?其中 Kad為吸附平衡常數(shù) ，值大表示組分在吸附劑上保留強(qiáng)，難于洗脫。試樣中各組分據(jù)此得以分離。 來自 中國最大的資料庫下載 2．固定相 吸附色譜所用固定相多是一些吸附活性強(qiáng)弱不等的吸附劑 ， 如硅膠 、 氧化鋁 、 聚酸膠等 。 在高效液相色譜法中 ， 表面多孔型和全多孔型都可作吸附色譜中的固定相 ， 它們具有填料均勻 、 粒度小 。 但表面多孔型由于試樣容量較小 ， 目前最廣泛使用的還是 全多孔型微粒填料 。在吸附色譜中對極性大的試樣往往采用極性強(qiáng)的洗脫劑；對極性弱的試樣宜用極性弱的洗脫劑。 ε0越大，表示洗脫劑的極性越強(qiáng)。在硅膠吸附劑中 ε0值的順序相同，數(shù)值可換算（ ε0硅膠=0 來自 中國最大的資料庫下載 來自 中國最大的資料庫下載 (四）離子交換色譜法（ IEC） 此法是利用 離子交換原理和液相色譜技術(shù)的結(jié)合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法 。它不僅適用無機(jī)離子混合物的分離，亦可用于有機(jī)物的分離，例如