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分子生物學(xué)(上)-展示頁(yè)

2025-04-16 03:16本頁(yè)面
  

【正文】 15已知結(jié)構(gòu)基因 polA polB polC都需要模板指導(dǎo),以 dNTP作為底物,且需要 3’-OH 的引物鏈,聚合反應(yīng)方向?yàn)?5’ ?3’。15 復(fù)制起始位點(diǎn)的特征是什么?復(fù)制時(shí),雙鏈 DNA要解開(kāi)成兩股鏈分別進(jìn)行,所以,這個(gè)復(fù)制起點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式,被稱(chēng)為復(fù)制叉。 滾環(huán)型:?jiǎn)蜗驈?fù)制的特殊方式,DNA 被專(zhuān)一切割,形成自由 5’端被從環(huán)中置換出來(lái)并被單鏈 DNA結(jié)合蛋白覆蓋,使 3’OH端繞 DNA環(huán)延伸。14 環(huán)狀 DNA雙鏈復(fù)制有幾種類(lèi)型?線性:雙向復(fù)制時(shí)復(fù)制叉呈“眼”型。復(fù)制子:一般把生物體的復(fù)制單位稱(chēng)為復(fù)制子,一個(gè)復(fù)制單位只含一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。DNA連接酶:將兩個(gè)岡崎片斷連起來(lái)。DNA聚合酶Ⅲ:7 種不同亞單位 9個(gè)亞基,生物活性形式為二聚體; 5’?3’聚合酶,活力較強(qiáng),主要酶; 3’?5’外切酶。復(fù)制的延伸:DNA聚合酶Ⅰ:5’?3’聚合酶活性; 3’?5’核酸外切酶活性,既可合成又可降解 DNA,保證復(fù)制準(zhǔn)確性; 5’?3’外切酶功能,水解 5’末端,去除 5’端 RNA引物。引發(fā)酶:Primase,與 6種蛋白質(zhì)組成引發(fā)體,與 RNA polyase引發(fā)后滯鏈的引物RNA。 單鏈結(jié)合蛋白:SSB 蛋白:穩(wěn)定單鏈,阻止復(fù)性,包袱單鏈不被降解,不起解鏈作用。參加的酶和蛋白:解旋、解鏈:TopⅠ:解負(fù)超螺旋(W 蛋白)無(wú)需能量 TopⅡ:使雙鏈同時(shí)斷裂,連接,需 ATP。半不連續(xù)復(fù)制:DNA 分子的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模粭l鏈為 5’?3’,一條鏈為 3’?5’,但所有 DNA聚合酶方向都為 5’?3’,這就無(wú)法就是 DNA兩條鏈如何同時(shí)進(jìn)行復(fù)制。一個(gè)復(fù)制子只含一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。主要參與反應(yīng)的酶有 DNA解旋酶,DNA 聚合酶,DNA 連接酶,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶。13 半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制的機(jī)理,主要參與的酶與蛋白有哪些?,復(fù)制方向如何?親代雙鏈 DNA分子在 DNA聚合酶的作用下,分別以每條單鏈 DNA分子為模板,聚合與自身堿基可以互補(bǔ)配對(duì)的游離的 dNTP,合成出兩條與親代 DNA分子完全相同的子代 DNA分子的過(guò)程。不同螺旋形式 DNA分子主要參數(shù)比較雙螺旋 堿基傾角/(186。B-DNA 中的多聚 G-C 區(qū)易形成左手螺旋 DNA,即 Z-DNA。DNA 的雙鏈中一條被相應(yīng)的 RNA所取代,就會(huì)形成 A-DNA。12 DNA三種構(gòu)型的異同及其主要存在方式.通常情況下 DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)分成兩大類(lèi),右手螺旋有 A-DNA 和 B—DNA,左手螺旋有Z-DNA。(1)一個(gè)基因完全在另一個(gè)基因里面;(2)部分重疊;(3)兩個(gè)基因只有一個(gè)堿基對(duì)重疊。原核生物中可存在數(shù)個(gè)多順?lè)醋蛹捌渌绮倏v子()轉(zhuǎn)錄功能單位。11 原核細(xì)胞 DNA的基本特點(diǎn)是什么?結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)練絕大部分用于編碼蛋白質(zhì),只有非常少的一部分不轉(zhuǎn)錄,與真核 DNA的冗余不同,且不轉(zhuǎn)錄 DNA序列通常是控制基因表達(dá)序列(終止信號(hào),DNA 聚合酶結(jié)合位點(diǎn)等) 。 實(shí)驗(yàn)證明,兩棲動(dòng)物哺乳動(dòng)物,而且兩棲中 C值相差很大。真核生物中 DNA含量的反常現(xiàn)象。10 “ C值悖理”的定義及基本含義是什么?c值通常是指一種生物單倍體基因組 DNA的總量。(3)H1 于核心顆粒外 20bp處。(1)H2A、H2B、HH4 各兩個(gè)組成八聚體,為核心 DNA。①HMG 蛋白②DNA 結(jié)合蛋白③A24 非組蛋白,它們也可能是染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)成份。⑤H5 富含 Lys,有種特異性,與 H1無(wú)明顯血緣關(guān)系。四種:HH2A、H2B、H3 及 H4。Biochemistry(生物化學(xué)):分離、純化、鑒定細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)的目標(biāo)。 由此延伸出的 Molecular Cell Biology(分子細(xì)胞生物學(xué)) ,細(xì)胞的化學(xué)組成,細(xì)胞器結(jié)構(gòu),細(xì)胞骨架,生物大分子在細(xì)胞中的定為及功能為分子生物學(xué)提供基礎(chǔ)。6 Sanger和 Gilbert 發(fā)明了什么技術(shù)?DNA序列分析法(雙螺旋測(cè)序)7 誰(shuí)發(fā)明了 “DNA 體外擴(kuò)增技術(shù)”?PCR,美國(guó)科學(xué)家 Mullis8 分子生物學(xué)的三大支柱學(xué)科是什么?cytology(細(xì)胞學(xué)):生物體由細(xì)胞組成 所有組織的最基本單元——形狀相似,高度分化的細(xì)胞。5 Crick和 Watson 為什么獲得了諾貝爾生理學(xué)獎(jiǎng)?在 1953年提出 DNA的反向平行雙螺旋模型。證實(shí)噬菌體 DNA侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程,證明侵染過(guò)程中發(fā)揮作用的是 DNA不是蛋白質(zhì)(遺傳物質(zhì)是 DNA而非蛋白質(zhì)) 。1 / 12分子生物學(xué)(上)1 細(xì)胞學(xué)說(shuō)的奠基人是誰(shuí)?德國(guó)植物學(xué)家 Schleiden和德國(guó)動(dòng)物學(xué)家 Schwann,證明動(dòng)植物都是由細(xì)胞組成。2 英國(guó)科學(xué)家 Griffith證明了什么?肺炎鏈球菌感染實(shí)驗(yàn)證明了 DNA是遺傳物質(zhì)3 Hershy和 Chase通過(guò)噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明了什么?分別用 15S和 32P標(biāo)記噬菌體蛋白質(zhì)外殼和核酸,感染未百哦機(jī)細(xì)菌,觀察子代是否有標(biāo)記。4 1965年 Jacob和 Monod 提出了什么重要理論?提出并證實(shí)了操縱子作為調(diào)節(jié)細(xì)菌細(xì)胞代謝的分子機(jī)制(與 Iwoff分享了諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)) ,并且首次提出存在一種與染色體脫氧核糖核酸序列互補(bǔ),能將編碼在染色體 DNA上的遺傳信息帶到蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所(細(xì)胞質(zhì))并翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)的信使核糖核酸,即 mRNA分子。 (與通過(guò) X射線衍射證實(shí)該結(jié)構(gòu)的Wilkins共享諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 細(xì)胞的發(fā)生與形成是生物界普遍和永久的規(guī)律。Geics(遺傳學(xué)):由此延伸的分子遺傳學(xué)研究了基因結(jié)構(gòu)/復(fù)制/表達(dá)/重組/突變。 Nucleic Acid Chemistry Protein Chemistry9 染色體的基本組成成分有哪些?基本組政成分:DNA、組蛋白、非組蛋白、少量 RNA(1)DNA:不重復(fù)序列、中度重復(fù)序列、高度重復(fù)序列(衛(wèi)星 DNA)(2)組蛋白:富含 Arg、Lys 堿性 AA,帶正電荷,與 DNA帶負(fù)電荷磷酸基團(tuán)相互作用。特征:①進(jìn)化上極端保守(HH4H2A、H2BH1②無(wú)組織特異性(極少不含 H1而含 H5③肽鏈上 AA分布不對(duì)稱(chēng)④修飾作用:甲基化、乙?;?、磷酸化、ADP核糖基化、HH4 作用普遍。(3)非組蛋白:序列特異性 DNA結(jié)合蛋白,包括酶類(lèi)、骨架蛋白、核孔復(fù)合物蛋白及肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等。核小體:200 個(gè)左右堿基對(duì)的 DNA與四種組蛋白結(jié)合而成。2 / 12(2)146BP 的 DNA在外 。(4)兩個(gè)相鄰核小體以 0~80bpDNA 連接(物種間有差異) 。C值悖理:又叫 c值反常現(xiàn)象,指真核細(xì)胞基因的最大特點(diǎn)是含有大量的重復(fù)序列,而且功能 DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能 DNA所隔開(kāi)。內(nèi)容:真核生物中 C值隨生物進(jìn)化而增加,高等低等。 由上推斷,許多 DNA不編碼蛋白質(zhì),無(wú)生理功能。存在轉(zhuǎn)錄單元多順?lè)醋樱涸松?DNA序列中功能相關(guān)的 DNA和蛋白質(zhì)基因,往往叢集在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定的部位,形成功能單位或轉(zhuǎn)錄單元,它們可能被一起轉(zhuǎn)錄為含多個(gè) mRNA的分子,則多順?lè)醋?mRNA,其 DNA學(xué)列就是多順?lè)醋?。有重疊基因:有些 DNA可編碼兩種蛋白質(zhì),即為重疊基因。以上可用于解釋原核生物基因組雖小,但卻可以獨(dú)立完成整個(gè)生命活動(dòng)的原因(從 DNA上說(shuō)) 。DNA 的水溶液通常為 B-DNA,另外 A-T 豐富的 DNA片段常呈現(xiàn) B-DNA。如,在雜交分子或 DNA處于轉(zhuǎn)錄狀態(tài)時(shí)。其中 B-DNA 是最常見(jiàn)的 DNA構(gòu)象,而 A-DNA 和 Z-DNA 似乎不具有生物
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