某公司pcr系列產(chǎn)品操作培訓(xùn)教材-展示頁
2025-03-10 12:57本頁面
【正文】 能量轉(zhuǎn)移 Taq 游離的探針，無熒光。 熒光基團(tuán) 熒光淬滅基團(tuán) 延伸時(shí)， Taq酶水解探針，使報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離而發(fā)出熒光，形成熒光信號(hào)。 擴(kuò)增曲線 四個(gè)階段 基線 閾值 Ct值 【 DNA】 0 ? 基線：擴(kuò)增曲線的水平部分 ? 基線（空白）信號(hào)的產(chǎn)生是由于測量的偶然誤差引起的 ? 默認(rèn)前 15個(gè)循環(huán)信號(hào)作為熒光本底信號(hào) 對(duì)數(shù)圖譜 線性圖譜 基線 閾值 Ct值 【 DNA】 0 ? 默認(rèn)閾值 =基線（背景）信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)偏差 10 ? 缺省設(shè)置： 315個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的 10倍 ? 手動(dòng)設(shè)置：大于熒光背景值和陰性對(duì)照的熒光最高值（進(jìn)入指數(shù)期的最初階段） 基線 閾值 Ct值 【 DNA】 0 ? Ct值： 每個(gè)樣本熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù) 基線 閾值 Ct值 【 DNA】 0 ? 每個(gè)樣本的 Ct值與該樣本的起始拷貝數(shù)（ 【 DNA】 0）的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，起始拷貝數(shù)越多， Ct值越小。 二、熒光 PCR系列產(chǎn)品操作細(xì)節(jié) HPV系列產(chǎn)品 ? 13種高危型 HPV檢測試劑盒 （ HPV1 1 3 3 33 4 5 5 5 55 68） 不分型 ? 14種高危型 HPV檢測試劑盒 （ HPV1 1 3 3 33 4 5 5 5 55 6 68） 對(duì) HPV1 18分型 樣本類型 采集方法 ?宮頸脫落細(xì)胞 用棉試子擦去宮頸口的分泌物，取宮頸環(huán)狀上皮與柱狀上皮轉(zhuǎn)化處宮頸脫落細(xì)胞。 ?男女性疣體標(biāo)本 既可以直接切下疣體組織放進(jìn)無菌玻璃管內(nèi)，又可以用一次性注射器把疣體刺破后再用棉拭子反復(fù)擦拭病灶處脫落細(xì)胞置入無菌玻璃管，密閉送檢。 （可能會(huì)抑制 PCR反應(yīng)） ?檢查前 48小時(shí)內(nèi)不要作陰道沖洗，不要用避孕藥膏等陰道內(nèi)用 藥物 。 （可能會(huì)造成假陽性） ?月經(jīng)期 不可采集標(biāo)本。 （可能會(huì)造成假陽性） 樣本保存 ?樣本采集后，如若不能馬上檢測，應(yīng)將樣本置于冰箱 4℃ 存放，并在一周時(shí)間內(nèi)檢測。 ?一周后檢測的標(biāo)本應(yīng)保存在 20 ℃ 。 應(yīng)注意防止爆蓋： 金屬浴可壓重物（冰盒、冰袋等） 水浴應(yīng)采用螺旋管蓋的離心管 確保離心管質(zhì)量合格 優(yōu)點(diǎn) ：簡單、快捷、方便。 ? 針對(duì)男性樣本或女性疣體樣本 （棉拭子樣本） ，先用細(xì)胞保存液 /生理鹽水洗脫，收集沉淀，而后與上述操作一致 DNA質(zhì)量要求 ?匹基、 達(dá)安等都是使用直接煮沸法提取的 DNA， 可直接使用 ?使用過柱法試劑盒，比如 QIAGENE提取的 DNA，也可以使用 PCR試劑配制 ?按樣本數(shù)加入所需溶液的對(duì)應(yīng)量，充分混勻
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