藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證(已修改)
2025-01-18 08:03 本頁(yè)面
【正文】 第四章 藥物定量分析 與分析方法驗(yàn)證 廖瓊峰 第四章 藥物定量分析與 分析方法驗(yàn)證 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證 第三節(jié) 生物樣品分析方法的基本要求 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 重量分析法 ? 容量分析法 ? 光譜分析法 ? 色譜分析法 一、重量分析法 生成的沉淀而進(jìn)行分析的方法 生成沉淀 → 濾過(guò) → 洗滌 → 灼燒 → 恒重。 特點(diǎn)： ?操作繁瑣 ?結(jié)果準(zhǔn)確 很少用 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 二、容量分析法 為經(jīng)典方法，原料藥分析常采用。 指示劑和靈敏度是影響結(jié)果的原因之一 ,常產(chǎn)生滴定誤差； 特點(diǎn)： ? 快速 ,準(zhǔn)確（ RSD％） ,靈敏度高； ? 適合于中、高含量組分分析（ 1%） ； ? 儀器簡(jiǎn)單，操作方便，適用范圍廣； 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 滴定度： 指每 1ml某摩爾的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y(cè)藥物的重量。 CHP用 mg來(lái)表示。 aA(待測(cè)物）＋ bB（滴定液） → cC＋ dD T＝ m＊ (a/b)*M（ mg/ml） ? 百分含量計(jì)算：直接滴定法和回滴定法 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 直接滴定法： 含量（％）＝（ V＊ T＊ F）／ W＊ 100％ 回滴定法：即剩余滴定法 先加入定量過(guò)量的滴定液 A，使其與被測(cè)藥物反應(yīng)；待此反應(yīng)進(jìn)行完全后，再用另一滴定液 B來(lái)回滴反應(yīng)中剩余的滴定液 A 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 回滴定法：即剩余滴定法 做空白試驗(yàn)的含量計(jì)算： 含量％＝ (V0VB)*T*F/W＊ 100％ F：濃度校正因子 =實(shí)際濃度 /標(biāo)準(zhǔn)濃度 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 三、光譜分析法 UV、 IR、 MS、 NMR和熒光分析 紫外可見(jiàn)分光光度法 計(jì)算分光光度法可測(cè)定多組分制劑的含量，現(xiàn)已基本不用。 靈敏度和準(zhǔn)確度高，價(jià)格低、適用范圍廣 一般適用于純組分的分析，如原料藥或 單組分制劑（無(wú)輔料干擾）。 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 靈敏度高（ pg），低濃度，但適用范圍有限，應(yīng)用衍生化方法較多，在生物大分子分析中應(yīng)用較多。 熒光分析法 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) HPLC —— 適用范圍廣，越來(lái)越廣泛 GC —— 使用有限制 TLC—— 很少用于定量，多用于定性。 四、色譜分析法 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) ? 對(duì)內(nèi)標(biāo)物要求： a． 內(nèi)標(biāo)物須為原樣品中不含組分 b． 內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物保留時(shí)間應(yīng)接近且 R c． 內(nèi)標(biāo)物為高純度物質(zhì) ， 或含量已知物質(zhì) 內(nèi)標(biāo)法： ? 內(nèi)標(biāo)法優(yōu)點(diǎn)： ? 進(jìn)樣量不超量時(shí) ， 重復(fù)性及操作條件對(duì)結(jié)果無(wú)影響 ? 只需待測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物出峰 ， 與其他組分是否出峰無(wú)關(guān) ? 適合測(cè)定微量組分 ? 內(nèi)標(biāo)法缺點(diǎn)： 制樣要求高；找合適內(nèi)標(biāo)物困難；已知校正因子 與進(jìn)樣量無(wú)關(guān) 四、色譜分析法 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)： 按各品種項(xiàng)下要求對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對(duì)照品對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求應(yīng)符合要求。通常包括理論塔板數(shù)、分離度、重復(fù)性、拖尾因子。 定量方法： 面積歸一化法，內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)曲線法、外標(biāo)法等。 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) （ 1）條件選擇范圍寬：包括色譜柱、流動(dòng)相、 檢測(cè)器等。 （ 2）應(yīng)用范圍寬：以 HPLC為最廣泛。 （ 3）靈敏度高，準(zhǔn)確度好，重現(xiàn)性好。 （ 4）操作繁瑣，實(shí)驗(yàn)消耗大。 （ 5）多組分的分離分析，與光譜等聯(lián)用，可進(jìn) 行定性和定量分析。 色譜法特點(diǎn)： 第一節(jié) 定量分析方法特點(diǎn) 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 一、目的 證明所用的分析方法適合于 相應(yīng)的檢測(cè)要求。 二、用途 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草時(shí)， 藥物生產(chǎn)工藝方法變更、制劑組成改變、 對(duì)原分析方法進(jìn)行修訂。 方法驗(yàn)證過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草和修訂說(shuō)明中。 驗(yàn)證分析項(xiàng)目 1. 鑒別試驗(yàn)； 2. 雜質(zhì)定量或限度檢查； 3. 有效成分含量測(cè)定； 4. 制劑中其它成分 (降解產(chǎn)物、防腐劑等 ) 的測(cè)定； 5. 溶出度、釋放度等功能檢查中，溶出量 的測(cè)定方法。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 驗(yàn)證內(nèi)容 1 專屬性 2 檢測(cè)限 3 定量限 4 精密度 5 線性及其范圍 6 準(zhǔn)確度 7 耐用性 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 一、專屬性（ specificity） 定義： 指在其他成分（雜質(zhì)和制劑輔料等）可能存在下 ,采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)出被測(cè)物的能力。 意義： 分析復(fù)雜樣品混合物時(shí)衡量其是否 受到干擾程度 的一種方法。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 例：定坤丸中人參皂苷 Re和人參皂苷 Rb1測(cè)定 (6) 陰性對(duì)照溶液制備 按處方比例稱取除西洋參以外的其余藥味，按制備工藝制成缺西洋參的陰性樣品；按 “ 供試品溶液制備 ”項(xiàng)下方法制得陰性對(duì)照溶液。在上述色譜條件下，精密吸取 20 ?L進(jìn)樣，觀察樣品峰的保留時(shí)間處是否有雜質(zhì)峰。測(cè)得結(jié)果表明：樣品峰保留時(shí)間處無(wú)雜質(zhì)峰干擾（見(jiàn)附圖 21）。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 圖 21 定坤丸中人參皂苷 Re和人參皂苷 Rb1測(cè)定 HPLC色譜圖 1 人參皂苷 Re 2 人參皂苷 Rb1 A 對(duì)照品 B 樣 品 C 陰 性 二、檢測(cè)限 (limit of detection, LOD) 定義： 試樣中被測(cè)物能被測(cè)出的 最低濃度 或量。 意義： LOD 是一種限度檢驗(yàn)的效能指標(biāo) ,它反映方法與儀器的靈敏度和噪音大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白值的高低。 第二節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 分析方法驗(yàn)證 測(cè)定法： 用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。 （ 1）非儀器分析 —— 目視法 （ 2）儀器分析 一般以信噪比 (S/N= 3或 2)時(shí)的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定為檢測(cè)限。
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1