【正文】 凝膠濾過法 (gel filtration) 常用凝膠的種類及性質(zhì) 羧甲基交聯(lián)葡聚糖凝膠〔 CMSephadex) 二乙氨乙基交聯(lián)葡聚糖凝膠〔 DEAESephadex) 磺丙基交聯(lián)葡聚糖凝膠〔 SPSephadex) 苯胺乙基交聯(lián)葡聚糖凝膠〔 QAESephadex) 丙烯酰胺凝膠〔 BioGel P〕 瓊脂糖凝膠〔 Sepharose BioGel A〕 第一百零五頁，共一百五十七頁。 凝膠濾過法 (gel filtration) 常用凝膠的種類及性質(zhì) 葡聚糖凝膠〔 Sephadex G)系列 :G10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 200…Sephadex G 系列只適于在水中應(yīng)用 羥丙基葡聚糖凝膠〔 Sephadex LH20):Sephadex LH20即能在水中也能在有機(jī)溶劑中以及水組成的混合溶劑中應(yīng)用。 (四 ) 根據(jù)物質(zhì)分子大小差異進(jìn)行別離 ? 常用方法 ? 透析法 (dialysis) ? 凝膠濾過法 (gel filtration) ? 超濾法 (ultrafiltration) ? 超速離心法 (ultracentrifugation) ? 膜別離法 (membrane separation) 第一百零二頁，共一百五十七頁。 ※ 本卷須知： A、大孔吸附樹脂使用前需要用乙醇預(yù)處理； B、水溶液上柱，醇梯度洗脫。 C、 pH的影響 D、 溫度 、 流速等 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第一百頁，共一百五十七頁。 〔 乙醇 /水 〕 最常用 。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第九十九頁，共一百五十七頁。 物質(zhì)在溶劑中的溶解度大 ， 樹脂對(duì)此物質(zhì)的吸附力就??；反之就大 。 大孔吸附樹脂 第九十八頁，共一百五十七頁。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 〔 1〕 吸附原理：大孔吸附樹脂是吸附性和分子篩性原理相結(jié)合的別離材料 。 2〕假設(shè)使用聚酰胺柱層別離時(shí)，以不同濃度的甲醇進(jìn)行洗脫，洗脫先后順序。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第九十六頁，共一百五十七頁。 應(yīng)用： A、特別適合于酚類、黃酮類化合物的制備和別離 B、對(duì)生物堿、萜類、甾體、糖類、氨基酸等其它極性與非極性化合物的別離也有著廣泛應(yīng)用。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第九十四頁，共一百五十七頁。 2〕易形成分子內(nèi)氫鍵者，其在聚酰胺上的吸附相應(yīng)減弱 O H O C O H C O O H H O (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第九十三頁，共一百五十七頁。 在水溶液中，有以下規(guī)律： 1〕形成氫鍵的基團(tuán)的數(shù)目越多，那么吸附能力越強(qiáng)。 別離有兩種原理： 在含水的溶劑中，是氫鍵吸附。 第九十頁，共一百五十七頁。一般溶劑的介電常數(shù)按以下順序增大： 環(huán)己烷〔 〕，苯〔 〕，無水乙醚〔 〕，氯仿〔 〕，乙酸乙酯〔 〕，乙醇〔 〕，甲醇〔 〕，水〔 〕 溶劑 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第八十八頁，共一百五十七頁。 第八十七頁，共一百五十七頁。 被別離物質(zhì) ?一般化合物的極性按以下官能團(tuán)的順序增強(qiáng)： ?— CH2— CH2— ， — CH2=CH2— ， — OCH3， — COOR， C=O， — CHO， — NH2， — OH， — COOH 物質(zhì)極性強(qiáng)弱的判斷： (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第八十五頁，共一百五十七頁。從活性炭上洗脫被吸附的物質(zhì)時(shí)，溶劑的極性越小，洗脫能力越強(qiáng)。適于別離極性化合物。硅膠顯微酸性，適于別離酸性和中性化合物，別離生物堿時(shí)需在流動(dòng)相中參加適量的有機(jī)堿；氧化鋁呈堿性，適于別離生物堿等堿性成分，不宜用于別離有機(jī)酸、酚性等酸性成分。 吸附劑 : 常用的極性吸附劑：硅膠、氧化鋁。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第八十二頁，共一百五十七頁。 特點(diǎn)：有選擇性 ， 吸附牢固 ， 有時(shí)不可逆 ， 很少使用 。 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第八十一頁，共一百五十七頁。 特點(diǎn)：無選擇性 ， 吸附與解吸可逆 ， 可快速進(jìn)行 ，故在實(shí)際工作中用得最廣 。 物理吸附 化學(xué)吸附 半化學(xué)吸附 (三 ) 根據(jù)物質(zhì)吸附能力差異進(jìn)行別離 第八十頁，共一百五十七頁。 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十八頁，共一百五十七頁。 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十七頁，共一百五十七頁。 應(yīng)用：適合于別離脂溶性化合物 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十六頁，共一百五十七頁。 應(yīng)用：通常用于別離水溶性或極性較大的成分 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十五頁，共一百五十七頁。 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十四頁，共一百五十七頁。 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第七十三頁，共一百五十七頁。 〔 DCCC〕及高速逆流色譜〔 HSCCC) DCCC (液滴逆流色譜 )和 HSCCC (高速逆流色譜法 ): 是在逆流分溶法根底上創(chuàng)立的色譜裝置，可使流動(dòng)相呈液滴形式在固定相間交換，別離效果好。 〔 CCD〕： 又稱逆流分布法或反流分布法，與兩相溶劑逆流萃取法原理一致，對(duì)于別離具有非常相似性質(zhì)的混合物效果較好。 當(dāng)層析濾紙濕重 〔 W濕 〕 為干重 〔 W干 〕 的 時(shí) ， r=2 設(shè) A、 B兩種 〔 或兩組 〕 物質(zhì)的 Rf值分別為 Rfa 及 Rfb 。 紙色譜與液 液萃取的別離原理都是分配。 用不同 pH的緩沖溶液與有機(jī)溶劑別離酸性、堿性、中性及兩性物質(zhì) (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第六十九頁，共一百五十七頁。 游離型 —— 極性小的溶劑 離解型 —— 極性大的溶劑 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第六十七頁，共一百五十七頁。 b = KA / KB β≥100，一次萃取就可實(shí)現(xiàn)根本別離 100 ≥β≥10，需萃取 10~12次 β≤2，需萃取 100次以上 β≌ 1，無法實(shí)現(xiàn)別離 (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第六十六頁，共一百五十七頁。 常見的方法有：簡單的液液萃取法、紙色譜、逆流分溶法〔 CCD)、液滴逆流色譜〔 DCCC)、高速逆流色譜〔 HSCCC)、氣液分配色譜〔 GC或 GLC)、液液分配色譜〔 LLC或 LC) (二 )根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 第六十四頁，共一百五十七頁。 ： pb2+、 Ca2+ 等金屬離子可與酸、堿性化合物生成不溶于水的沉淀而析出。 第六十二頁，共一百五十七頁。 ： 水 /醇法：水提液 +醇 〔 數(shù)倍 〕 ：可沉淀多糖 、 蛋白性物 質(zhì) 〔 雜質(zhì) 〕 。 二、天然藥物有效成分的別離與精制 〔一〕根據(jù)物質(zhì)溶解度的差異進(jìn)行別離 〔二〕根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比不同進(jìn)行別離 〔三〕根據(jù)物質(zhì)的吸附性差異進(jìn)行別離 〔四〕根據(jù)物質(zhì)分子大小的差異進(jìn)行別離 〔五〕根據(jù)物質(zhì)離解程度不同進(jìn)行別離 第六十一頁，共一百五十七頁。 固體物質(zhì)如樟腦等受熱在低于其熔點(diǎn)的溫度下，不經(jīng)過熔化就可直接轉(zhuǎn)化為蒸氣，蒸氣遇冷后又凝結(jié)為固體稱之為升華。 第五十八頁，共一百五十七頁。 適用于：具有揮發(fā)性的，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，與水不發(fā)生反響，且難溶或不溶于水的成分的提取。 16524378常壓微波回流裝置示意圖 5. 銅管 6. 冷凝管 第五十六頁，共一百五十七頁。 第五十四頁，共一百五十七頁。 第五十二頁，共一百五十七頁。 燒瓶 滲漉筒 第五十頁，共一百五十七頁。 ： 浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)提取法、超臨界流體萃取法、超聲波提取技術(shù)、微波提取法 〔一〕、溶劑提取法 第四十八頁，共一百五十七頁。 ： ： 〔甲醇、乙醇、丙酮〕： 〔石油醚、苯、乙醚、 氯仿〕： 〔一〕、溶劑提取法 第四十六頁，共一百五十七頁。 一、天然藥物有效成分的提取 提取方法： ? 溶劑提取法 ? 水蒸氣蒸餾法 ? 升華法 第四十四頁，共一百五十七頁。 第四十二頁，共一百五十七頁。 〔五〕復(fù)合途徑 O O OCH3C H3OO HC H3O HN HOM e OC O N H2C OO H 新生霉素三、生物合成途徑 第四十一頁，共一百五十七頁。 〔二〕甲戊二羥酸途徑和脫氧木酮磷酸酯途徑 (MVA途徑〕 合成成分類別：萜類、甾體類 〔 DXP途徑〕 三、生物合成途徑 第三十九頁，共一百五十七頁。 C6C3單元：多由 L苯丙氨酸和 L酪氨酸轉(zhuǎn)化 C6C2N單元：前體為 L苯丙氨酸和 L酪氨酸 吲哚 C2N單元： L色氨酸中吲哚環(huán) C4N單元：來源 L鳥