【正文】 γ ≥( 相關(guān)系數(shù)） 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 五、線性及其范圍 (3) 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 取人參皂苷 Rb1對照品 10 mg，精密稱定，置 100 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為 ?g 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 要求： 線性范圍要涵蓋待測物的所有濃度 范圍。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 五、線性及其范圍 ① 線性： 在 設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與被測物濃度 呈正比關(guān)系 的程度。 表達(dá)形式： 當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)，協(xié)同檢驗(yàn)的過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 表達(dá)形式： （ 2） 中間精密度 同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。 四、精密度 表示方法 ： 偏差（ d）： 標(biāo)準(zhǔn)偏差 (SD): 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差 (RSD): id x x??? ? 2ixxSn1????SR SD 1 0 0 %x??第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 表達(dá)形式： （ 1）重復(fù)性： 相同條件下，同一個(gè)分析人員測 定所得結(jié)果的精密度； 測定法： ① 至少用 9次測定結(jié)果評價(jià)：制備三個(gè)不同濃度樣品，每一濃度樣品測三次。 （ 2） 以儀器所測空白背景響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)差 (SD)的 10倍為估計(jì)值，再經(jīng)試驗(yàn)確定。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 三、定量限（ 1imit of quantitation， LOQ） 定義： 樣品中被測物能被 定量測定的最低量 ，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。 （ 1）非儀器分析 —— 目視法 （ 2）儀器分析 一般以信噪比 (S/N= 3或 2)時(shí)的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定為檢測限。 意義： LOD 是一種限度檢驗(yàn)的效能指標(biāo) ,它反映方法與儀器的靈敏度和噪音大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白值的高低。測得結(jié)果表明：樣品峰保留時(shí)間處無雜質(zhì)峰干擾（見附圖 21）。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 例：定坤丸中人參皂苷 Re和人參皂苷 Rb1測定 (6) 陰性對照溶液制備 按處方比例稱取除西洋參以外的其余藥味，按制備工藝制成缺西洋參的陰性樣品；按 “ 供試品溶液制備 ”項(xiàng)下方法制得陰性對照溶液。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 驗(yàn)證內(nèi)容 1 專屬性 2 檢測限 3 定量限 4 精密度 5 線性及其范圍 6 準(zhǔn)確度 7 耐用性 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 一、專屬性（ specificity） 定義： 指在其他成分（雜質(zhì)和制劑輔料等）可能存在下 ,采用的方法能準(zhǔn)確測出被測物的能力。 方法驗(yàn)證過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草和修訂說明中。 色譜法特點(diǎn)： 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 一、目的 證明所用的分析方法適合于 相應(yīng)的檢測要求。 （ 4）操作繁瑣，實(shí)驗(yàn)消耗大。 （ 2）應(yīng)用范圍寬：以 HPLC為最廣泛。 定量方法： 面積歸一化法，內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)曲線法、外標(biāo)法等。 四、色譜分析法 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 對內(nèi)標(biāo)物要求： a． 內(nèi)標(biāo)物須為原樣品中不含組分 b． 內(nèi)標(biāo)物與待測物保留時(shí)間應(yīng)接近且 R c． 內(nèi)標(biāo)物為高純度物質(zhì) ， 或含量已知物質(zhì) 內(nèi)標(biāo)法： ? 內(nèi)標(biāo)法優(yōu)點(diǎn)： ? 進(jìn)樣量不超量時(shí) ， 重復(fù)性及操作條件對結(jié)果無影響 ? 只需待測組分和內(nèi)標(biāo)物出峰 ， 與其他組分是否出峰無關(guān) ? 適合測定微量組分 ? 內(nèi)標(biāo)法缺點(diǎn)： 制樣要求高；找合適內(nèi)標(biāo)物困難；已知校正因子 與進(jìn)樣量無關(guān) 四、色譜分析法 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)： 按各品種項(xiàng)下要求對色譜系統(tǒng)進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對照品對色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求應(yīng)符合要求。 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 靈敏度高（ pg），低濃度，但適用范圍有限，應(yīng)用衍生化方法較多，在生物大分子分析中應(yīng)用較多。 aA(待測物）＋ bB（滴定液） → cC＋ dD T＝ m＊ (a/b)*M（ mg/ml） ? 百分含量計(jì)算：直接滴定法和回滴定法 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 直接滴定法： 含量（％）＝（ V＊ T＊ F）／ W＊ 100％ 回滴定法：即剩余滴定法 先加入定量過量的滴定液 A，使其與被測藥物反應(yīng)；待此反應(yīng)進(jìn)行完全后，再用另一滴定液 B來回滴反應(yīng)中剩余的滴定液 A 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 回滴定法：即剩余滴定法 做空白試驗(yàn)的含量計(jì)算： 含量％＝ (V0VB)*T*F/W＊ 100％ F：濃度校正因子 =實(shí)際濃度 /標(biāo)準(zhǔn)濃度 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 三、光譜分析法 UV、 IR、 MS、 NMR和熒光分析 紫外可見分光光度法 計(jì)算分光光度法可測定多組分制劑的含量，現(xiàn)已基本不用。 指示劑和靈敏度是影響結(jié)果的原因之一 ,常產(chǎn)生滴定誤差； 特點(diǎn)： ? 快速 ,準(zhǔn)確（ RSD％） ,靈敏度高； ? 適合于中、高含量組分分析（ 1%） ； ? 儀器簡單，操作方便，適用范圍廣； 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 滴定度： 指每 1ml某摩爾的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的重量。第四章 藥物定量分析 與分析方法驗(yàn)證 廖瓊峰 第四章 藥物定量分析與 分析方法驗(yàn)證 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 第三節(jié) 生物樣品分析方法的基本要求 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 重量分析法 ? 容量分析法 ? 光譜分析法 ? 色譜分析法 一、重量分析法 生成的沉淀而進(jìn)行分析的方法 生成沉淀 → 濾過 → 洗滌 → 灼燒 → 恒重。 特點(diǎn)： ?操作繁瑣 ?結(jié)果準(zhǔn)確 很少用 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 二、容量分析法 為經(jīng)典方法，原料藥分析常采用。 CHP用 mg來表示。 靈敏度