吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度-展示頁
2024-09-01 13:06本頁面
【正文】 L] 高酸度下，幾乎全部以 HL存在，可測得 AHL＝ εHL 20 2. 多組分的測定 ?x?1, ?y?1, ?x?2, ?y?2由 x,y標(biāo)液 在 ?1, ?2處分別測得 a) 在 ?1處測組分 x, 在 ?2處測組分 y b) 在 ?1處測組分 x。 4. 干擾組分與顯色劑有反應(yīng) ,又無法掩蔽消除時： 1） 掩蔽被測組分 ，再加入顯色劑，作參比 . 2） 加入等量干擾組分 到空白溶液中 ,作參比 . 選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤? 18 吸光光度法的應(yīng)用 1. 單一組分測定 1) 金屬離子 : Fephen, Ni丁二酮肟 , Co鈷試劑 2) 磷的測定 : DNA中含 P～ %, RNA中含 P～ %, 可得核酸量 . H3PO4+12(NH4)2MoO4+21HNO3 =(NH4)3PO4 如 phen—Fe2+ 標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 被測液 作參比。L1 β3＝ β3 FeR3 12 3[ F e R ]lg[ F e ]?pH3～ 8為適宜 的酸度范圍 13 3. 顯色溫度及顯色時間 另外，還有介質(zhì)條件、有機溶劑、表面活性劑等 T1(℃ ) T2(℃ ) t(min) A 14 干擾及消除 Co2＋ , Fe3+ Co2+ FeF63 Co(SCN)2 (藍 ) ⑴ NaF SCN－ Co2+ Fe2+,Sn4+ (2)Sn2+ Co(SCN)2 SCN－ 測 Co2＋ (含 Fe3+) : (掩蔽法 ) 15 Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ CoR,ZnR NiR,FeR CoR, Zn2+ , Ni2+ , Fe2+ 鈷試劑 R H+ 測 Co2＋ :(生成絡(luò)合物性質(zhì)不同 ) 如不能通過控制酸度和掩蔽的辦法消除干擾， 則需采取分離法。]? ? ?? ? ? ?H＋ H＋ A 檸檬酸 c(R)≈[R180。]??????33 F e ( A ) R ( H )[ F e R ]lg lg lg 3 lg 3 lg [ R 39。[ F e 39。 *顯色條件易于控制， 重現(xiàn)性好 。H2O2]2+ 有機顯色劑 : 7 有機顯色劑 CH3－ C－ C－ CH3 HO－ N N－ OH ＝ ＝ N N OH COOH SO 3 H OO型： N N N O H OH ON型 ： PAR N H N H N S N S型 ： 雙硫腙 NN型： 丁二酮肟 鄰二氮菲 磺基水楊酸 8 顯色反應(yīng)的選擇 *靈敏度高 ，一般 ε 104 *選擇性好 *顯色劑在測定波長處無明顯吸收。 ? 104為低靈敏度 . 2 例 1 鄰二氮菲光度法測鐵 ?(Fe)=, b=2cm , A= 計算 ? 和 解： c(Fe)= mg/L= 103/ = 105mol/L 1%1cmE?? 4 1 150 .3 8= = 1 .1 1 0 L m o l c m2 1 .8 1 0?3 c = 103 g /1000mL = 104g/100mL bc1%1cmA= E??1% m 431c = 0 .3 8 /2 .0 1 0 = 1 .9 1 0E??1%1cm 53= 10 = 10 / =o 10r E /M?4 二 . 準(zhǔn)確度 —儀器測量誤差 光度計的讀數(shù)誤差一般為～ 2％ (ΔT),由于 T與濃度 c不是線性關(guān)系，故不同濃度時的 ΔT引起的誤差不同。cm1) ? 越大 , 靈敏度越高 : ? 104～ 5 104 為中等靈敏度 。1 吸光光度法的靈敏度與準(zhǔn)確度 一 . 靈敏度的表示方法 :摩爾吸光系數(shù) (?) A= ? b c ? =A/bc (Lmol1 ? 105為高靈敏度 。 100 80 60 40 20 0 T% ?c1 ?c2 ?c3 ?T ?T ?T透光率讀數(shù)誤差 c ?c1 c1 ?c2 c2 ?c3 c3 5
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1