【正文】 性淀粉，碘液，熱水，冰塊，試管，量筒，試管夾，溫度計(jì)，恒溫水浴鍋。 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)： 一、實(shí)驗(yàn)原理： 1． 淀粉遇碘后，形成藍(lán)色的復(fù)合物 ； 淀粉酶可以 催化 淀粉水解成麥芽糖，麥芽 糖遇碘后，不形成藍(lán)色的復(fù)合物。 4．質(zhì)壁分離時間不宜過長，否則會對植物細(xì)胞造成傷害甚至導(dǎo)致死亡。 2．滴加清水或蔗糖溶液時應(yīng)將玻片從載物臺上取下。 2．細(xì)胞壁的伸縮性比原生質(zhì)層的伸縮性小。 人口腔上皮細(xì)胞中的線粒體被染成藍(lán)綠色，有 短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形 等，而細(xì)胞質(zhì)接近無色。 ②用消毒牙簽在自己漱凈的 口腔內(nèi)側(cè)壁 上輕輕地刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在染液中涂抹幾下，蓋上蓋玻片 觀察線粒體 先用低倍鏡觀察，找到口腔上皮細(xì)胞，再換用高倍鏡觀察，觀察線粒體的形態(tài)和分布及染色情況。 觀察葉綠體 先在低倍鏡下找到葉片細(xì)胞后，在換用高倍鏡，觀察細(xì)胞內(nèi)葉綠體的形態(tài)和分布。 ②用鑷子夾取一片黑藻葉片，放入水滴中，蓋上蓋玻片。 3．試劑：新配制的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 1%的健那綠染液，蒸餾水。 三、材料用具 1．實(shí)驗(yàn)材料：新鮮的黑藻葉（或菠菜葉、蘚類的葉等），人的口腔上皮細(xì)胞。 健那綠染液是專一性染線粒體的 活 細(xì)胞染料 ，可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無色。 線粒體普遍分布于植物細(xì)胞和動物細(xì)胞中。 二、實(shí)驗(yàn)原理 葉肉細(xì)胞中的葉綠體，散布于細(xì)胞質(zhì)中，呈 綠色 、扁平的 橢球形或球形 。 六、結(jié)論 DNA主要分布在 細(xì)胞核 內(nèi)， RNA大部分存在于 細(xì)胞質(zhì) 中。 觀察 ①用低倍鏡觀 察：選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至 __視野中央 __，將物像調(diào)節(jié)清晰； ②換用高倍鏡觀察：調(diào)節(jié) ___細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 ___，觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。 沖洗涂片 用蒸餾水的 __緩水流 __沖洗載玻片 10秒，目的是為了洗去上一步滴加的 ___鹽酸 ___，便于下一步染色。 四、方法步驟及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 取口腔上皮細(xì)胞制片 ①在潔凈的載玻片上，滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %__的 ___NaCl_ 溶液； ②用消毒牙簽在自己漱凈的 __口腔內(nèi)側(cè)壁 _上輕輕地刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在上述載玻片上的液滴中涂抹幾下； ③點(diǎn)燃酒精燈，將涂有 __口腔上皮細(xì)胞 ___的載玻片烘干。 三、材料用具 1．實(shí)驗(yàn)材料：人的口腔上皮細(xì)胞（或洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞） 2．儀器：燒杯， 溫度計(jì)，滴管，消毒牙簽，載玻片，蓋玻片，火柴，酒精燈，鑷子，吸水紙，顯微鏡，恒溫水浴鍋等。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示 DNA和RNA在細(xì)胞的分布。 二、 實(shí)驗(yàn)原理 DNA主要分布在 細(xì)胞核 內(nèi)， RNA大部分存在于 細(xì)胞質(zhì) 中。 4．鑒定前應(yīng)預(yù)留部分樣液做對照。 2．雙縮脲試劑的 A液和 B 液要先后加入，造成堿性環(huán)境，使蛋白質(zhì)與形成紫色絡(luò)合物，否則 Cu2+會先生成 Cu（ OH） 2沉淀，把紫色遮蔽。 操作流程 注意事項(xiàng) 1．取材：若用黃豆，必須提前浸泡 12d。 試劑 雙縮脲試劑 A：質(zhì)量濃度為 。 蛋 白 質(zhì) 的 鑒 定 材料要求 最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織（或器官），顏色宜淺。 2．切片：刀口向內(nèi)，均勻，快速，滑行，用臂力，切薄。 操作流程 注意事項(xiàng) 1．取材：富含脂肪，以花生種子為最好。實(shí)驗(yàn)前需浸泡 34h（浸泡時間過長，組織太軟，切下的薄片不易成形；浸泡時間太短，不易切成片）。 5．鑒定前應(yīng)預(yù)留一部分樣液，以便于實(shí)驗(yàn)后做對比。 3．鑒定時要隔水加熱，直接加熱將造成溫度過高，致使 Cu（ OH） 2分解為黑色的 CuO，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察產(chǎn)生干擾。 ⑵ 甲液和乙液要混合均勻后使用，不可分別加入組織樣液，因?yàn)閺?qiáng)堿會使單糖分裂產(chǎn)生多種產(chǎn)物，或形成雙縮脲試劑與蛋白質(zhì) 反應(yīng)，影響對反應(yīng)顏色觀察。 3．鑒定 注意事項(xiàng) 1．取材：糖高色淺。 乙液：質(zhì)量濃度為 溶 液。 3 還 原 糖 的 鑒 定 材料要求 糖高色淺。 脂肪可以被蘇丹 III 染液染成橘黃色（或被蘇丹 IV染液染成紅色）。 生物組織中還原糖、脂肪 、 蛋白質(zhì)的鑒定 實(shí)驗(yàn)原理 某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。 高倍鏡觀察 1． 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，換成高倍鏡（ 40）。 調(diào)焦 一只眼向目鏡內(nèi)看，同時逆時針方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩上升直到看清物像為止。 觀察 1．把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺上，用壓片夾壓住，標(biāo)本要正對通光孔的中心。轉(zhuǎn)動反光鏡，使光線 通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。 2．把一個較大的光圈對準(zhǔn)通光孔。安裝好目鏡和物鏡。 擬核 細(xì)胞壁和 細(xì)胞 膜 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核 2 練習(xí)使用顯微鏡 取鏡和安放 1． 一 手握住鏡臂， 一 手托住鏡座。 2．你所觀察到的細(xì)胞都有相似的基本結(jié)構(gòu)： 、 和 。 用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，然后緩緩地放下，蓋在要觀察的材料上，這樣才能避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡而影響觀察。 用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明薄膜 ──內(nèi)表皮。觀察并只能用 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 調(diào)焦。 3．轉(zhuǎn)動 轉(zhuǎn)換器 ，換成 高倍鏡 。 2．低倍鏡觀察。 三、方法步驟 （一）觀察永久裝片： 1．對光。 二、材料用具 1．材料：高等植物細(xì)胞（如洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，葉的保衛(wèi)細(xì)胞），動物細(xì)胞（如動物細(xì)胞有絲分裂永久裝片，人口腔上皮細(xì)胞，魚的紅細(xì)胞或蛙的皮膚上皮細(xì)胞）等。 1 必修 1 分子與細(xì)胞 使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞 一、目的要求 1．使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞，比較不同細(xì)胞的異同點(diǎn)。 2．運(yùn)用制作臨時裝片的方法。 2．用具：顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，滴管，吸水紙。 轉(zhuǎn)動 反光鏡 使視野明亮。放置裝片，在 低倍鏡 下觀察清楚后，把要放大觀 察的物像移至視野 中央 。 4．高倍鏡觀察。 （二）再制備并觀察臨時裝片。把撕下的內(nèi)表皮浸入載玻片上的水滴中，用鑷子把它展平。 四、繪圖 （用鉛筆繪制你所觀察到高倍鏡下的一個完整細(xì)胞，并注明各細(xì)胞結(jié)構(gòu)的名稱） 洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮 細(xì)胞 /人口腔上皮細(xì)胞 五、討論 1．高倍鏡比低倍鏡視野 （大、?。? （明亮、暗）。 3．比較 P8“大腸桿菌結(jié)構(gòu)模式圖”與你所觀察到的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何最大的區(qū)別？ 〖答〗大腸桿菌沒有成形的細(xì)胞核，無核膜，細(xì)胞外有鞭毛。 2．把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺距邊緣 7cm 左右處，略偏左。 對光 1．轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔（物鏡前端與載物臺要保持 2cm 距離 ） 。一只眼注視目鏡內(nèi)，另一只眼睜開。通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。 2．轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止（此時眼睛一定要看著物鏡）。再略微轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，使看到的物像更加清晰。 2． 調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直至物像清晰為止。 糖中的還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖），與斐林（ Fehling）試劑（新制 Cu（ OH） 2）發(fā)生作用，可以生 成磚紅色沉淀（ Cu2O）。 蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)（生成紫色絡(luò)合物）。（不宜選用雙子葉植物的葉子，因光合作用的產(chǎn)物葡萄糖形成后合成淀粉，暫時儲存在葉內(nèi)；不宜選用植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料，因葉片中的葉綠素顏色較深，會對鑒定時的顏色反應(yīng)起掩蓋作用，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯） 試劑 斐林試劑 甲液：質(zhì)量濃度為 。 操作流程 1．制備組織樣液 蘋果或梨洗凈、去皮、切塊 → 研磨（ SiO2 少許， 5mLH2O） → 過濾（一層紗布） → 收集濾液 2．制備斐林試劑：向 2mL 甲液中滴加 45 滴乙液，充分混勻。 2．斐林試劑配制 ⑴ 現(xiàn)配現(xiàn)用： ① 生成的 Cu（ OH） 2不穩(wěn)定，久置會分解為 CuO和 H2O； ② 生成的 Cu（ OH）2不 溶于水，剛配制時為懸濁液有利于反應(yīng)的進(jìn)行， 久置會 沉淀。 ⑶ 乙液不可過量，若過量， Cu2+的藍(lán)色會遮蔽反應(yīng)產(chǎn)生的磚紅色。 4．試管口切勿對著人，以免溶液沸騰噴出試管傷人。 脂 肪 的 鑒 定 材料要求 富含脂肪的種子，以花生種子為最好。 試劑 蘇丹 III 染液（染色 23min，反應(yīng)呈橘黃 色）或蘇丹 IV染液（染色 1min，反應(yīng)呈紅色），組織樣液 2mL+斐林試劑 2mL 振蕩混勻 呈藍(lán)色 水浴，煮沸 2min，觀察顏色變化 藍(lán)色 → 棕色 → 磚紅色沉淀 4 體積分?jǐn)?shù)為 50%的酒精溶液，蒸餾水。注意浸泡時間。 3．染色、漂洗、觀察時間不可過長，否則脂肪溶解于酒精，影響實(shí)驗(yàn)觀察。植物材料常用的是大豆種子，動物材料常用的是雞蛋（卵白）。 雙縮脲試劑 B：質(zhì)量濃度為。若用蛋清作實(shí)驗(yàn)材料，必須稀釋，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管，不易洗刷。 3． B 液不可過量，否則的藍(lán)色會遮蓋反應(yīng)生成的紫色。 制備實(shí)驗(yàn)材料：花生種子 浸泡34h 徒手切片 取最薄的一片移至載玻片中央 染色 ： 23 滴蘇丹 III（或蘇丹 IV）， 23min（蘇丹 IV 1min） 漂洗：吸取剩余染液，并滴 12 滴 50%酒精，去浮色 制片：吸取酒精，滴蒸餾水 12 滴，蓋上蓋玻片 觀察：低倍鏡下找到最薄處，改用高倍鏡觀察 組織樣液 2mL+雙縮脲 試劑 A 1mL 振蕩 觀察 無顏色變化 雙縮脲試劑 B 4 滴，振蕩觀察 紫色 5 觀察 DNA 和 RNA 在細(xì)胞中的分布 一、目的要求 初步掌握觀察 DNA和 RNA在細(xì)胞中分布的方法。 甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對 DNA和 RNA的親和力不同，甲基綠使 _DNA_呈 _綠 色，吡羅紅使 _RNA_呈 _紅 色。 鹽酸能改變 細(xì)胞膜 的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時使染色質(zhì)中的 _DNA_ 和 蛋白質(zhì) 分離，有利于 _DNA_與染色劑結(jié)合。 3．試劑：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 %的 NaCl溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的鹽酸，吡羅紅甲基綠染色劑，蒸餾水。 水解 ①在小燒杯 中加入 30ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%的 __鹽酸 ___，將烘干的載玻片放入小燒杯中； ②在大燒杯中加入 _30_℃ 的溫水； ③ 將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫 5 min。 染色 ①用吸水紙吸去載玻片上的水分； ②將吡羅紅甲基綠染色劑滴 2滴在載玻片上，染色 5 min； 【注意事項(xiàng)】本實(shí)驗(yàn)兩種染色劑不是單獨(dú)使用，而是混合后使用！ ③吸去多余染色劑，蓋上蓋玻片。 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 細(xì)胞核被染成綠色，細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。 七、思考 ，除了細(xì)胞核，細(xì)胞中其他部位還有 DNA存在嗎？（如動物細(xì)胞的線粒體） 6 ，如果將人口腔上表皮細(xì)胞換為原核細(xì)胞，你會觀察到什么樣的現(xiàn)象 ?為什么？ ？若有，有什么聯(lián)系？（選做） 兩種核酸的比較 簡稱 DNA RNA 中文名稱 基本組成單位 五碳糖 含氮堿基 無機(jī)酸 存在部位 功能 用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體 一、目的要求 使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)和分布。可以在高倍鏡下觀察它的形態(tài)和分布。線粒體的形態(tài)多樣，有 短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形 等。線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時，通過染色，可以在高倍鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布。 2．儀器：滴管，鑷子，消毒牙簽，載玻片，蓋玻片，吸水紙，顯微鏡等。 四、方法步驟及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 制作黑藻葉片臨時裝片 ①在潔凈的載玻片中央滴一滴清水。 【注 意事項(xiàng)】臨時裝片中的葉片不能放干了，要隨時保持有水狀態(tài)。 制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時裝片 ①在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液。 7 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論 黑藻葉片細(xì)胞中葉綠體散布于細(xì)胞質(zhì)中， 呈 綠色 、扁平的 橢球形或球 形 。 觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原 實(shí)驗(yàn)原理 1．滲透作用。 方法步驟 制作臨時裝片→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察→使樣本浸浴在 →低倍鏡觀察→高倍鏡觀察（可以觀察到質(zhì)壁分離現(xiàn)象）→使樣本浸浴在清水中中→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察（可以觀察到質(zhì)壁分離復(fù)原的現(xiàn)象） 注意事項(xiàng) 1．取材：活、紫、薄、液泡勿破。 3．使用溶液濃度要適當(dāng)，對細(xì)胞無害，也不會迅速被細(xì)胞吸收。 結(jié)論 外界溶液濃度 細(xì)胞液濃度 細(xì)胞滲透失水 外界溶液濃度 細(xì)胞液濃度 細(xì)胞滲透吸水 影響酶活性的條件（參考） 提出問題： 細(xì)胞都生活在一定的環(huán)境中，環(huán)境條件（如溫度、 pH）的改變會不會影響酶的活性？ 作出假設(shè)： 溫度 /pH 的改變 會 （會、不會）影響