【正文】 喜樹 (Camptotheca acuminata Dee)屬紫樹科 (Nyssaeeae)，別名旱蓮木，是我國特有樹種之一，主要分布于我國長江流域及以南地區(qū)，為我國闊葉樹中的珍品之一，具有很高的觀賞價值，是綠化、美化環(huán)境的優(yōu)良綠蔭樹和風景樹，同樣也是非常重要藥用樹種之一 [1]。王學利得到水提取喜樹葉總黃酮的最優(yōu)提取方案：以 pH 值 10 的水為溶劑，提取溫度 91100℃ ，溶劑體積 5060 mL，提取時間 2537 min，可最大限度地提取喜樹葉中的黃酮 [4]。 中心復合設計仍然是當前應用得最多的 RSM 經(jīng)典設計方法 [12]。 5 實驗方法 與步驟 樣品處理 將葉片剪成適當長度，再在 105℃ 烘至恒重。響應面分析也是一種最優(yōu)化方法，它是將體系的響應（如萃取化學中的萃取率）作為一個或多個因素（如萃取劑濃度、酸度等）的函數(shù)，運用圖形技術將這種函數(shù)關系顯示出來，以 3 供我們憑借直覺的觀察來選擇試驗設計中的最優(yōu)化條件。 2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀 近些年來國內(nèi)，從中草藥中提取分 離黃酮類化 合 物的工作開得較為廣泛。這些結論為提高喜樹葉黃酮利用率及其工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的理論參考。 10 論文篇幅 10000 字左右。 5 寫作水平 論點鮮明；論據(jù)充分；條理清晰；語言流暢。本實驗首先對可能影響喜樹葉黃酮提取的五個因素：料液比，提取次數(shù)，乙醇體積分數(shù)，提取溫度，每次提取時間進行單因素試驗，結果可以看出各因素與提取率的大致關系，并找出了三個顯著影響因素即料液比，乙醇 體積分數(shù)，提取溫度。 。 三、張祖姣老師提問：黃酮的最佳可見光吸收波長是多少？影響黃酮提取的單因素有哪些？那個響應面的分析軟件你會用嗎？ 我的回答： 510nm。 料液比的影響 取樣品 1g，乙醇體積分數(shù) 70%， 70℃ 分別于 1: 1: 1: 1: 1:50 萃取， 回流提取 120min，測定提取液黃酮含量，并計算得率。 2 試驗方法 標準溶液的配制 稱取約 20mg 蘆 丁標準品于稱量瓶中置 105℃ 烘箱下烘干至恒重 ,干燥器中冷卻，精確稱取 10 mg 蘆丁 標準品，用 70%乙醇定容至 100 ml 為標準液。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結合成苷類，小部分以游離態(tài)（苷元）的形式存在。 （ 3）行文結構合理，層次分明，格式規(guī)范。 能力要求 （ 1）通過完成畢業(yè)論文，掌握科研工作中查找文獻數(shù)據(jù)并學會閱讀文獻。絕大多數(shù)植物體內(nèi)都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發(fā)育、開花、結果以及 抗菌 防病等方起著重要的作用。 黃酮含量測定標準曲線的繪制 分別取 0. 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0 mL的 0. 1mg/mL 蘆 丁標準溶液于 6 支比色管中，分別加入 0. 3 mL 5%亞硝酸鈉，放置 6 min，加 0. 3 mL 10%硝酸鋁后放置 6 min,，再加1. 0mol/L NaOH ，加 70%乙醇定容至 10 mL，搖勻，放置 12min 得測定液。 不同粒度的影響 取樣品 1g，乙醇體積分數(shù) 70%， 70℃ 分別于 20 目、 40 目、 60 目、 80 目萃取 ,回流提取120min，測定提取液黃酮含量，并計算得率。影響黃酮提取的單因素主要有：乙醇體積分數(shù)，提取溫度，提取時間，提取次數(shù)，料液比，不同粒度。 學 生 簽 名： 20xx 年 3 月 5 日 指導教師簽名： 指導內(nèi)容 記錄 (六 ) 。然后以提取率為響應值，進行了經(jīng)典的三因素三水平BoxBenhnken 試驗設計，并通過 DesignExpert 軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析，得到相關響應面數(shù)據(jù)和分析結果。 15 寫作規(guī)范 符合學術論文的基本要求。 5 實評總分 成績等級 22 評閱教師評審意見： 評閱教師簽名： 說明：評定成績分為優(yōu)秀、良好、中等、及格、不及格五個等級，實評總分 90— 100 分記為優(yōu)秀， 80— 89 分記為良好， 70— 79 分記為中等， 60— 69 分記為及格， 60 分以下記為不及格。 【關鍵詞】 響應面法 ； 喜樹葉 ； 黃酮提取 II Optimization of Extraction Process of Flavonoids from Camptotheca acuminata leaves Using Response Surface Methodology Abstract Studies have shown that the content of flavonoids in Camptotheca acuminata leaves is relatively abundant. In order to improve the extraction efficiency of flavonoids in Camptotheca acuminata leaves, studies of the paper used airdry Camptotheca acuminata leaves as raw material, ethanol as extraction agent. In this extraction process, the single factor experiment and response surface experimental design analysis method were applied to reflux extraction, to research reflux extraction conditions and their impact on the yield of flavonoids extraction results, and seek the optimal conditions. The single factor experiments first had five factors that may affect the yield of flavonoids extraction: solidliquid ratio, extraction times, ethanol concentration, extraction temperature and extraction time and the results had shown that the approximate relationship of the various factors and extraction rate, and three significant factors: solidliquid ratio, ethanol volume fraction, extraction temperature. Then the classic three factors and three levels BoxBenhnken experimental design was carried out to establish a quadratic regression model for the extraction efficiency of total flavonoids, and analysis of the experimental data was processed by the DesignExpert software. The optimal conditions of ethanol extract for flavonoids in Camptotheca acuminata leaves were obtained as follows: solidliquid ratio1:40, ethanol volume fraction 60%, extraction temperature 80 176。已有 從黃芩、水芹、銀杏葉、竹葉、龍柏葉、 楮樹葉 中提取分離了許多黃酮類化合物 [4]。 顯然，要構造這樣的響應面并進行分析以確定最優(yōu)條件或尋找最優(yōu)區(qū)域，首先必須通過大量的量測試驗數(shù)據(jù)建立一個合適的數(shù)學模型（ 建模 ），然后再用此數(shù)學模型作圖。采用 Soxhlet 提取法，以沸程為 30℃ 60℃ 的石油醚為脫脂劑于 45℃ 水浴中脫脂 3 次每次 2 小時，充分除去樣品 中脂類和脂溶性色素。對于非線性體系可作適當處理化為線性形式。從喜 樹中提取總黃酮的研究也鮮見報道。 camptotheca acuminata leaves。 2．廖陽老師提問： ①英文 標題是什么意思，在我印象中是方法論，研究法的意思，你怎么解釋？ 答：老師你是對的。 10 論文篇幅 10000 字左右。這些結論為提高喜樹葉黃酮利用率及其工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的理論參考。 學 生 簽 名： 20xx 年 3 月 7 日 指導教師簽名： 指導內(nèi)容 記錄 (七 ) 分組開展。 會議主持人： 記 錄 人： 20xx 年 01 月 13 日 指導小組意見 負責人簽名： 年 月 日 系 意 見 負責人簽名： 年 月 日 注：此表由學生本人填寫，一式三份，一份留系里存檔，指導老師和本人各保存一份 湖南科技學院畢業(yè) 論文 指導過程記錄表 畢業(yè)論文 題目 響應面設計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工 藝 學生姓名 王凱 學號 20xx07002213 專業(yè)班級 生物工程 0902 指導教師 王宗成 職稱 助教 系（教研室） 生化系 指導過程記錄 指導內(nèi)容 記錄 (一 ) ，特別是喜樹黃酮提取工藝的研究現(xiàn)狀。 利用 DesignExpert 軟件對試驗數(shù)據(jù)進行分析，得到實驗結果。 樣品處理方法 將葉片剪成約 1 cm 長度，用粉碎機粉碎，再在 105℃ 烘至恒重。大量研究顯示，黃酮類化合物有強大的生理活性和藥用價值，具有抗腫瘤、護肝、抗炎、抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)等諸多功效，同時還能抑制脂質過氧化作用、血小板凝集、毛細管滲透性以及脆性等 [3]。 （ 2）通過實驗，培養(yǎng)形成嚴謹 科學的態(tài)度和一絲不茍的學習習慣。 論文要求 （ 1）經(jīng)過系列實驗，獲取真實數(shù)據(jù)，保證論文論據(jù)﹑數(shù)據(jù)的真實性。 黃酮類 化合物 （ flavonoids）是一類存在于 自然界 的、具有 2苯基色原酮（ flavone）結構的化合物。 主要試劑： 蘆 丁 標準品 、 95%乙醇 ， 石油醚等 其他試劑均為分析純。 取樣品 1g， 乙醇體積分數(shù) 70%，在 70℃ 分別萃取，回流提取 30min、 60min、 90min、 120min、150min、 180min，測定提取液黃酮含量，并計算得率。 二、 劉小文老師提問：你的實驗中黃酮提取的主要方法是什么？ 我的回答：我的黃銅提取主要采用的是乙醇回流提取，利用分光光度計測吸光度，使用標準曲線求黃酮提取率。 學 生 簽 名： 20xx 年 3 月 4 日 指導教師簽名： 指導內(nèi)容 記錄 (五 ) 。 湖南科技學院本科畢業(yè)論文評審表 論文題目 響應面設計優(yōu)化喜樹葉黃酮提取工藝 作者姓名 王凱 所屬系、專業(yè)、年級 生化 系 生物工程 專業(yè) 20xx 年級 指導教師 姓名、職稱 王宗成 助教 字 數(shù) 10000 定稿日期 18 中 文 摘 要 研究顯示，喜樹葉中黃酮類化合 物含量相對豐富。 10 外文應用 能力 能閱讀、翻譯一定量的本專業(yè)外文資料、外文摘要和外文參考書目（特殊專業(yè)除外）體現(xiàn)一定的外語水平。 15 寫作規(guī)范 符合學術論文的基本要求。本實驗首先對可能影響喜樹葉黃酮提取的五個因素：料液比，提取次數(shù)，乙