【正文】 準確度 —— 方法學比對 實驗過程 1 每天選擇 8個臨床病人樣本，按 1到 8的順序編號。分 析濃度盡可能在報告的濃度范圍內均勻分布。 2 樣品應來自于許多病人，并且此病人的疾病對于被測組成的影 響應該是知道的，不要使用含有干擾此方法的組分或條件 (如溶血 ) 樣品。 ： 進行方法學對比實驗前，應該對系統(tǒng)進行初步評價（可參考 NCCLS EP10），并且對待評價方法進行精密度評價（參考相關標準） ,只有在以上評價完成并且達到相關標準后，才可進行對比實驗。 （ 3）同實驗樣品方法具有相同單位。比對方法應具有以下條件： （ 1）具有比實驗樣品方法更好的精密度。 ，其中包括校準程序和室內質控程序。 3 標準物濃度：因為標準物溶液加入體積不到 10%，為保證得到 不同濃度的回收樣本，標準物的濃度應該足夠高。 ?數(shù)據處理及結果報告 1 計算回收率：回收率 1 = 2可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差不大于 CLIA 88允許總誤差的 1/2 準確度 —— 回收實驗 注意事項： 1 加入體積：加入的標準液體積一般在樣本體積的 10%以內；并 且保證在加樣過程中的取樣準確度。 3 在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎樣本。 準確度 —— 回收實驗 ?實驗樣本的基本要求和制備方法 1 選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的 34份。 準確度 —— 回收實驗 回收實驗評估的基本原則 。 結果報告 可報告范圍低限：以方法性能標示的 CV值為可接受界值，由數(shù)據中選取 CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平做為可報告范圍低限。 數(shù)據統(tǒng)計：分別計算 AVE、 SD、 CV值。 可報告范圍 實驗過程 在一次運行中將低值樣本重復測定 10次，高值稀釋樣本重復測定 3次 。使用混合血清或 5%牛血清白蛋白生理鹽 水溶液或測定方法要求的稀釋液對高值待測樣本進行稀釋，使其 接近于線性范圍的上 1/3區(qū)域內，并記錄稀釋倍數(shù)。 制備方法 低值樣本：將待測樣本（含被分析物）用混合人血清（含被分析 物濃度水平較低）或 5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進行稀釋，產 生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為 5個濃度水 平，濃度水平間隔應小于線性范圍低限的 10%。 ，并在有效期內。 可報告范圍 可報告范圍評估的基本原則 。 ? 線性范圍（如為二階線性應包括臨床允許誤差）。 ? 被評價的方法或試劑名稱，批號。 ? 所有樣本應在一次運行中或幾次間隔很短的運行中隨機測定，最好在一天之內完成。在評價報告中應對所使用的稀釋液、添加物、溶劑等的材料來源加以注明。 ? 樣本的特殊處理：在無法得到適用的人血清時，需對樣本進行一些特殊處理以滿足實驗要求。對于等濃度間隔樣本，可用連續(xù)整數(shù)（如 5）代表連續(xù)樣本。每份樣本的濃度與體積單位應統(tǒng)一。 線性范圍 制備方法 ? 不同濃度水平的樣本可通過將高濃度樣本與低濃度樣本進行倍比稀釋得到，注意在進行液體吸取時應選擇精密度與準確性好的移液裝置。 ? 當對標稱線性參數(shù)進行驗證時，需在已知線性范圍內選擇 57個 濃度水平。 ? 建立一種定量測定方法的線性范圍時，需在預期測定范圍內選擇 711個濃度水平。 線性范圍 基本要求 ? 樣本基質應與臨床實驗樣本相似，但不可采用含有對測定方法 具有明確干擾作用物質的樣本，如溶血、脂血、黃疸或含有某些 特定藥物的樣本。 ?儀器的各項性能指標 （ 如精密度 ） 應與標稱值相符 ， 不存在明顯的攜帶污染等 。 結果報告： 以空白均值加兩倍標準差報告方法的檢測限。如果檢測系統(tǒng)對于低于零 的結果報告為零，應記錄初始響應值，如吸光度值等。 實驗方法 在一次運行中將空白樣本重復測定 20次。如空白樣本難以得到，可采用 5%牛血清或人血清 白蛋白溶液。L/O/G/O 體外診斷試劑分析性能評估指導原則 1. 檢測限 2. 線性范圍 3. 可報告范圍 4. 準確度（回收實驗） 5. 準確度（方法學比對） 6. 精密度 7. 干擾實驗 8. 穩(wěn)定性 9. 參考值（參考區(qū)間） 檢測限 檢測限評估的基本原則 ? 實驗人員應熟悉檢測方法與儀器操作； ? 采用合適的校準品 、 質控品并保持儀器處于正常狀態(tài)； ? 用于實驗的試劑應為同一批號 ， 且在有效期內 。 檢測限 檢測限的評估和數(shù)據處理方法 實驗材料和基本要求 空白樣本的制備：空白樣本應不含被測物，但其基質應與待測定 常規(guī)樣本相同。或根據測定項目選用相應基質的樣本，但應注意將 基質效應減至最小。 數(shù)據處理 數(shù)據記錄：將測定結果記錄于表格中。 數(shù)據統(tǒng)計：計算 20次結果的均值與標準差 SD。 線性范圍 線性范圍評估的基本原則 ?實驗操作人員應熟悉方法原理與操作 ， 能對樣本進行正確處理 ， 確保儀器工作狀態(tài)正常 ， 采用適當?shù)男势穼x器進行校準 。 ?應使用同批號試劑及校準品 。進行血清學標志物檢測時，理想的樣本為分析 物濃度接近預期測定上限的混合人血清。如將預期測定范圍加寬至 130%，在此范圍內選 擇更多的濃度水平，然后依據實驗結果逐漸減少數(shù)據點直至表現(xiàn) 出線性關系，可發(fā)現(xiàn)最寬的線性范圍。 ? 無論是建立或驗證線性范圍，所選用的濃度水平應可覆蓋整個預 期測定范圍并包括與臨床有關的重要評價濃度，如最小測定濃度 或線性范圍的最低限、不同的醫(yī)學決定水平、最大測定濃度或線 性范圍的高限等。制備時應將樣本完全混合并避免蒸發(fā)或其他使樣本變質的情況。 ? 如果高 /低濃度血清的值未知，可將每種血清編碼，用編碼代表每個血清的相對濃度。進行數(shù)據處理時可用樣本號代替 X值。這些處理過程包括稀釋、加入添加物或透析、熱處理等，無論進行何種處理均應以保持基質恒定為基本原則。 線性范圍 實驗過程 ? 建立線性范圍：需測定 911個濃度水平，每個濃度水平重復測定 34次 ? 驗證標稱線性參數(shù)：需測定 46個濃度水平，每個濃度水平重復測定 34次。 線性范圍 結果報告 線性范圍報告的具體格式不要求，但至少應包括以下幾方面： ? 進行線性評價的實驗室或生產廠家名稱。 ? 測定項目。 ? 如可能應標出測定項目的醫(yī)學決定水平及在此水平處的臨床允許誤差。 、質控品并保持儀器處于正常狀態(tài)。 可報告范圍 樣本要求 最好選擇與測定樣本具有相同基質的樣本。 高值樣本：選取含被測物的高值樣本，必要時可添加被分析物的 純品，并計算出理論值。至少選用三個 高濃度樣本，稀釋倍數(shù)應為方法性能標明的最大稀釋倍數(shù)、并適 當增加或減小稀釋比例。 數(shù)據處理 數(shù)據記錄：可根據附表進行數(shù)據記錄。對于可報告范圍高限還應計算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。 可報告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度