20xx年醫(yī)學專題—胞漿蛋白核蛋白膜蛋白抽提試劑盒(真核細胞)-文庫吧資料
2024-11-17 22:27本頁面
【正文】 。2. 冰上孵育細胞，并且輕微振蕩，時間為大約10 分鐘。1. 吸取取1ml 的蛋白抽提試劑A，加入到已經(jīng)清洗好的細胞沉淀中。600g，離心5 分鐘，收集細胞。于70℃保存該樣品。記錄上清的體積，此即為細胞核蛋白。10. 以6780g 的離心速度，4 度離心10 分鐘。用移液器小心吹打，使沉淀懸浮。于70℃保存該樣品。記錄上清的體積，此即為細胞質(zhì)膜蛋白。7. 以5000g 的離心速度，4 度離心10 分鐘。用移液器小心吹打，使沉淀懸浮。于70℃保存該樣品。記錄上清的體積，此即為胞漿蛋白。3. 以480g 的離心速度，4 度離心10 分鐘。使95100%的細胞胞漿流出細胞。用移液器小心吹打，使細胞懸浮。a) 按照實驗III 進行下面實驗。c) 按照實驗II 進行下面的實驗。a) 轉(zhuǎn)移懸浮細胞培養(yǎng)液到一個預先稱重的離心管中，簡單的離心。? 需要自己提供的試劑：90% acetone，PBS抽提所使用的蛋白抽提試劑使用量抽提步驟Ⅰ. 準備細胞1. 將培養(yǎng)好的細胞用預冷的PBS 清洗23 次。II 試劑盒組分::A. 注意事項和試劑準備:? 打開試劑盒后，于4度保存蛋白抽提液；于20度保存蛋白酶抑制劑，樣品緩沖液（6）。獲得的各種部分蛋白純度高，可用于PAGE電泳、Wes
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