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tunel染色檢測細(xì)胞凋亡-展示頁

2024-10-06 02:09本頁面

　　

【正文】用二甲苯洗兩次，每次5min。％甲基綠（）：；。TdT酶反應(yīng)液：TdT酶32μl；TdT酶緩沖液 76μl，混勻，置于冰上備用。含2%H2O2的PBS緩沖液（）：H2O2 ；PBS緩沖液。(一)試劑配制磷酸緩沖液PBS（）：磷酸鈉鹽 50mM，NaCl 200mM?？沟馗咝恋奶禺愋钥贵w與脊椎動物甾體激素的交叉反應(yīng)不到1％，若此抗體的Fc部分通過蛋白酶水解的方法除去后，則可完全排除細(xì)胞Fc受體非特異性的吸附作用。毛地黃植物是地高辛的唯一來源。一、過氧化物酶標(biāo)記測定法原理：脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）11dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細(xì)胞雙鏈或單鏈DNA的3OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報(bào)告酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）的抗地高辛抗體結(jié)合。低分子量的DNA分離后，也可使用DNA聚合酶進(jìn)行缺口翻譯（nick translation），使低分子量的DNA標(biāo)記或染色，然后分析凋亡細(xì)胞。DNA雙鏈斷裂或只要一條鏈上出現(xiàn)缺口而產(chǎn)生的一系列DNA的3’OH末端可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸化酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3’末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測，這類方法一般稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）。和Mg178。TUNEL

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