【正文】 同 系 畢業(yè)論文（設(shè)計）工作領(lǐng)導(dǎo)小組 意見： 符合答辯資格，同意答辯 □ 不符合 答辯資格，不同意答辯□ （公章） 年 月 日 17 注： 此表為學(xué)生 畢業(yè)論文（設(shè)計） 定稿后申請答辯，及系領(lǐng)導(dǎo)小組對申請答辯學(xué)生進(jìn)行資格審查時用；資格審查項目 由指導(dǎo)教師填寫。結(jié)果表明，乙醇回流提取喜樹葉黃酮的最佳工藝條件為 1:40 料液比，60%乙醇，溫度 80℃ ，每次提取 90 min，提取三次。 本實驗首先對可能影響喜樹葉黃酮提取的五個因素：料液比，提取次數(shù)，乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，每次提取時間進(jìn)行單因素試驗，結(jié)果可以看出各因 素與提取率的大致關(guān)系，并找出了三個顯著影響因素即料液比，乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 4 月 5 日 指導(dǎo)教師簽名： 答辯小組組長意見 (對情況是否屬實做出意見 ) 組長 (簽名 )： 20xx 年 4 月 18 日 湖南科技學(xué)院畢業(yè)論文答辯申請暨資格審查表 學(xué)生姓名 王凱 學(xué) 號 20xx07002213 系 別 生化系 專 業(yè) 生物工程 班 級 生物工程 0902 指導(dǎo)教師 王宗成 畢業(yè)論文題目： 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝 15 內(nèi)容綜述（對畢業(yè)論文的研究步驟和方法、主要內(nèi)容及創(chuàng)新之處 進(jìn)行綜述，提出答辯申請）： 本論文首創(chuàng)性地對喜樹葉進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化黃酮提取工藝，對開發(fā)喜樹葉資源具有一定的研究價值和現(xiàn)實意義。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 3 月 8 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (八 ) DesignExpert 處理細(xì)節(jié)。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 3 月 7 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (七 ) 分組開展。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 3 月 5 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (六 ) 。 。 度計注意事項。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 3 月 1 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (四 ) 。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 9 月 25 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄（三 ) 。 學(xué) 生 簽 名： 20xx 年 9 月 18 日 指導(dǎo)教師簽名： 指導(dǎo)內(nèi) 容 記錄 (二 ) 。了解和熟悉響應(yīng)面分析法的原理和實際應(yīng)用。 會議主持人： 記 錄 人： 20xx 年 01 月 13 日 指導(dǎo)小組意見 負(fù)責(zé)人簽名： 年 月 日 系 意 見 負(fù)責(zé)人簽名： 年 月 日 注：此表由學(xué)生本人填寫，一式三份，一份留系里存檔，指導(dǎo)老師和本人各保存一份 湖南科技學(xué)院畢業(yè) 論文 指導(dǎo)過程記錄表 畢業(yè)論文 題目 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工 藝 學(xué)生姓名 王凱 學(xué)號 20xx07002213 專業(yè)班級 生物工程 0902 指導(dǎo)教師 王宗成 職稱 助教 系（教研室） 生化系 指導(dǎo)過程記錄 指導(dǎo)內(nèi)容 記錄 (一 ) ，特別是喜樹黃酮提取工藝的研究現(xiàn)狀。影響黃酮提取的單因素主要有：乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，提取時間，提取次數(shù)，料液比，不同粒度。我的實驗是從單因素實驗的基礎(chǔ)上選定幾個關(guān)鍵因素，采用響應(yīng)面設(shè)計及 DesignExpert 軟件分析方法，這個是實驗的重點，以此來 尋求黃銅提取工的最佳綜合工藝條件。報告時應(yīng)把實驗的目的，實驗的主要方法和過程，實驗的結(jié)果處理等概括性呈現(xiàn)，知道要做什么，怎么做，怎樣做好。 2 主要措施： 中國學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)，萬方數(shù)據(jù)查找文獻(xiàn)，回流提取， 單因素分析，響應(yīng)面設(shè)計分析 。 20xx 年 12 月至 20xx年 4 月，準(zhǔn)備實驗器材和原料按照實驗方案進(jìn)行實驗，分析實驗結(jié)果。 20xx 年 10 月上旬，查閱資料，明確論文方向。將試驗所得數(shù)據(jù)列成表格，若根據(jù)最佳的提取條件所得的總黃酮的提取率均大于響應(yīng)面設(shè)計中總黃酮的提取率，則所得出的最佳工藝條件合理，同時也表明此工藝具有較好的穩(wěn)定性。 利用 DesignExpert 軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到實驗結(jié)果。 不同粒度的影響 取樣品 1g，乙醇體積分?jǐn)?shù) 70%， 70℃ 分別于 20 目、 40 目、 60 目、 80 目萃取 ,回流提取120min，測定提取液黃酮含量，并計算得率。 提取次數(shù)的影響 取樣品 1g， 乙醇體積分?jǐn)?shù) 70%，在 70℃ 萃取 ,回流提取 120min，分別萃取 1 、 2 、 3 、4 次，測定提取 液黃酮含量，并計算得率。 取樣品 1g，乙醇體積分?jǐn)?shù) 60%，分別于 50℃ 、 60℃ 、 70℃ 、 80℃ 萃取 ， 回流提取 120min，測定提取液黃酮含量，并計算得率。 總黃酮提取率（ mg/g） = mCNV 式中， C 為測定樣品溶液總黃酮濃度（ mg/mL）； N 為稀釋倍數(shù)； V 為最初樣品定容體積（ mL）； m 為樣品質(zhì)量（ g） 。 測定方法 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制方法操作，測定吸光 度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出測定樣品溶液總黃酮濃度 C。取該溶液 mL，轉(zhuǎn)移至 25 mL 容量瓶中，再用 70%乙醇 定容至刻度，搖勻。取出樣品濾紙包，先置通風(fēng)處晾干，再將濾紙包置烘箱中 130 ℃ 烘干，放入干燥器中冷卻備用。 樣品處理方法 將葉片剪成約 1 cm 長度，用粉碎機(jī)粉碎，再在 105℃ 烘至恒重。 黃酮含量測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別取 0. 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0 mL的 0. 1mg/mL 蘆 丁標(biāo)準(zhǔn)溶液于 6 支比色管中，分別加入 0. 3 mL 5%亞硝酸鈉，放置 6 min，加 0. 3 mL 10%硝酸鋁后放置 6 min,，再加1. 0mol/L NaOH ，加 70%乙醇定容至 10 mL，搖勻，放置 12min 得測定液。 主要儀器： T6 可見分光光度計、 TE124S 電子天平、 RE52B 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。 主要內(nèi)容： 試驗 1 材料、試劑及儀器 試驗材料 原料： 20xx 年 9 月下旬，喜樹葉采自湖南科技學(xué)院校園，經(jīng)清洗 、烘干、粉碎，室溫保存?zhèn)溆谩?相對于正交設(shè)計，響應(yīng)面設(shè)計 試驗次數(shù)少、周期短，求得的同歸方程精度高、能研究幾種因素間交互作用的回歸分析方法 [1213]。 因此 ，本論文首創(chuàng)性地 對喜樹葉進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化黃酮提取工藝對開發(fā)喜樹葉資源具有一定的研究價值和現(xiàn)實意義。但目前對喜樹的開發(fā)利用僅限于提取抗癌藥物喜樹堿，其資源沒有得到充分利用，特別對葉子的開發(fā) 利用相對較少。 近些年來國內(nèi)，從中草藥中提取分離黃酮類化舍物的工作開得較為廣泛 。大量研究顯示，黃酮類化合物有強(qiáng)大的生理活性和藥用價值，具有抗腫瘤、護(hù)肝、抗炎、抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)等諸多功效，同時還能抑制脂質(zhì)過氧化作用、血小板凝集、毛細(xì)管滲透性以及脆性等 [3]。絕大多數(shù)植物體內(nèi)都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發(fā)育、開花、結(jié)果以及 抗菌 防病等方起著重要的作用。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具堿性，能與強(qiáng)酸 成鹽，其 羥基 衍生物多具黃色，故又稱黃堿素或黃酮。 主要分布于我國長江流域及以南地區(qū)，為我國闊葉樹中的珍品之一，具有很高的觀賞價值，是綠化、美化環(huán)境的優(yōu)良綠蔭樹和風(fēng)景樹，同樣也是 非常 重要藥用樹種之一 [1]。 系意見： 負(fù)責(zé)人簽名： 注： 本任務(wù)書一式三份，由指導(dǎo)教師填寫，經(jīng)系畢業(yè)論文領(lǐng)導(dǎo)小組審批后一份下達(dá)給學(xué)生，一份交指導(dǎo)教師，一份留系里存檔。 20xx 年 12 月至 20xx年 4 月，準(zhǔn)備實驗器材和原料按照實驗方案進(jìn)行實驗，分析實驗結(jié)果。 20xx 年 10 月上旬，查閱資料，明確論文方向。 （ 4）通過實驗分析，掌握響應(yīng)面分析 DesignExpert 軟件的使用的基礎(chǔ)技能。 （ 2）通過實驗，培養(yǎng)形成嚴(yán)謹(jǐn) 科學(xué)的態(tài)度和一絲不茍的學(xué)習(xí)習(xí)慣。 能力要求 （ 1）通過完成畢業(yè)論文，掌握科研工作中查找文獻(xiàn)數(shù)據(jù)并學(xué)會閱讀文獻(xiàn)。 （ 2）在分析影響因素時要有實例支持，歸納論點時要有理有據(jù)。 （ 3）采用的響應(yīng)面分析是優(yōu)越的分析法，要求嚴(yán)謹(jǐn)，綜合分析。 本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān) 。 本科學(xué)生畢業(yè)論文 題 目 （ 中文） ： 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝 （英文） ： Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Camptotheca acuminata leaves Using Response Surface Methodology 院 （系） 生命科學(xué)與化學(xué)工程系 專業(yè)、年級 生物工程專業(yè) 20xx級 20xx 年 5 月 10 日 湖南科技學(xué)院本科畢業(yè)論文誠信聲明 本人鄭重聲明：所呈交的本科畢業(yè)論文（設(shè)計），是本人在指導(dǎo)老師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果，成果不存在知識產(chǎn)權(quán)爭議，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體均已在文中以明確方式標(biāo)明。 本科畢業(yè)論文作者簽名： 年 月 日 畢業(yè)論文 任務(wù)書 課題名稱： 響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝 學(xué)生姓名： 王凱 系 別： 生命科學(xué)與化學(xué)工程系 專 業(yè)： 生物工程 指導(dǎo)教師： 王宗成 20xx 年 01 月 13 日 關(guān)鍵詞： 響應(yīng)面 喜樹葉 黃酮提取 回流提取 畢業(yè)論文（設(shè)計）內(nèi)容要求： 實驗要求 （ 1）探索喜樹葉黃酮提取有哪些影響因素？那幾個是主要影響因素？ （ 2）本論文利用乙醇回流提取 的方法，探究設(shè)計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝，要求實驗裝置科學(xué)合理， 可行性， 有代表性。 論文要求 （ 1）經(jīng)過系列實驗，獲取真實數(shù)據(jù)，保證論文論據(jù)﹑數(shù)據(jù)的真實性。 （ 3）行文結(jié)構(gòu)合理，層次分明，格式規(guī)范。設(shè)計試驗方案、分析解決實驗中出現(xiàn)的問題以及實驗資料和數(shù)據(jù)的分析處理能力。 （ 3）通過本實驗主要提升我們對于喜樹黃酮提取的基礎(chǔ)能力，也可為其他植物葉黃酮的提取做出借鑒。 主要研究方法： 查閱文獻(xiàn)法 回流提取法 單因素分析法 響應(yīng)面軟件分析法 驗證法 文獻(xiàn)查閱指引 ： [1