6酶、細(xì)胞、原生質(zhì)體固定化-文庫吧資料
2024-10-04 03:43本頁面
【正文】 世界上第一種工業(yè)化生產(chǎn)的固定化酶 第五十四頁，共八十五頁。 第五十二頁，共八十五頁。 (四 )半衰期 在連續(xù)測定條件下，固定化酶 (細(xì)胞 )的活力下降為最初活力一半所經(jīng)歷的連續(xù)工作時(shí)間，以 t1/2表示。 (二 ) 蛋白總量 (BCA法 ) 三、固定化酶〔細(xì)胞〕的評價(jià)指標(biāo) 第五十頁，共八十五頁。 二、固定化細(xì)胞的性質(zhì) 第四十九頁，共八十五頁。 〔 2〕穩(wěn)定性的增加 。 與固定化酶相比，固定化細(xì)胞的情況比較復(fù)雜。但大分子底物難于接近酶分子，導(dǎo)致酶的專一性發(fā)生改變。 〔五〕酶的動(dòng)力學(xué)特征 第四十七頁，共八十五頁。 固定化載體與底物電荷相反 ,固定化酶的表觀 Km值降低。 0102030405060705 6 7 8 9pHRelative activity (%)AB第四十六頁，共八十五頁。 帶正電荷載體 ：最適 pH 向酸性偏移。 多數(shù)酶固定化后熱穩(wěn)定性上升，最適溫度也上升〔有例外〕。 第四十四頁，共八十五頁。 如：氨基?；?， 70℃ ， 15分鐘，酶失去活性。 ③固定化局部阻擋了外界不利因素對酶 的侵襲。 第四十二頁，共八十五頁。 〔一〕酶的活性 ： 通常低于天然酶〔有例外〕。 第四十頁，共八十五頁。 〔三〕原生質(zhì)體的固定化方法 第三十八頁，共八十五頁。常用凝膠：瓊脂凝膠，海藻酸鈣凝膠，角叉菜膠和光交聯(lián)樹脂。 實(shí)驗(yàn)： %左右的卡拉膠 ， 70 ℃ 溶解 , 再冷卻到 42℃ , +10%左右的細(xì)菌菌體 (預(yù)熱到 42℃ 〕 迅速混合均勻 4 ℃ 冰箱放置大約 30min 取出后切成 3 3mm的小顆粒 第三十七頁，共八十五頁。 第三十五頁，共八十五頁。 例如：葡萄糖異構(gòu)酶 (白色鏈霉菌 )，是一種胞內(nèi)酶。 一般只用于單酶或少數(shù)幾種酶催化的反響。 〔二〕細(xì)胞的固定化方法 第三十三頁，共八十五頁。 第三十一頁，共八十五頁。 吸附法 共價(jià)偶聯(lián)法 交聯(lián)法 包埋法 酶的四種固定化方法 第二十九頁，共八十五頁。 缺點(diǎn)：只適合作用于小分子底物和產(chǎn)物的酶。 第二十七頁，共八十五頁。 2〕半透膜能阻止蛋白質(zhì)分子滲漏和進(jìn)入，注入體內(nèi)既可防止引起免疫過敏反響，也可使酶免遭蛋白水解酶的降解，具有較大的醫(yī)學(xué)價(jià)值。 第二十六頁，共八十五頁。半透膜：直徑幾十微米到幾百微米，厚約 25nm。 海藻酸鈣凝膠包埋法： 滴至 海藻酸鈉溶液＋ E (or cell) CaCl2 溶液中 IE(or IC) 角叉菜膠包埋法： 滴至 角叉菜膠＋ E (or cell) KCl 溶液中 IE (or IC) 聚丙烯酰胺凝膠包埋法： AP Acr+ Bis+E (or cell) IE (or IC) TEMED 第二十五頁，共八十五頁。 第二十三頁，共八十五頁。分為： 網(wǎng)格型：將酶包埋在高分子凝膠細(xì)微
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