動物細(xì)胞的微囊化培養(yǎng)-展示頁
2025-05-25 17:18本頁面
【正文】 和增殖。 培養(yǎng)液中大量的微載體為細(xì)胞提供了極大的附著表面 ， 1g微載體其比表面積可達(dá) 6000cm2， 從而可實現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng) 。 2） 微載體 微載體細(xì)胞培養(yǎng)法是一種用于培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù) 。 而且細(xì)胞不用從培養(yǎng)基中分離 ， 所以不必考慮梯度問題；當(dāng)培養(yǎng)基高速循環(huán)時 ， 可以保持相對恒定的營養(yǎng)物和氧濃度 。該系統(tǒng)可以連續(xù)化生產(chǎn)蛋白質(zhì) 。 細(xì)胞的固定化培養(yǎng)方法 一 、 吸附 1） 多孔陶瓷 美國某公司開發(fā)了一種完全自動化的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng) ， 該系統(tǒng)的核心是陶質(zhì)矩形蜂窩狀生物反應(yīng)器 。 高分子和活性成分的溶液在表面活性劑的作用下預(yù)先乳化 。冷卻速度和攪拌條件決定了膠囊的形狀和大小。粒徑大小取決于噴霧干燥器的尺寸、干燥室的噴嘴種類、料漿流量、干燥溫度等因素?；钚晕镔|(zhì)的料漿必須在合適的分散劑作用下先預(yù)磨成較細(xì)的顆粒。 微囊懸浮液噴霧干燥法 微囊的懸浮液可用噴霧干燥制成微囊粒劑，一般需要另外的分散劑來滿足在水中再分散的需要。首先 ， 在熱的明膠溶液中制備好囊芯物質(zhì)的懸浮液或乳液 ， 接著加人稀釋的阿拉伯膠溶液 ， 將 pH值降至 ， 它促進(jìn)了作為核芯的分散顆粒周圍明膠的凝固 ， 當(dāng)降低溫度時 ， 明膠出現(xiàn)并形成軟的膠囊 ， 接著加人醛類交聯(lián)劑 （ 如戊二醛 ） 使軟膠囊硬化 ， 提高 pH值至 9并加熱 。 凝聚法 在此工藝中 ， 含有預(yù)分散活性物質(zhì)的陽離子高分子溶液與另一相反電荷的高分子溶液反應(yīng) 。 定位聚合反應(yīng) 在定位聚合反應(yīng)中，高分子單體和預(yù)聚物置于油相中，通過提高溫度或者使用具有表面活性的酸性催化劑來引發(fā)界面聚合反應(yīng)。 參加聚合反應(yīng)的單體 ， 一種是水溶性的 ， 另一種是油溶性的 ，它們分別位于囊心液滴的內(nèi)部和外部 ， 并在囊心液滴的表面上反應(yīng)形成聚合物薄膜 。 微囊技術(shù)可廣泛用于醫(yī)藥 、 食品 、農(nóng)藥 、 飼料 、 化妝品 、 染料等領(lǐng)域 。 優(yōu)缺點 優(yōu)點： ① 可防止細(xì)胞在培養(yǎng)過程中受到物理損傷 . ② 活性蛋白不能從囊中自由出入半透膜，從而提高細(xì)胞密度和產(chǎn)物含量，并方便分離純化處理 . 缺點： ① 微囊制作復(fù)雜，成功率不高 . ② 微囊內(nèi)死亡的細(xì)胞會污染正常產(chǎn)物 . ③ 收集產(chǎn)物必須破壁，不能實現(xiàn)生產(chǎn)連續(xù)化 . 微囊化培養(yǎng) ? 微囊 （ Microcapsules） 技術(shù) 是一種利用天然的或合成的高分子成膜材料 （ 囊材 ） 把液體或固體 （ 囊心物 ） 包嵌形成直徑 1~5000μm （ 通常為 5~250μm ） 微小膠囊的技術(shù) 。 ? 動物細(xì)胞的大規(guī)模的培養(yǎng)確有不小的困難，但它的 優(yōu)點也是很明顯的、誘人的 ，關(guān)鍵是如何提高細(xì)胞在反應(yīng)器內(nèi)的密度，提高細(xì)胞的穩(wěn)定性以及生產(chǎn)率。 ? 隨著生物工程的發(fā)展，使得很多原先只有動物體產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可由重組微生物生產(chǎn)，如重組大腸桿菌表達(dá)和生產(chǎn)人胰島素和人生長激素。 常規(guī)的細(xì)胞 培養(yǎng)方法 也不太適用于大規(guī)模培養(yǎng)。 動物細(xì)胞 培養(yǎng)基 成分復(fù)雜，價格昂貴。第四章 動物細(xì)胞的微囊化培養(yǎng) 動物細(xì)胞雖可像微生物細(xì)胞一樣 ， 在人工控制條件的生物反應(yīng)器中進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng) ， 但其細(xì)胞結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性 與微生物細(xì)胞相比 ， 有顯著差別： ① 動物細(xì)胞比微生物細(xì)胞大得多 ， 無細(xì)胞壁 ， 機(jī)械強(qiáng)度低 ， 對剪切力敏感 ， 適應(yīng)環(huán)境能力差 ② 倍增時間長 ， 生長緩慢 ， 易受微生物污染 ， 培養(yǎng)時須用抗生素 ③ 培養(yǎng)過程需氧量少 (氧傳質(zhì)系數(shù) KLa 大于 10 h1即可滿足每毫升 107個細(xì)胞的生長 ) ④ 培養(yǎng)過程中細(xì)胞相互粘連以集群形式存在 ⑤ 原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖 50 代即退化死亡 ⑥ 代謝產(chǎn)物具有生物活性 ， 生產(chǎn)成本高 ， 但附加值也高 。 動物細(xì)胞培養(yǎng)的一般特點 動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)存在的困難 動物 細(xì)胞生長 速率慢， 產(chǎn)物 的生產(chǎn)率也低，從而造成產(chǎn)物濃度也低。 動物細(xì)胞沒有 細(xì)胞壁 ，易受機(jī)械攪拌所引起的剪切力的影響。 上述這些限制造成了大規(guī)模動物細(xì)胞培養(yǎng)所需費用高，技術(shù)難度大（規(guī)模越大、影響也越大）。然而，由于 微生物細(xì)胞缺乏蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄后修飾機(jī)制 ，由重組微生物產(chǎn)生的不少蛋白質(zhì)分子不具有所期待的生物學(xué)功能和活力。動物細(xì)胞的固定化以及培養(yǎng)是解決問題的有效途徑。 ? 微囊 的制備技術(shù)起源于 20世紀(jì) 50年代 ， 在 70年代中期得到迅猛發(fā)展 ， 并且出現(xiàn)了許多微囊化產(chǎn)品和工藝 。 微囊制備方法
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1