植物原生質(zhì)體的分離實(shí)驗(yàn)-文庫吧資料
2025-04-23 04:15本頁面
【正文】 縱切根尖 放入中性紅染液滴中，染色5~10min。最好現(xiàn)用現(xiàn)配，以保持它的充分氧化能力。（3） 1%、1/5000詹納斯綠B溶液 稱取50mg詹納斯綠B溶于5ml Ringer溶液中，稍加微熱(30~40℃)，使之溶解，用濾紙過濾后，即為1%原液。 試劑（1）Ringer溶液： 氯化鈉 () 氯化鉀 氯化鉀 氯化鈣 蒸餾水 100ml （2）10%、1/3000中性紅溶液： Ringer液，稍加熱 (30~40℃)使之很快溶解，用濾紙過濾，裝入棕色瓶于暗處保存，否則易氧化沉淀，失去染色能力。中性紅為弱堿性染料，對液泡系(即高爾基體)的染色有專一性，只將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)完全不著色，這可能是與液泡中某些蛋白質(zhì)有關(guān)。詹納斯綠 B是線垃體的專一性活體染色劑。細(xì)胞的各項(xiàng)活動(dòng)所需要的能量，主要是通過線粒體呼吸作用來提供的。 實(shí) 驗(yàn) 目 的觀察動(dòng)、植物活細(xì)胞內(nèi)線粒體、液泡系的形態(tài)、數(shù)量與分布； 學(xué)習(xí)一些細(xì)胞器的超活染色技術(shù)。一般說來，最為適用的是堿性染料，這可能是因?yàn)樗哂腥芙庠陬愔|(zhì)(如卵磷脂、膽固醇等)的特性，易于被細(xì)胞吸收。堿性染料的膠粒表面帶陽離子，酸性染料的膠粒表面帶有陰離子，而被染的部分本身也是具有陰離子或陽離子，這樣，它們彼此之間就發(fā)生了吸引作用。體外活體染色又稱超活染色，它是由活的動(dòng)、植物分離出部分細(xì)胞或組織小塊，以染料溶液浸染，染料被選擇固定在活細(xì)胞的某種結(jié)構(gòu)上而顯色。活體染色技術(shù)可用來研究生活狀態(tài)下的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告描繪所觀察到的洋蔥鱗葉細(xì)胞骨架圖。 ，然后將樣品置于載玻片上,加蓋玻片，于普通光學(xué)顯微鏡下觀察。 (pH 6．8)洗3次，每次5min。 X—100，用M緩沖液洗3 次,每次5min。 儀器(請參看儀器圖庫)：顯微鏡，燒杯，鑷子。 (4)1%Trion X100：用M緩沖液配制?？捡R斯亮藍(lán)R250(Coomassie brilliant blue R250)是一種蛋白質(zhì)染料，處理后 的材料用考馬斯亮藍(lán)R250(考馬斯亮藍(lán)R250) 染色后，用光學(xué)顯微鏡觀察，可以見到一種網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu)，即是細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)三 細(xì)胞骨架的觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沼霉鈱W(xué)顯微鏡觀察植物細(xì)胞骨架的原理 及方法，觀察光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞骨架的網(wǎng)狀 結(jié)構(gòu)。步驟同2。二、低滲溶液取試管一支，加入10ml蒸餾水，再加入1ml稀釋羊血，注意觀察溶液顏色的變化，有不透明的紅色逐漸澄清，說明紅細(xì)胞發(fā)生破裂造成100%紅細(xì)胞溶血，使光線比較容易透過溶液。 三、試劑 。 實(shí) 驗(yàn) 用 品 一、器材 50ml燒杯, 試管（1～10cm）, 10ml移液管, 試管架。實(shí)驗(yàn)二、細(xì)胞膜的通透性觀察實(shí) 驗(yàn) 目 的 了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。2．.充液前應(yīng)充分混勻血細(xì)胞懸液，充液要連續(xù)、適量，充液后應(yīng)待血細(xì)胞下沉后再計(jì)數(shù)。依次計(jì)數(shù)并記錄５個(gè)中方格中分別有多少個(gè)紅細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)用虹彩、集光器、反光鏡等調(diào)節(jié)入射光角度和強(qiáng)度，認(rèn)清 計(jì)數(shù)室位置。搖勻血細(xì)胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置于蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細(xì)胞懸液憑毛細(xì)管作用吸入計(jì)數(shù)室內(nèi)，剛好充滿計(jì)數(shù)室為宜(圖8－3)?？捎糜诔湟河?jì)數(shù)。中央大方格的四角及中心５個(gè)中方格(１６２５者則為四角上的中方格)為紅細(xì)胞或血小板計(jì)數(shù)范圍。四角的大方格又各分為１６個(gè)中方格，這是用來計(jì)數(shù)白細(xì)胞的。因此，放上蓋玻片時(shí)，(圖81)。實(shí)
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