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特殊生物顯微鏡的原理與使用-文庫吧資料

2025-03-08 11:51本頁面
  

【正文】 微結構 ? 圖象呈浮雕狀的立體感 ? 觀察效果更加逼真 1 原理 通過特制的棱鏡將偏振光分解相互垂直,強度相等的光束,光束載極近的兩點(小于顯微鏡的分辨率)上通過被檢物體,從而在相位上略有差別,使圖象呈現(xiàn)出立體三維感覺。 這種介質稱為旋光物質。如電氣石晶體對自然光的某一振動方向上的光振動幾乎完全吸收,而垂直于該方向的光振動只稍微減弱后通過。它的折射率隨方向而變化,并且不一定在入射面內(nèi)傳播 。對于晶體一切方向都具有相同的折射率,且在入射面內(nèi)傳播。 在生物樣品中,肌肉纖維、骨骼和牙齒等具有各向異性,淀粉粒、染色體和紡錘體等具有雙折射性,因此被用于組織細胞的化學研究。 雙折射現(xiàn)象:一束光射入各向異性晶體后有兩束折射光的現(xiàn)象。 二、起偏和檢偏 起偏:使自然光(或非線偏振光)變成線偏振光的過程。 v 0 H E 只有橫波才有偏振現(xiàn)象 ? 光矢量只在某一固定的方向上振動。活細胞無色透明,一般光鏡下不易分辨細胞輪廓及其結構,組織培養(yǎng)研究常用的是倒置相差顯微鏡。在更換不同倍率的相差物鏡時,每一次都要使用相匹配的環(huán)狀光闌。再升降集光器并調(diào)節(jié)其下的螺旋使亮環(huán)的大小與暗環(huán)一致,然后左右前后調(diào)節(jié)環(huán)狀光闌聚光器上的調(diào)節(jié)鈕,使兩環(huán)完全重合。 旋轉環(huán)狀光闌,使光闌的直徑和孔寬與所使用的相差物鏡相適應,如相差物鏡為 40X時應用 40X標示孔的光闌。 ( 2)調(diào)焦 打開光源,旋轉集光器轉盤,將“ 0” 對準標示孔,使普通聚光器部分進入光路。 ( 1)相差裝置的調(diào)換安裝 卸下普通顯微鏡使用的聚光器,將環(huán)狀光闌裝在聚光器支架上,把綠色濾光片放在上面,它可吸收紅色和藍色光,使波長范圍小的單色光線進行照明,并有吸熱作用,能使相差觀察獲得良好的效果。相差顯微鏡在使用時,聚光鏡下面環(huán)狀光闌的中心與物鏡光軸要完全在一直線上,必需調(diào)節(jié)光闌的亮環(huán)和相板的環(huán)狀圈重合(共軛重合),才能發(fā)揮相差顯微鏡的效能。它除能推遲直射光線或衍射光的相位以外,還有吸收光使亮度發(fā)生變化的作用。 ? 環(huán)狀光闌是由大小不同的環(huán)狀孔形成的光闌,它們的直徑和孔寬是與不同的物鏡相匹配的。因此可用以觀察活細胞或未染色標本。而活細胞和未經(jīng)染色的生物標本,因細胞各部微細結構的折射率和厚度略有不同,光波通過時,波長和振幅并不發(fā)生變化,僅相位有變化 (相應發(fā)生的差異即相位差 ),而這種微小的變化,人眼是無法加以鑒別的,故在普通顯微鏡下難以觀察到。 2 相差顯微鏡 原理 ? 光波有振幅(亮度)、波長(顏色)及相位 (指在某一時間上光的波動所能達到的位置 )的不同。上下緩慢調(diào)整聚光鏡,使視場光圈像清晰可見。向上緩慢調(diào)升聚光鏡,使鏡頭油與載玻片底面相接觸后。
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