hplc和ce衍生試劑ppt課件-展示頁
2025-01-23 03:42本頁面
【正文】 衍生試劑的構(gòu)成與要求 ? 衍生試劑 種類及應(yīng)用 液相色譜和毛細(xì)管電泳中的衍生試劑 為什么衍生 ? 檢測方法與檢測信號 ? 化學(xué)衍生主要是用于改善檢測靈敏度 ? 不好線性檢測或較窄線性范圍檢測和高檢出限的分析物，通過衍生得到改善 ? 不能與其它基體物質(zhì)分辨的分析物，通過衍生可以擴(kuò)大差別 ? 熒光生成（ fluorogenic）試劑和熒光標(biāo)記（ fluorescent label）試劑 . 衍生反應(yīng)方式 ? 柱前衍生（ precolumn derivatizations） ? 柱后衍生（ post column derivatizations) ? 柱中衍生 （ on column derivatizations) ? 離線（ off line)柱前衍生 ? 在線（ on line)柱前衍生， ? 離線（ off line)柱后衍生 ? 在線柱后衍生 柱前衍生 ? 自由性大 ? 衍生與柱分離的流動相無關(guān) ? 提高檢測靈敏度 ? 改善分離方法選擇性和色譜分辨率 ? 易于優(yōu)化反應(yīng)條件 衍生物穩(wěn)定 產(chǎn)率高 副反應(yīng)產(chǎn)物少 ? 選擇易與色譜流動相混合的溶劑作為衍生溶劑 在線柱后衍生 ? 柱后反應(yīng)器 ? 衍生反應(yīng)不強(qiáng)調(diào)生成單一的穩(wěn)定的衍生產(chǎn)物 ? 過量的衍生試劑干擾檢測 ? 要求快速并允許現(xiàn)時檢測 ? 加泵供給衍生試劑 ? 反應(yīng)溶劑必須與分離用的流動相易混溶 ? 衍生試劑與柱淋洗液有效混合 柱中衍生 ? 這一衍生方法基本是把衍生試劑溶入流動相，注射樣品后，在柱上分析物與流動相中的衍生試劑反應(yīng) ? 方法適于不太穩(wěn)定的衍生物，反應(yīng)要快 ? 所需衍生試劑量較大，昂貴的衍生試劑不應(yīng)采用此法 . 衍生試劑的構(gòu)成與要求 ? 衍生試劑必須含有可檢測的基團(tuán)，即顯色團(tuán)（ chromophore）、熒光團(tuán)（ fluorophore）和電基團(tuán)（ electrophore） ? 含有反應(yīng)基團(tuán)如 FITC NSC H 3 OC H 3 ONCSNOOC O O HO OOC H 2COO? 衍生試劑穩(wěn)定 要純 ， 不含雜質(zhì) ， ? 形成一種衍生物 ， 盡可能沒有副產(chǎn)物形成 ? 盡可能高衍生物產(chǎn)率； ? 需衍生試劑盡少 ， 避免試劑峰的干擾 . ? 對于柱后衍生試劑 ， 同樣須具有的共同條件外 ， 應(yīng)： （ 1） 試劑與被分析物反應(yīng)迅速； （ 2） 衍生試劑轉(zhuǎn)化率高 ， 過量少 ，以免干擾衍生物的檢測 . 進(jìn)展文獻(xiàn) 鄧櫻花，王紅，張華山，高效液相色譜和毛細(xì)管電泳分離熒光檢測小分子氨基生物物質(zhì)的進(jìn)展 ，分析科學(xué)學(xué)報， 2022，26（ 1）： 103 衍生試劑 種類與應(yīng)用 ? 胺的衍生試劑 ? 巰基的衍生試劑 ? 羥基的衍生試劑 ? 羰基化合物的衍生試劑 ? 羧酸的衍生試劑 ? 分離對映體的手性衍生試劑 被衍生的氨基化合物 ? 氨基酸 ? 神經(jīng)遞質(zhì)氨基酸 谷氨酸 (Glu)、天冬氨酸 (Asp)、 γ氨基丁酸 (GABA)、甘氨酸 (Gly)、 β丙氨酸 (βAla)、?；撬?(Tau)等 ? 神經(jīng)遞質(zhì) 多巴胺、腎上腺素、去甲基腎上腺素 ? 小肽和肽段 二甘肽，三甘肽，谷胱甘肽，腦啡肽等 ? 磷酸化氨基酸 磷酸化絲氨酸 (PSer)、磷酸化蘇氨酸(PThr)和磷酸化酪氨酸 ? 脂肪胺 ? 生物胺 腐胺、尸胺、精胺、亞精胺 ? 蛋白質(zhì) 胺的衍生試劑 ? 芳香鄰二醛類 ? 異硫氰酸酯類 ? 酰氯類 羰酰氯類 磺酰氯 ? 活性鹵類 ? N羥基琥珀酰亞胺活性酯類 ? 其它 芳香鄰二醛類 ? OPA、 2， 3萘二醛 （ NDA） 、 3（ 2呋喃甲?；?） 喹啉 2羰醛 （ FQCA） 、 3（ 4羧基苯甲?；?） 喹啉 2羰醛 （ CBQCA） . C H OCONC O O
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