蛋白質(zhì)氨基酸ppt課件-展示頁
2025-05-12 06:15本頁面
【正文】 第三節(jié) 多種氨基酸的分離和測(cè)定 第四節(jié) 味精純度的測(cè)定方法 第一節(jié) 蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 一 、 蛋白質(zhì)概況 蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物 ， 分子量很大 。主要由 C、 H、 O、 N、 S五種元素組成 。 樣品中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 ， 主要 （ 也是最常用的 ） 用凱氏定氮法測(cè)定總氮量 ， 然后乘一個(gè)蛋白質(zhì)換算系數(shù) 。 具體測(cè)定方法 （ 一 ） 凱氏定氮法 —— 最常用的 ， 國內(nèi)外應(yīng)用普遍 （ GB/— 2022 第一法 ） 。 于 1883年提出，現(xiàn)發(fā)展為常量、微量、自動(dòng)定氮儀法及改良凱氏法。 = N = 蛋白質(zhì)含量 ? ? 丹麥分析化學(xué)家。 1873年在哥本哈根大學(xué)畢業(yè)后 ,做過農(nóng)業(yè)中學(xué)的教師。他是丹麥皇家科學(xué)院院士 ,1884年哥本哈根大學(xué)授予他名譽(yù)博士學(xué)位。 1883年發(fā)明測(cè)定有機(jī)化合物中氮含量的方法 :他將一定質(zhì)量的試樣與硫酸作用 ,使試樣中的氮全部轉(zhuǎn)變?yōu)榱蛩徜@ ,然后往硫酸銨溶液中加入堿 ,再將生成的氨蒸餾到一定體積的標(biāo)準(zhǔn)酸溶液中 ,再滴定過量的酸 ,就能測(cè)出試樣的含氮量。后人稱此法為克氏定氮法。 常量凱氏定氮法 1. 原理 樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化 ， 使蛋白質(zhì)分解 ， 其中碳和氫被氧化為二氧化碳和水逸出 ，而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨與硫酸結(jié)合成硫酸銨 。 ① 用 H3BO3吸收后再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定 。 ② 也可以用過量的標(biāo)準(zhǔn) H2SO4或標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液吸收后再以標(biāo)準(zhǔn) NaOH溶液滴定過量的酸 。也可加入硫酸鈉，氯化鉀等提 高沸點(diǎn)，但效果不如硫酸鉀。還可以作消化終點(diǎn)指示劑（做蒸餾時(shí)堿性指示劑）。 （ 3）加氧化劑 如雙氧水、次氯酸鉀等加速有機(jī) 物氧化速度。 Ⅲ 、 吸收與滴定 （ 1）用 20g/L硼酸吸收，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，指示劑用混合指示劑（甲基紅 — 溴甲酚綠混合指示劑）或亞甲基藍(lán) — 甲基紅。 吸收 滴定 ? 結(jié)果計(jì)算： ? 蛋白質(zhì) （ %） = 100 注意： F—— 氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù) ， 一般為 ， 玉米 、 高粱為 ， 大豆及其制品為， 大麥為 。 ② 消化時(shí)不要用強(qiáng)火 ， 應(yīng)保持和緩沸騰 ， 以免粘貼在凱氏瓶內(nèi)壁上的含氮化合物在無硫酸存在的情況下消化不完全而造成氮損失 。 ③ 消化時(shí)應(yīng)注意不時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶，以便利用冷凝酸液將附在瓶壁上的固體殘?jiān)聪?，并促進(jìn)其消化完全。 ⑤一般消化至呈透明后，繼續(xù)消化 30分鐘即可，但對(duì)于含有特別難以氨化的氮化合物的樣品．如含賴氨酸、組氨
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