高二生物dna和蛋白質(zhì)技術(shù)-展示頁
2024-11-24 17:22本頁面
【正文】 實驗設(shè)計流程 制備雞血細(xì)胞液 (加檸檬酸鈉，靜置或離心 ) ↓ 破碎細(xì)胞，釋放 DNA(加蒸餾水，沿同一方向快速攪拌 ) ↓→過濾，除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等 溶解核內(nèi) DNA(加入 NaCl至 2 mol/L，同一方向緩慢攪拌 ) ↓ DNA析出 (加蒸餾水至 NaCl濃度為 mol/L，過濾，再溶解到 2 mol/L的 NaCl溶液中 ) ↓→除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì) DNA初步純化 (與等體積 95%冷卻酒精混合，析出白色絲狀物 ) ↓→除去核蛋白、 RNA、多糖等 DNA鑒定 (二苯胺，沸水浴，呈現(xiàn)藍(lán)色 ) NaCl 酒精 (體積分?jǐn)?shù)為 95%的冷酒精 ) DNA 不溶 蛋白質(zhì) NaCl溶液從 2 mol/L逐漸稀釋的過程中溶解度逐漸增大 某些蛋白質(zhì)可溶 【 例 1】 下表是關(guān)于“ DNA粗提取與鑒定”實驗中所使用的材料、操作及其作用的表述。 (2)復(fù)性：溫度下降到 ____℃ 左右時，兩種 ______通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈 DNA結(jié)合。 (4)DNA析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的 ________溶液 (體積分?jǐn)?shù)為 ____%) (5)DNA的鑒定： DNA溶解在 2 mol/L的 NaCl溶液中，加入 4 mL的 __________，沸水中加熱 5 min，溶液變成______。 (2)破碎細(xì)胞：雞血細(xì)胞，加蒸餾水，用玻璃棒攪拌，用______過濾，收集濾液。考綱要求展示 知識內(nèi)容 要求 蛋白質(zhì)的提取和分離 Ⅱ PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用 Ⅱ 知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 一、 DNA的粗提取與鑒定 ： DNA與雜質(zhì)的 ________不同， DNA與雜質(zhì)對酶、高溫、洗滌劑的 ________不同。 2. 實驗流程 (1)材料的選取：選用 DNA含量相對 ______的生物組織，如雞血、菜花、洋蔥等。 (3)去除雜質(zhì)：利用 DNA在不同濃度的 ______溶液中溶解度不同，通過控制該溶液的濃度去除雜質(zhì)。 二、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增 DNA片段 1. PCR原理 加熱 80～ 100℃ ，雙螺旋結(jié)構(gòu)解體 ,緩慢 ______，分離的 DNA鏈又重新結(jié)合 2. PCR反應(yīng)過程 (1)變性：當(dāng)溫度上升到 ____℃ 以上時，雙鏈 DNA解聚為單鏈。 (3)延伸：溫度上升到 ________℃ 時，溶液中的 4種脫氧核苷酸 (A、 T、 G、 C)在 ______酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的 DNA鏈。正確的是 ( )
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