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正文內(nèi)容

蛋白酶活性的測定-展示頁

2024-11-17 22:17本頁面
  

【正文】 后,%三氯醋酸溶液。取四支15ml具塞試管,分別標(biāo)上記號AA0、B1和B0。5%三氯醋酸(TCA)溶液。1%酪蛋白溶液:,加100ml微生物蛋白酶萃取液():,加100ml蒸餾水?dāng)嚢?0min,在4℃下離心分離后,將上層清夜置于冰箱中保存,使用前稀釋一定倍數(shù);②酪蛋白經(jīng)蛋白酶作用后,降解成相對分子質(zhì)量較小的肽和氨基酸,在反應(yīng)混合物中加入三氯醋酸溶液,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)和肽就沉淀下來,相對分子質(zhì)量較小的肽和氨基酸仍留在溶液中,溶解于三氯醋酸溶液中的肽的數(shù)量正比于酶的數(shù)量和反應(yīng)時間。二、實(shí)驗(yàn)原理蛋白酶在一定條件下不僅能夠水解蛋白質(zhì)中的肽鍵,也能夠水解酰胺鍵和酯鍵,因此可用蛋白質(zhì)或人工合成的酰胺及酯類化合物作為底物來測定蛋白酶的活力。掌握蛋白酶活力測定的方法。實(shí)驗(yàn)四 蛋白酶活力的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獾鞍酌富盍y定的原理;本實(shí)驗(yàn)選用酪蛋白為底物,測定微生物蛋白酶水解肽鍵的活力。在280nm波長下測定溶液吸光度的增加,就可計(jì)算酶的活力。
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