吸光光度法ppt課件-展示頁
2025-05-21 02:34本頁面
【正文】 部吸收全部吸收物質(zhì)呈現(xiàn) 顏色物質(zhì)呈現(xiàn)無色全部不吸收物質(zhì)呈現(xiàn)黑色透過光透過光透過光透過光 + 吸收光吸收光 = 復(fù)合光復(fù)合光互補(bǔ)光互補(bǔ)光二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理9KMnO4的顏色及吸收光譜二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理10 （ 2）不同濃度的同一物質(zhì)吸收曲線形狀相似 , λmax 不變 。4方法原理方法原理濃度濃度 ， 吸收光程度吸收光程度 ，呈現(xiàn)顏色，呈現(xiàn)顏色 。劉 海 燕吸光光度法吸光光度法光分析法原子吸收法 紅外法原子發(fā)射法 核磁法熒光法紫外可見法分子光譜原子光譜光分析方法光分析方法2一一 . 概述概述1. 方法原理 2. 方法分類和比較 3. 方法評價二二 .吸光光度法原理吸光光度法原理1. 物質(zhì)對光的選擇性吸收2. 光的吸收定律(1) LambertBeer定律 (2) 吸光度光度法(3) 偏離光吸收定律的原因三三 . 儀器和方法儀器和方法 四四 . 顯色反應(yīng)和顯色條件的選擇顯色反應(yīng)和顯色條件的選擇五五 .測定條件的選擇測定條件的選擇六六 .具體應(yīng)用具體應(yīng)用 3一一 . 概述概述陽光棱鏡連續(xù)光譜物質(zhì)不連續(xù)光譜吸光光度法 :基于 物質(zhì)對光的選擇性吸收 而建立的分析方法由兩種或兩種以上波長的光所組成復(fù)合光分類分類 ：吸光光度分析法根據(jù)物質(zhì)所吸收光的：吸光光度分析法根據(jù)物質(zhì)所吸收光的波長范圍不同，分為紫外、可見及紅外分光波長范圍不同，分為紫外、可見及紅外分光光度法。光度法。通過比較顏色深淺，測定物質(zhì)的濃度通過比較顏色深淺，測定物質(zhì)的濃度方法分類和比較方法分類和比較105 ~ 106 mol?L1 105 ~ 108 mol?L1比色分析法比色分析法 分光光度法分光光度法測定下限測定下限相對誤差相對誤差 5% ~ 10% 2% ~ 5%適用于分析半微量和微量的物質(zhì)適用于分析半微量和微量的物質(zhì)深深一一 . 概述概述5方法的評價方法的評價適用面廣快速、 簡便分析有色、無色、淺色物溶液狀態(tài)、均質(zhì)固態(tài)樣品靈敏度高： 濃度下限達(dá)濃度下限達(dá) 105~108 mol而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。（ 1）同一物質(zhì)對不同波長光的吸收程度不同，吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長 λmax。成正比。 注意注意 :（ 1） 物質(zhì)不吸光， I=Io ， A=0 物質(zhì)吸收部分光， I＜ Io， A＞ 0（ 2） A具有加和性， A總 =A1+A2+…… +A n（ 3）入射光的 λ： 可見光 , 紫外光 , 紅外光（ 4）光吸收定律的應(yīng)用條件 稀溶液稀溶液 入射光為單色光入射光為單色光二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理14（ 5）也可以用透射光強(qiáng)度（透射率 T% ） 表示T %的含義：物質(zhì)不吸收光 I=Io ， T% =100%物質(zhì)吸收部分光， I＜ Io ， T% ＜ 100%物質(zhì)吸收光 ， T% ， 物質(zhì)的濃度 。cm L/ mol 在溫度和波長等條件一定時， ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；可做 定型鑒定參數(shù)（ 3）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的 ε值是不同的。 摩爾吸收系數(shù) ε的討論二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理17（ 4）可作為 定性鑒定的參數(shù) ；（ 5） 物質(zhì)的吸光能力的度量 εmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。（ 6） ε在數(shù)值上等于濃度為 1 mol 二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理18例例 ：： 已知含 [Fe2+]=500μg/L的溶液，當(dāng)用鄰二氮雜菲為顯色劑測定鐵時，用 2cm比色皿，在波長508nm處測得吸光度 A為 。解：解：二二 . 吸光光度法的基本原理吸光光度法的基本原理19 物質(zhì)對光的選擇性吸收物質(zhì)對光的選擇性吸收 光吸收定律光吸收定律 Lambert Beer定律定律 ———— 光吸收定律光吸收定律 稀溶液稀溶液 入射光為單色光入射光為單色光A=abc = ?cb=Kcb20步驟步驟配制一組濃度系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液（ ci）儀器測量 一組相應(yīng)的吸光度值（ Ai）制圖（ ci 為 橫坐標(biāo)， Ai 為縱坐標(biāo)） 工作曲線(1)(2) 配制樣品儀器測量相同條件Axcx查圖得出 cxAc A與與 C偏離線性偏離線性現(xiàn)有儀器無法獲得純
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