【正文】 需要結(jié)合病情綜合分析。對傳染病來說，幾乎沒有不能用血清學試驗確診的疾病。在動物疫病的群體檢疫、疫苗免疫效果監(jiān)測和流行病學調(diào)查中，也已廣泛應用了血清學試驗以檢測抗原或抗體。此外，血清學試驗也用于基因分離，克隆篩選，表達產(chǎn)物的定性、定量分析和純化等，已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物學研究的重要手段。經(jīng)過單向嗜酸性祖細胞（cfueo）階段，在有關(guān)生成素誘導下逐步分化，成熟為嗜酸性粒細胞，在正常人外周血中少見，%.嗜酸性粒細胞有微弱的吞噬作用，但基本是無殺菌力，它的主要作用是抑制嗜石破天驚生粒細胞和肥大細胞合成與釋放其活性物質(zhì)，吞噬其釋出顆粒，并分泌組胺酶發(fā)破壞組胺，從而起到限制過敏反應的作用。嗜酸性粒細胞的趨化因子至少有六大來源：①從肥大細胞或嗜堿性粒細胞而來的組胺（histamine）； ②由補體而來的c3ac5a、c567，其中以c5a最為重要； ③從致敏淋巴細胞而來的嗜酸性細胞趨化因子； ④從寄生蟲而來的嗜酸性粒細胞趨化因子；⑤從某些細菌而的嗜酸性粒細胞趨化因子（如乙型溶血性鏈球菌等）； ⑥從腫瘤細胞而來的嗜酸性粒細胞趨化因子。由于嗜酸性粒細胞在外周血中百分率很低，故經(jīng)白細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞百分率換算而來的絕對值誤差較大，因此，在臨床上需在了解嗜酸性粒細胞的變化時，應采用直接計數(shù)法。它既可以發(fā)生在體內(nèi)，也可以發(fā)生在體外。體外的抗原抗體結(jié)合反應主要用于檢測抗原或抗體，用于免疫學診斷。血清學試驗具有高度的特異性，廣泛應用于微生物的鑒定、傳染病及寄生蟲病的診斷和監(jiān)測。②炸面包卷樣紅細胞：紅細胞膜呈明顯的內(nèi)外兩圈、四周肥厚、形似炸面包卷。④膜缺損紅細胞：紅細胞膜不完整，部分血紅蛋白（hb）丟失。⑥小紅細胞：胞體小，外膜增厚，折光增強。黃鋒先等關(guān)于畸形紅細胞分類 ①面包圈樣紅細胞。③紅細胞膜呈顆粒樣、串珠樣。⑤殘碎紅細胞。⑦棘狀樣紅細胞。其他如紅細胞呈鋸齒型、固縮型、大小一致的均稱均一型。此型多屬于非腎小球性血尿。畸形紅細胞占80%以上為腎小球性血尿；畸形紅細胞《20%，均一型紅細胞》80%以上為非腎小球性血尿；畸形紅細胞》20%、《80%，為混合型血尿。腎小球性血尿，絕大多數(shù)為畸形紅細胞，占80%以上；非腎小球性血尿絕大多數(shù)為均一型紅細胞，占80%以上；以及以畸形紅細胞為主（》50%）的混合型和以均一型紅細胞為主（》50%）的混合型?；渭t細胞的形成：一般認為，紅細胞通過腎小球基底膜時受損和經(jīng)腎小球毛細血管壁漏出時受擠壓而變形，同時還與尿滲透壓、ph等因素有關(guān)。采用顯微鏡觀察檢查尿內(nèi)紅細胞形態(tài)的變化，對診斷腎小球疾病引起的血尿和鑒別診斷是有一定價值和臨床意義的。2012年醫(yī)學檢驗考試質(zhì)量管理與控制輔導：如何制定允許總誤差（1）tonks于1963年從理論上研究此問題，提出根據(jù)參考值與參考值范圍而設定，其公式是：允許總誤差（%）=（1/4）［（參考值上界參考值下界）/參考值均值］100%（2）目前國際上常推薦根據(jù)生物學變異制定不精密度標準。生物學變異可用來導出臨床實驗室檢測項目的不精密度、不準確度和總誤差的分析質(zhì)量。也可用te=+bias表示（95%允許誤差限）。2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎(chǔ)輔導：精液的精子活動率檢測【正常參考值】正常精子活力一般在ⅲ級（活動較好，有中速運動，但波形運動的較多）以上，射精后1小時內(nèi)有ⅲ級以上活動能力的精于應》.【臨床意義】如果0級（死精子，無活動能力，加溫后仍不活動）和ⅰ級（活動不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動，運動遲緩），常為男性不育癥的重要原因之一。這種提高低能分子達到活化狀態(tài)的能量，稱為活化能。酶能顯著地降低活化能，故能表現(xiàn)為高度的催化效率。二、中間復合物學說目前一般認為，酶催化某一反應時，首先在酶的活性中心與底物結(jié)合生成酶－底物復合物，此復合物再進行分解而釋放出酶，同時生成一種或數(shù)種產(chǎn)物，此過程可用下式表示： es的形成，改變了原來反應的途徑，可使底物的活化能大大降低，從而使反應加速。底物的結(jié)合可誘導酶分子構(gòu)象發(fā)生變化，比底物大得多的酶分子的三、四級結(jié)構(gòu)的變化，也可對底物產(chǎn)生張力作用，使底物扭曲，促進es進入活性狀態(tài)。某些酶能與底物形成極不穩(wěn)定的、共價結(jié)合的es復合物，這些復合物比無酶存在時更容易進行化學反應。變性蛋白質(zhì)只有空間構(gòu)象的破壞，一般認為蛋白質(zhì)變性本質(zhì)是次級鍵，二硫鍵的破壞，并不涉及一級結(jié)構(gòu)的變化。引起蛋白質(zhì)變性的原因可分為物理和化學因素兩類。在臨床醫(yī)學上，變性因素常被應用于消毒及滅菌。變性并非是不可逆的變化，當變性程度較輕時，如去除變性因素，有的蛋白質(zhì)仍能恢復或部分恢復其原來的構(gòu)象及功能，變性的可逆變化稱為復性。在β巰基乙醇和8m尿素作用下，發(fā)生變性，失去生物學活性，變性后如經(jīng)過透析去除尿素，β巰基乙醇，并設法使疏基氧化成二硫鍵，酶蛋白又可恢復其原來的構(gòu)象，生物學活性也幾乎全部恢復，此稱變性核糖核酸酶的復性。2012年醫(yī)學檢驗考試血液檢驗輔導：異型淋巴細胞在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒感染或過敏原則刺激下，可使淋巴細胞增生，并出現(xiàn)某些形態(tài)學變化，稱為異型淋巴細胞。胞體比正常淋巴細胞稍大，多為圓形、橢圓形或不規(guī)則形。染色質(zhì)粗糙，呈粗網(wǎng)狀或小塊狀，排列不規(guī)則。ⅱ型（幼稚型）：胞體較大，核圓形或卵圓形。ⅲ型（不規(guī)則型）：胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)足。胞質(zhì)量豐富，染色淡藍或灰藍色，有透明感，邊緣處著色較深藍色。2012年醫(yī)學檢驗考試生化檢驗輔導：胎兒血型的預測羊水中存在abh（o）血型物質(zhì)，故可在妊娠期預測胎兒的血型，以便對母體胎兒血型不合者進行圍生期監(jiān)護、治療和對新生兒的作好搶救準備。馮分作用10min后，便血型物質(zhì)將抗體中和完全，再于各管加入相對應的2%標準a型，b型，充分混勻。本試驗最關(guān)鍵的部分是要選擇好抗血清的最適稀釋度。：11：256倍比稀釋后，將2%a，b，置室溫1小時后觀察結(jié)果，以出現(xiàn)4+凝塊的最高稀釋度定為最適稀釋度。二、abh（o）血型酶的測定羊水a(chǎn)bh血型物質(zhì)的測定，無法預測非分泌型胎兒的血型。當有糖供體、二價錳離子與o型紅細胞共同孵育時，羊水中的轉(zhuǎn)移酶可在紅細胞膜上合億a或b物質(zhì)，利用血型測定的方法可檢測埋分泌型胎兒的血型。2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎(chǔ)知識輔導：精液的男性生育力指數(shù)測定【計算公式】i=m（nv）/（a106）式中i為男性生育力指數(shù)；m為活動精子百分率；n為每毫升的精子數(shù)；v為精子運動的速度；a為畸形精子的百分率。，表明有不同程度的生育障礙。其中對病毒抗體的檢測是最常規(guī)使用的方法，這不但是由于這類檢測特異性、敏感性較高，方法相對簡便、成熟，更重要的原因是hiv抗體在病毒感染后除早期短暫的“窗口期”外的整個生命期間長期穩(wěn)定地存在并可被檢測到。2012年醫(yī)學檢驗考試血液檢驗復習輔導：hiv抗體確認實驗免疫印跡試驗（wb）、條帶免疫試驗（liatekhivⅲ）、放射免疫沉淀試驗（ripa）及免疫熒光試驗（ifa）。確認試驗流程：有hiv1/2混合型和單一的hiv1或hiv2型。如果出現(xiàn)hiv2型的特異性指示條帶，需用hiv2型免疫印跡試劑再做hiv2的抗體確認試驗，呈陰性反應，報告hiv2抗體陰性；呈陽性反應則報告hiv2抗體血清學陽性，并將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析，wb的敏感性一般不低于初篩實驗，但它的特異性很高，這主要是基于hiv不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測針對不同抗原成分的抗體，因而能夠用wb方法鑒別初篩實驗的準確性。（二）免疫熒光實驗（ifa）ifa法經(jīng)濟、簡便、快速，曾被fda推薦用于wb不確定樣品的診斷。2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎(chǔ)知識輔導：重視血常規(guī)的復檢工作目前血細胞分析儀己經(jīng)普及到縣醫(yī)院或衛(wèi)生院，這對提高血細胞常規(guī)的準確性和重復性，減輕工作人員勞動強度起促進作用。據(jù)我所知有的醫(yī)院有了血細胞分析儀，把人工操作的工具、試劑全丟棄，基本上不再復檢了。現(xiàn)就此問題談談個人看法。尤其是白細胞形態(tài)學分類與血細胞分析儀的白細胞分類有本質(zhì)上的不同，三分群僅僅是根據(jù)細胞大小來分而己，即使先進的五分類也與形態(tài)學也有很大差異，又如中性粒細胞毒性病變、變異淋巴細胞、瘧原蟲等臨床需要的指標無法顯示；有的幼稚細胞、有核紅細胞也不能區(qū)分；各參數(shù)之間有時還存在互相干擾。根據(jù)1987年我赴日本考察時，日本對三分群儀器白細胞分類是不收費的，而且每一例仍然需要涂片染色，在顯微鏡下重新分類后才能報告。最近日本名古屋大學醫(yī)學部附屬醫(yī)院報告，他們用sysmexxe2100（五分類）%.再次證明當前最先進血細胞分析儀也不能完全替代人工檢查。二、復檢內(nèi)涵尚待統(tǒng)一有人認為“復檢”就是要在鏡下重新進行白細胞分類計數(shù)而己，這是偏面的。因此血常規(guī)手工操作不能丟；2012年醫(yī)學檢驗考試臨檢基礎(chǔ)知識輔導：精液檢查的具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時）；備大口有蓋清潔干燥容器一個，以手淫方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標本離體時間；貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗室，并向檢驗員提供標本取出時間。見不動精子，須染色方可區(qū)分：不活動的精子、死精子、未成熟精子等。經(jīng)三次取樣化驗，結(jié)果仍然找不到精子方可確認無精子癥。人體含有27503300毫升血漿，約占血液總體積的55%.血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。將新鮮血液離心，使血細胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。2012年醫(yī)學檢驗考試免疫檢驗輔導：血漿的主要作用提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質(zhì)。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內(nèi)皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如seo3，硒等。離心機的種類很多，按照使用目的，可兩類，即制備型離心機和分析型離心機。兩類離心機由于用途不同，故其主要結(jié)構(gòu)也有差異。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉(zhuǎn)速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內(nèi)形狀不同的大小顆粒分步沉淀。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、dna和rna等生物樣品。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、cscl、cs2so4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。3）自成梯度等密度離心法。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合，離心開始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進行分離，所用的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過程中形成密度梯度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細胞、細胞器、病毒和生物大分子等。常用的離心機有多種類型，一般低速離心機的最高轉(zhuǎn)速不超過6000rpm，高速離心機在25000rpm以下，超速離心機的最高速度達30000rpm以上。通過逐步增加相對離心力，使一個非均相混合液內(nèi)形狀不同的大小顆粒分步沉淀。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進行離心，具體又可分為：1）速度區(qū)帶離心法。本法可分離各種細胞、病毒、染色體、脂蛋白、dna和rna等生物樣品。要求在離心前預先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、cscl、cs2so4等，待分離樣品一般鋪在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。3）自成梯度等密度離心法。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合，離心開始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的密度梯度，與此同時，可以帶動原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到達與其自身密度相等的梯度層里，即達到等密度的位置而獲得分離。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進行分離，所用的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過程中形成密度梯度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)帶。每抽血氣前，用2ml注射器抽取肝素稀釋液2ml，完全濕潤整個針管后棄去肝素液，殘留在針頭及針管頭部死腔內(nèi)的肝素液即可起到抗凝作用。二、采血方法的選擇成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首選橈動脈，次選股動脈小兒：首選用顳淺動脈或頭皮小動脈，嚴格消毒后，用肝素化的5號頭皮針連接2ml注射器，待動脈血流至注射器乳頭時，立即用小止血鉗分別夾住頭皮針塑料軟管首尾兩端（），然后拔出