【正文】 中EV71陽性28份，%，CoxA16陽性24份，%，非EV、CoxA16其他腸道病毒陽性27例，%。與CoxA16相比，EV71更易導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，它可引發(fā)致死性腦病、腦出血甚至心肌炎猝死[6,7]。1985年前CoxA16是我國手足口病的主要病原體，但最近的研究結(jié)果顯示EV71在HFMD病原學(xué)中占有越來越重要的位置。已知引起手足口病的腸道病毒有20多種（型），其中以CoxA16和EV71最為常見。3討論手足口病是嚴(yán)重危害兒童健康的全球性疾病，世界大部分國家和地區(qū)均有此病流行的報道。 不同病情程度病例的病原學(xué)檢測結(jié)果133例病例中，輕型病例127例，EV71陽性24例，CoxA16陽性24例，非EV7CoxA16其他腸道病毒26例；重癥病例6例，EV71陽性4例，非EV7CoxA16其他腸道病毒1例。見表2。見表1。以DL2000marker作參照，有目的片段條帶出現(xiàn)即判為陽性。擴(kuò)增程序：60℃1min, 42℃10min, 50℃30min, 95℃15min；94℃30s, 52℃30s, 72℃1min,40個循環(huán)；72℃7min；4℃保存。 RTPCR 采用德國Qiangen公司的試劑盒，按照說明書配制。CoxA16S(上游):5,ATTGGTGCTCCCACTACAGC3， CoxA16A(下游):5,TCAGTGTTGGCAGCTGCAGG3,。引物核酸序列：腸道病毒通用引物PE2(上游)：5,TCCGGCCCCTAGATGCGGCTAATCC3， 腸道病毒通用引物PE1(下游)：5,ACACGGACACCCAAAGTAGTCGGTCC3,。 主要儀器和試劑儀器：AB2720擴(kuò)增儀、DYY6C型水平電泳儀、Gel Doc XR凝膠成像儀。1 材料與方法 材料 標(biāo)本來源選取2010年池州地區(qū)各大醫(yī)院臨床診斷為手足口病部分病例的咽拭子標(biāo)本保存于病毒保存液中，4℃冷鏈運(yùn)輸。目前國內(nèi)手足口病的病原體以柯薩奇病毒A組16性（CoxA16）和腸道病毒71型（EV71）為主[1]，兩者所致的手足口病在臨床上難以區(qū)別，但EV71感染除了引起手足口病外，還能夠引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎、急性弛緩性癱瘓等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的疾病[2]。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹等特征。結(jié)論EV71和 CoxA16是2010年池州地區(qū)手足口病的主要病原體，而EV71是引起手足口病重癥病例的主要類型。結(jié)果133例手足口病臨床診斷病例咽拭子中，檢測到腸道病毒陽性79份，EV71陽性28份，CoxA16陽性24份，EV71和 %%。第一篇：手足口病病原學(xué)分析手足口病病原學(xué)分析分析池州地區(qū)手足口病的流行病學(xué)和病原學(xué)特征，為手足口病防控提供科學(xué)依據(jù)。方法采集201003/201012池州市各地送檢的133例手足口病臨床診斷患者的咽拭子，應(yīng)用RTPCR技術(shù)檢測樣本中腸道病毒(EV)、腸道病毒71型（EV71）、柯薩奇病毒A組16型（CoxA16）。6例手足口病重癥病例中，EV71病毒感染病例4例。手足口?。╤andfootmonth disease,HFMD）是由多種腸道病毒（enterovirus，EV）引起的一種常見急性傳染病，多發(fā)于學(xué)齡前兒童，尤以3歲以下年齡組發(fā)病率最高。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種（型），均屬微小核糖核酸病毒科、人腸道病毒屬。為了解池州地區(qū)手足口病病原體的分布特征，探索相應(yīng)的防治策略和應(yīng)對措施，對2010年收集的133例臨床診斷疑似病例標(biāo)本采用分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行EV71和CoxA16病毒核酸檢測，為該地區(qū)手足口病的診斷、預(yù)防和控制措施的制定提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。70℃保存?zhèn)溆谩Ｔ噭旱聡鳴iangen公司的RNeasy Mini Kit(貨號74104）和One step RTPCR Kit(貨號210212)，引物由安徽省疾控中心提供。EV71S(上游)：5,GCAGCCCAAAAGAACTTCAC3， EV71A(下游):5,ATTTCAGCAGCTTGGAGTGC3,。 方法 核酸提取采用德國Qiangen公司的試劑盒，按照說明書操作，最終收集RNA模板50ul備用。反應(yīng)體系25ul,每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)置陰性對照和陽性對照。 擴(kuò)增產(chǎn)物檢測TBE緩沖液配制2%瓊脂糖凝膠，上樣后100V恒壓電泳40分鐘，用凝膠成像儀分析相應(yīng)PCR產(chǎn)物條帶，紫外燈下觀察特異性核酸條帶。2 結(jié)果 RTPCR核酸檢測結(jié)果133例臨床診斷病例標(biāo)本總腸道病毒陽性79例，%，其中EV71陽性28例，%；CoxA16陽性24例，%；非EV、CoxA16其他腸道病毒陽性27例，%.133例中，男性73例，總腸道病毒41例，%；女性60例，總腸道病毒38例，%。 臨床診斷病例年齡別腸道病毒陽性率133例中，最小年齡6個月，最大12歲，以1歲至4歲患兒為主。來自不同縣區(qū)病例的檢測結(jié)果見表3。見表4。1957年新西蘭首次報道，1958年加拿大Robinson和Rhodes首次從患者中分離出柯薩奇病毒[3]，1959年提出HFMD命名。我國自1980年開始有HFMD的報道[4]。2008年3月安徽阜陽發(fā)生較大規(guī)模的EV71感染暴發(fā)流行[5]，引起國內(nèi)外的高度關(guān)注。但EV71在不同時間和地區(qū)流行的臨床癥狀各異，與CoxA16難以區(qū)別，且CoxA16往往伴隨EV71流行[8]。從性別分布來看，男女比例為無差別。從縣區(qū)發(fā)表來看，石臺縣雖然地偏人稀、人口密度較低，但病例陽性率較高，這除與采樣技術(shù)和送檢要求等影響因素有關(guān)外，是否與所在地區(qū)的地理氣候和氣溫有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。由于手足口病至今仍無有效的疫苗和特異的治療手段，因此加強(qiáng)疫情監(jiān)測，及時掌握病原感染特征，早發(fā)現(xiàn)，早隔離，早治療是預(yù)防和控制本病流行的關(guān)鍵[11]。4參考