fcm樣品制備ppt課件-展示頁(yè)
2025-05-10 23:20本頁(yè)面
【正文】 。利用新鮮組織進(jìn)行流式細(xì)胞分析，若想獲得完整的科研資料是很困難的，例如患者的生存率，至少要等幾年的時(shí)間 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 石蠟包埋組織 Review: 石蠟包埋組織細(xì)胞的 FCM分析，則能在短時(shí)間內(nèi)獲得完整的科研資料，石蠟包埋組織單細(xì)胞分散方法的建立擴(kuò)大了 FCM的應(yīng)用范圍，并有大量臨床隨訪結(jié)果的資料重新得到研究和利用。 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 化學(xué)試劑處理法 principle reagent %EDTA ， 加入 Hank180。E P I C S A L T R AE P I C S A L T R A 流式細(xì)胞分析分選儀流式細(xì)胞分析分選儀 FCM的樣品制備 Introduction Content: 1 單分散細(xì)胞懸液制備技術(shù) 2 細(xì)胞生物學(xué)特征標(biāo)記技術(shù) 3 熒光染色技術(shù) Source: 1 實(shí)體組織 2 血液 3 脫落細(xì)胞 4 單層培養(yǎng)細(xì)胞 Introduction 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 Categorization: 1 新鮮實(shí)體組織 2 石蠟包埋組織 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 Definition: 新鮮實(shí)體組織是手術(shù)或活檢后根據(jù) 檢測(cè)目的而采用樣品，此樣品應(yīng)及時(shí)進(jìn) 行適當(dāng)?shù)谋４嫣幚?，如及時(shí)用固定劑或 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 Definition: 低溫對(duì)組織進(jìn)行保存，以避免由于室 溫過(guò)高、放置間過(guò)長(zhǎng)而造成組織自溶，影 響檢測(cè)結(jié)果 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 Method: 酶消化法 機(jī)械法 化學(xué)試劑處理法 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 protocol 1 將適合于酶消化的組織置于離 心管中 2 將選好的酶溶液 12ml加入盛有 消化組織的試管中 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 protocol 3 一般消化 2030min(恒溫 37186。C 或室溫 )，消化期間要間斷振 蕩或吹打 4 終止消化，收集細(xì)胞懸液，以 尼龍網(wǎng) (200目 )過(guò)濾，除去大團(tuán) 塊，以低速離心除去細(xì)胞碎片 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 protocol 5 將制備好的單細(xì)胞進(jìn)行流式 細(xì)胞術(shù)分析或保存 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 principle 1 可以破壞組織間的膠原 2 可以水解組織細(xì)胞的緊密 連結(jié)裝置的蛋白性物質(zhì) 3 可以水解組織間的粘多糖物質(zhì) 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 enzyme 1 蛋白酶類 如胃蛋白酶，木 瓜蛋白酶，鏈蛋白酶和 中性 蛋白酶等 )都能夠所有組織中 的細(xì)胞 2 胰酶 能水解脂鍵和肽鍵 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 enzyme 3 膠原酶 能降解幾種分子類型 的膠原 4 溶菌酶 能水解糖蛋白和肽的 糖苷鍵 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 enzyme 5 彈性蛋白酶 能消化連接組織 的糖蛋白和彈性蛋白的纖維， 可用于解離血管、心臟和肝臟 的細(xì)胞 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 announcements 1 酶需要溶解于適當(dāng)?shù)娜芤? 中，而這種溶液不致于造 成酶效價(jià)降低 2 注意組織在消化液中的消 化時(shí)間 實(shí)體組織單分散細(xì)胞的制備 新鮮實(shí)體組織 酶消化法 announcements 3 注意酶活性的 PH值 如胃 蛋白酶在堿性環(huán)境中失去活 性，胰酶在中性溶劑中活性 不佳 4 注意酶的適用濃度 實(shí)
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1